II型糖尿病患者和糖尿病鼠的红细胞形态观察
作者：李延延 程时** 潘子昂 郑肖钊 王叶 李宁章 王泰龄 郭赛珊 郭赛琪 梁晓春 王香定
单位：中日友好医院* 李延延 程时** 潘子昂 郑肖钊 王叶 李宁章 王泰龄 北京协和医院郭赛珊 郭赛琪 梁晓春 王香定
关键词：
中华医学杂志920217 我们应用扫描电镜观察了非胰岛素依赖型糖尿病患者和实验性糖尿鼠的红细胞形态,现将研究结果报告于下.
对象与方法
一.研究对象
1.按WHO标准诊断为非胰岛素依赖型糖尿病,同时经临床检查无血液病的患者16例(男3例,女13例),年龄45-67岁,空腹血糖10.9±0.6mmol/L.根据血清胆固醇值又分为两组:(1)胆固醇>6.5mmol/L(半年内测3次,均值为7.1±0.2mmol/L为高胆固醇组,共10例;(2)胆固醇<5.2mmol/L(4.4±0.2mmol/L)为正常胆固醇组,共6例.体检健康无糖尿病家族史的正常人12名(男3名,女9名)年龄45-63岁；空腹血糖为4.3±0.2mmol/L,血清胆固醇为4.8±0.2mmol/L。
, http://www.100md.com
2.昆明雄性小鼠11只,体重25-40g.尾静脉注射四氧嘧啶(100mg/kg)制成糖尿病鼠模型;于第40-68天采血观察,空腹血糖为22.9±1.7mmol/L.对照昆明雄性小鼠10只,体重25-40g,空腹血糖6.4±0.3mmol/L。
3.Wistar大鼠20只,雌雄兼有,体重264-402g.腹腔一次性注射链菌脲霉素(60mg/kg)制成糖尿病鼠模型,于注射后7个月采血观察;空腹血糖25.3±2.4mmol/L,胆固醇2.0±0.1mmol/L.对照Wistar大鼠17只,雌雄兼有,体重300-612g;空腹血糖4.4±0.4mmol/L,胆固醇2.0±0.1mmol/L。
二.方法
用塑料注射器抽取人空腹静脉血;采用在等渗肝素液中浸泡过的细塑料管,插入鼠眼内眦静脉,引静脉血一滴.采血时避免凝血.血糖,血脂测定分别用葡萄糖氧化酶法与酶比色法.红细胞扫描电镜标本制备,参看文献[1]。
, 百拇医药
结果
在扫描电镜下可见糖尿病患者有数种变形红细胞,呈嵴形,口形和圆隆起形等.嵴形红细胞有两个凹陷,其间呈嵴状隆起(图1).口形红细胞为红细胞的一侧向内呈一凹陷,另一侧向外隆起(图2).圆隆起形红细胞(简称ECP),一般都保持圆盘形,但在中央凹陷处或在周边有一个或多个大小不等的圆形隆起,如细胞上的赘生物(图2).在16例糖尿病患者中,均见口形红细胞,检出率为2.47±0.35%();12名正常人是0.39±0.10%;两组有非常显著差异(P<0.001).在10例伴高胆固醇的糖尿病患者中,ECP的平均检出率为5.11±1.73%;12名正常人ECP检出率为0.06±0.04%;两组有显著差异(P<0.05).但在高胆固醇组,血清胆固醇值和ECP的检出率无明显相关.6例胆固醇正常的糖尿病患者,ECP的平均检出率为0.05±0.03%,与正常人无显著差异.11只糖尿病小鼠,ECP(图3)的检出率为9.38±3.43%;10只正常小鼠为0.92±0.21%,两组有显著差异(P<0.05).糖尿病大鼠的口形红细胞有的同图1,有的凹陷变浅(图4).嵴形红细胞有的双凹陷对称,也有的一大一小,或双凹陷明显充浅(图5).在20只糖尿病大鼠中,口形红细胞与嵴形红细胞的总检出率为0.87±0.14%,17只正常大鼠为0.42±0.10%,两组有显著差异(P<0.05)。
, 百拇医药
讨论
糖尿病患者由于胰岛素的绝对或相对缺乏,影响了红细胞内糖的酵解和体内蛋白质的合成,使ATP生成减少,红细胞内ATP含量下降[2],其膜的Na-K-ATP酶活性降低[3],胞内钠含量升高,水分被动进入,从而易造成红细胞体积增加;如其表面积不增加,就可能出现口形,嵴形,双凹陷变浅等比表面积减小的红细胞.在糖尿病伴有高胆固醇时,由于膜胆固醇和磷脂的摩尔浓度比与血浆中胆固醇和磷脂的摩尔浓度比呈正相关,过多的脂质可能被载入红细胞膜,造成膜面积增加,在表面形成圆形突起[5]。
图1 糖尿病患者红细胞扫描电镜观察,A为嵴形红细胞 ×2000 图2 糖尿病患者红细胞扫描电镜观察,B为ECP,C为口形红细胞 ×2000 图3 糖尿病小鼠红细胞扫描电镜观察,D为有多个圆形隆起的ECP ×2000 图4糖尿病大鼠红细胞扫描时电镜观察,E为凹陷变浅的口形红细胞 ×3000 图5 糖尿病大鼠红细胞扫描电镜观察,F为双凹陷变浅的嵴形红细胞 ×3000
, 百拇医药
参考文献
1.程时,等.高胆固醇血症患者的红细胞形态及膜流动性.中华心血管病杂志1988;6:301
2.汪长森,等.糖尿病患者红细胞内几种核苷酸含量的测定,中华内分泌代谢杂志1989;5:218
3.Finotti P,Palatini P.Reduction of erythrocyte (Na+-K+)ATPase activity in type I(insulin-dependent)diabetic subjects and it activation by homologous plasma.Diabetologia 1986;29:623
4陶鸿根,等.糖尿病患者红细胞钠含量和钠转运,中华内分泌代谢杂志1989;5:152
5.潘华珍,等.生物膜与疾病.北京:人民卫生出版社,1986;75
*北京,邮政编码100029 **北京医科大学生物物理教研室, 百拇医药
单位：中日友好医院* 李延延 程时** 潘子昂 郑肖钊 王叶 李宁章 王泰龄 北京协和医院郭赛珊 郭赛琪 梁晓春 王香定
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中华医学杂志920217 我们应用扫描电镜观察了非胰岛素依赖型糖尿病患者和实验性糖尿鼠的红细胞形态,现将研究结果报告于下.
对象与方法
一.研究对象
1.按WHO标准诊断为非胰岛素依赖型糖尿病,同时经临床检查无血液病的患者16例(男3例,女13例),年龄45-67岁,空腹血糖10.9±0.6mmol/L.根据血清胆固醇值又分为两组:(1)胆固醇>6.5mmol/L(半年内测3次,均值为7.1±0.2mmol/L为高胆固醇组,共10例;(2)胆固醇<5.2mmol/L(4.4±0.2mmol/L)为正常胆固醇组,共6例.体检健康无糖尿病家族史的正常人12名(男3名,女9名)年龄45-63岁；空腹血糖为4.3±0.2mmol/L,血清胆固醇为4.8±0.2mmol/L。
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2.昆明雄性小鼠11只,体重25-40g.尾静脉注射四氧嘧啶(100mg/kg)制成糖尿病鼠模型;于第40-68天采血观察,空腹血糖为22.9±1.7mmol/L.对照昆明雄性小鼠10只,体重25-40g,空腹血糖6.4±0.3mmol/L。
3.Wistar大鼠20只,雌雄兼有,体重264-402g.腹腔一次性注射链菌脲霉素(60mg/kg)制成糖尿病鼠模型,于注射后7个月采血观察;空腹血糖25.3±2.4mmol/L,胆固醇2.0±0.1mmol/L.对照Wistar大鼠17只,雌雄兼有,体重300-612g;空腹血糖4.4±0.4mmol/L,胆固醇2.0±0.1mmol/L。
二.方法
用塑料注射器抽取人空腹静脉血;采用在等渗肝素液中浸泡过的细塑料管,插入鼠眼内眦静脉,引静脉血一滴.采血时避免凝血.血糖,血脂测定分别用葡萄糖氧化酶法与酶比色法.红细胞扫描电镜标本制备,参看文献[1]。
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结果
在扫描电镜下可见糖尿病患者有数种变形红细胞,呈嵴形,口形和圆隆起形等.嵴形红细胞有两个凹陷,其间呈嵴状隆起(图1).口形红细胞为红细胞的一侧向内呈一凹陷,另一侧向外隆起(图2).圆隆起形红细胞(简称ECP),一般都保持圆盘形,但在中央凹陷处或在周边有一个或多个大小不等的圆形隆起,如细胞上的赘生物(图2).在16例糖尿病患者中,均见口形红细胞,检出率为2.47±0.35%();12名正常人是0.39±0.10%;两组有非常显著差异(P<0.001).在10例伴高胆固醇的糖尿病患者中,ECP的平均检出率为5.11±1.73%;12名正常人ECP检出率为0.06±0.04%;两组有显著差异(P<0.05).但在高胆固醇组,血清胆固醇值和ECP的检出率无明显相关.6例胆固醇正常的糖尿病患者,ECP的平均检出率为0.05±0.03%,与正常人无显著差异.11只糖尿病小鼠,ECP(图3)的检出率为9.38±3.43%;10只正常小鼠为0.92±0.21%,两组有显著差异(P<0.05).糖尿病大鼠的口形红细胞有的同图1,有的凹陷变浅(图4).嵴形红细胞有的双凹陷对称,也有的一大一小,或双凹陷明显充浅(图5).在20只糖尿病大鼠中,口形红细胞与嵴形红细胞的总检出率为0.87±0.14%,17只正常大鼠为0.42±0.10%,两组有显著差异(P<0.05)。
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讨论
糖尿病患者由于胰岛素的绝对或相对缺乏,影响了红细胞内糖的酵解和体内蛋白质的合成,使ATP生成减少,红细胞内ATP含量下降[2],其膜的Na-K-ATP酶活性降低[3],胞内钠含量升高,水分被动进入,从而易造成红细胞体积增加;如其表面积不增加,就可能出现口形,嵴形,双凹陷变浅等比表面积减小的红细胞.在糖尿病伴有高胆固醇时,由于膜胆固醇和磷脂的摩尔浓度比与血浆中胆固醇和磷脂的摩尔浓度比呈正相关,过多的脂质可能被载入红细胞膜,造成膜面积增加,在表面形成圆形突起[5]。
图1 糖尿病患者红细胞扫描电镜观察,A为嵴形红细胞 ×2000 图2 糖尿病患者红细胞扫描电镜观察,B为ECP,C为口形红细胞 ×2000 图3 糖尿病小鼠红细胞扫描电镜观察,D为有多个圆形隆起的ECP ×2000 图4糖尿病大鼠红细胞扫描时电镜观察,E为凹陷变浅的口形红细胞 ×3000 图5 糖尿病大鼠红细胞扫描电镜观察,F为双凹陷变浅的嵴形红细胞 ×3000
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参考文献
1.程时,等.高胆固醇血症患者的红细胞形态及膜流动性.中华心血管病杂志1988;6:301
2.汪长森,等.糖尿病患者红细胞内几种核苷酸含量的测定,中华内分泌代谢杂志1989;5:218
3.Finotti P,Palatini P.Reduction of erythrocyte (Na+-K+)ATPase activity in type I(insulin-dependent)diabetic subjects and it activation by homologous plasma.Diabetologia 1986;29:623
4陶鸿根,等.糖尿病患者红细胞钠含量和钠转运,中华内分泌代谢杂志1989;5:152
5.潘华珍,等.生物膜与疾病.北京:人民卫生出版社,1986;75
*北京,邮政编码100029 **北京医科大学生物物理教研室, 百拇医药