替硝唑微型缓释药条的实验研制
替硝唑微型缓释药条的实验研制
沈素勤 丁江生 林一南
摘 要 目的：自制替硝唑微型缓释药条，并进行药物含量测定和体内、体外释放实验，观察剂型的缓释效果。方法：应用流涎冷冻法制备，含量测定法及溶出度测定分析技术。结果：替硝唑缓释药条具有较好的韧性和药物缓释效果，满足临床治疗的要求。结论：替硝唑微型缓释药条适用于感染根管的局部治疗。
关键词：替硝唑；流涎冷冻；缓释剂；根尖周炎
患牙根管内以专性厌氧菌为主的混合感染是牙髓炎、尖周炎致病的主要原因[1]。替硝唑直接用于尖周炎的局部抗感染治疗已有报道。尽管效果肯定，但 因剂型的局限，其应用上受到很大的限制[2]。本研究试图为治疗尖周炎寻 找一类制法简单、成型好、韧性好、载药量大、释药性好、无毒无刺激的新剂型。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 药条材料和制备
取替硝唑5g，聚乙烯醇(PVA)7.2g，甘油7g，山梨醇2g。将聚乙烯醇加适量水，置水浴箱上加热溶解成均匀胶浆，加入替硝唑、甘油、山梨醇，在60℃的水浴上加热并搅拌，以流涎法制成厚约 2mm的膜块，迅速冷冻晾干，切成宽约2mm，长约5mm，有一定硬度和韧性的微型缓释药条。
1.2 药物含量测定
将制备的药条在日本岛津UV-250型上测得200～400nm处的吸收曲线，测得其最大吸收波长为317n m，制备标准曲线。溶液避光放置3 d以上仍稳定，吸收度基本无变化，空白实验辅料不影响 含量测定，回收率良好，确定了含量测定方法。
1.2.1 含量测定方法
, 百拇医药
称取剪碎样品适量(约相当于替硝唑50mg)，置200ml量瓶中，加水适量，加热50℃使替硝唑溶解，振摇45min，放冷至室温，加水稀释到刻度，摇匀，在317nm波长处测定吸收度。另量取替硝唑对照品适量，加水溶解，并稀释成12g/L的溶液，同法测定吸收度，计算即得。
1.2.2 回收率实验
采用加样回收法。精密称取已测定含量样品，置于量瓶中，再按1:1的比例向样品中加入一定量替硝唑对照品，依含量测定法测定，用实验值与样品中总替硝唑含量之差除以加入替硝唑对照品量，计算回收率和变异系数。
1.2.3 体外释放度实验
取两次用量的药条，放于10ml具塞试管中，用2ml移液管加入2ml蒸馏水溶出介质，放入37℃的恒温水浴箱中溶出，分别于不同时间用1ml称液管从试管中吸取1ml释放液于100ml容量瓶内，同时沿装有样品条的试管壁补加1ml37 ℃的蒸馏水恒温放置。吸出的释放液用蒸馏水稀释到刻度，用含量测定法进行测定，计算累计溶出百分率。
, 百拇医药
1.3 体内释放实验
临床选择尖周炎单根管牙40个，常规开髓，去除大部分根髓后，置入替硝唑缓释药条1根，丁香油氧化锌糊剂暂封。随机分为封药3、4、5、6、7d组，每组8个牙。复诊时取出，依含量测定法测定取出的缓释药条内剩余替硝唑量，从而间接反映药物在体内髓腔的释放情况。
2 结果 (表1～3)
表1 药条回收率测定结果(n=5)
样品号
样品替硝唑量
(mg)
加入替硝唑量
(mg)
, http://www.100md.com
实测值
(mg)
回收率
(%)
1
22.74
22.88
45.83
100.91
2
23.63
23.80
48.02
, 百拇医药
102.47
3
22.81
22.42
45.92
103.07
4
24.83
24.90
50.09
101.45
5
24.91
, http://www.100md.com
24.82
49.80
100.28
平均回收率：101.64%，标准差：1.287，变异系数：1.27
结果显示：处方中辅料不干扰替硝唑的测定。表2 不同时相点体外释放累计百分率
取样时间
(h)
吸收度
释放量
(mg)
校正释放量
, http://www.100md.com (mg)
累计释放百分率
(%)
1
0.391
2.05
2.05
29.3
6
0.806
4.23
5.26
75.1
, http://www.100md.com
24
0.713
3.74
6.88
98.3
48
0.365
1.91
6.90
98.6
72
0.175
0.92
, 百拇医药
6.92
98.9
表3 体内髓腔替硝唑累计释放百分率
封药时间(d)
剩余药量(mg)
剩余百分率(%)
累计释放百分率(%)
3
1.330±0.023
53.2
46.8
4
, http://www.100md.com
1.315±0.009
52.6
47.6
5
0.890±0.017
35.6
64.4
6
0.360±0.034
14.4
85.6
7
0.340±0.021
, http://www.100md.com
13.6
86.4
3 讨论 作为常用的膜材料，PVA的抗拉强度、柔韧性、吸湿性和水溶性均最好，且对皮肤和粘膜无刺激性[3]，PVA溶液浇注模具中，经冷冻再解冻后可形成表面光滑、韧性好，能与模具紧密结合的模块，且40℃以下加热不液化。本实验制备的替硝唑缓释药条具有优良的成型性、脱膜性，释放性能良好，且具有一定的韧性，易于插入根管，适合感染根 管的局部使用。
牙齿的根管由于牙本质的包绕，根管缓释药条置于根管后，其药物的溶出和扩散有赖于牙本质小管和根尖孔与根尖组织液及根尖炎症产生的渗出液的沟通。PVA的水溶性很大程度上与其分子量相关，分子量越小水溶性越好，且PVA在温水中溶解度较大[3]。虽然炎症时髓腔内的温度有利于PVA的溶解，但因水分较少，药膜不能充分地吸水而溶解，故PVA药膜在髓腔内形成一个内稠外稀的凝胶体，其表面药物释放迅速，而内部的药物释放缓慢。体外释放度实验表明，药膜可持续释放72h，缓释效果十分明显。
, 百拇医药
药物释放度是评价缓释制剂性能的重要指标之一，体外实验方法简单易行，重复性好，但牙体是一特殊环境，体外释放实验不能很真实地反应体内髓腔释药情况，因此作者同时设计了体内实验[4]，临床选择病例均为尖周炎的单根牙(治疗效果另文报道)。本文仅从取出药条剩余药量的测定采用逆推法来间接获得其体内释放量[4]，更真实地反应替硝唑缓释药条体内药物释放情况。
柏干荣[5]等在对替硝唑的药理研究中认为：单剂量口服2g，服药后2h平均血药浓度为51mg/L，24、48h与72h分别为19.0、4.2、1.3mg/L，而后每天给药1g，给药3d，总剂量为4g。我们研制的缓释药条，每条仅含替硝唑2.5mg，用药量仅为全身用药的1/1600。由于局部用药较全身用药具有更长的持续时间，更稳定的有效浓度，且毒副作用极低等优点，有望成为尖周炎的主要治疗途径，关于制剂的缓释性能还有待于更深入的研究和探讨。
沈素勤(昆明制药股份有限公司 云南 昆明 650021)
, 百拇医药
丁江生(省红会医院 云南 昆明 650021)
林一南(昆明制药股份有限公司 云南 昆明 650021)
参考文献：
[1]Book F,Frazier EH,Thomposon DH,et al.Aerobic and anaerobic micro biolog of perioapical abscess[J].Oral Micro Immuno,1991,6:123
[2]沈素勤.替硝唑用于乳牙急性根尖周炎应急治疗的研究[J].昆明医学院学报，1997，18(2B)：16
[3]奚念朱,主编.药剂学[M].第三版.北京：人民卫生出版社，1994.396
[4]汪竹平，王铎，高静,等.测量甲硝唑根管控释系统药物释放度方法的评价[J].华西口腔医学杂志，1999，17(2)：119
[5]柏干荣,胡友梅.替硝唑的药理与临床应用进展[J].中国药房，1998，9(1)：42, http://www.100md.com
沈素勤 丁江生 林一南
摘 要 目的：自制替硝唑微型缓释药条，并进行药物含量测定和体内、体外释放实验，观察剂型的缓释效果。方法：应用流涎冷冻法制备，含量测定法及溶出度测定分析技术。结果：替硝唑缓释药条具有较好的韧性和药物缓释效果，满足临床治疗的要求。结论：替硝唑微型缓释药条适用于感染根管的局部治疗。
关键词：替硝唑；流涎冷冻；缓释剂；根尖周炎
患牙根管内以专性厌氧菌为主的混合感染是牙髓炎、尖周炎致病的主要原因[1]。替硝唑直接用于尖周炎的局部抗感染治疗已有报道。尽管效果肯定，但 因剂型的局限，其应用上受到很大的限制[2]。本研究试图为治疗尖周炎寻 找一类制法简单、成型好、韧性好、载药量大、释药性好、无毒无刺激的新剂型。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 药条材料和制备
取替硝唑5g，聚乙烯醇(PVA)7.2g，甘油7g，山梨醇2g。将聚乙烯醇加适量水，置水浴箱上加热溶解成均匀胶浆，加入替硝唑、甘油、山梨醇，在60℃的水浴上加热并搅拌，以流涎法制成厚约 2mm的膜块，迅速冷冻晾干，切成宽约2mm，长约5mm，有一定硬度和韧性的微型缓释药条。
1.2 药物含量测定
将制备的药条在日本岛津UV-250型上测得200～400nm处的吸收曲线，测得其最大吸收波长为317n m，制备标准曲线。溶液避光放置3 d以上仍稳定，吸收度基本无变化，空白实验辅料不影响 含量测定，回收率良好，确定了含量测定方法。
1.2.1 含量测定方法
, 百拇医药
称取剪碎样品适量(约相当于替硝唑50mg)，置200ml量瓶中，加水适量，加热50℃使替硝唑溶解，振摇45min，放冷至室温，加水稀释到刻度，摇匀，在317nm波长处测定吸收度。另量取替硝唑对照品适量，加水溶解，并稀释成12g/L的溶液，同法测定吸收度，计算即得。
1.2.2 回收率实验
采用加样回收法。精密称取已测定含量样品，置于量瓶中，再按1:1的比例向样品中加入一定量替硝唑对照品，依含量测定法测定，用实验值与样品中总替硝唑含量之差除以加入替硝唑对照品量，计算回收率和变异系数。
1.2.3 体外释放度实验
取两次用量的药条，放于10ml具塞试管中，用2ml移液管加入2ml蒸馏水溶出介质，放入37℃的恒温水浴箱中溶出，分别于不同时间用1ml称液管从试管中吸取1ml释放液于100ml容量瓶内，同时沿装有样品条的试管壁补加1ml37 ℃的蒸馏水恒温放置。吸出的释放液用蒸馏水稀释到刻度，用含量测定法进行测定，计算累计溶出百分率。
, 百拇医药
1.3 体内释放实验
临床选择尖周炎单根管牙40个，常规开髓，去除大部分根髓后，置入替硝唑缓释药条1根，丁香油氧化锌糊剂暂封。随机分为封药3、4、5、6、7d组，每组8个牙。复诊时取出，依含量测定法测定取出的缓释药条内剩余替硝唑量，从而间接反映药物在体内髓腔的释放情况。
2 结果 (表1～3)
表1 药条回收率测定结果(n=5)
样品号
样品替硝唑量
(mg)
加入替硝唑量
(mg)
, http://www.100md.com
实测值
(mg)
回收率
(%)
1
22.74
22.88
45.83
100.91
2
23.63
23.80
48.02
, 百拇医药
102.47
3
22.81
22.42
45.92
103.07
4
24.83
24.90
50.09
101.45
5
24.91
, http://www.100md.com
24.82
49.80
100.28
平均回收率：101.64%，标准差：1.287，变异系数：1.27
结果显示：处方中辅料不干扰替硝唑的测定。表2 不同时相点体外释放累计百分率
取样时间
(h)
吸收度
释放量
(mg)
校正释放量
, http://www.100md.com (mg)
累计释放百分率
(%)
1
0.391
2.05
2.05
29.3
6
0.806
4.23
5.26
75.1
, http://www.100md.com
24
0.713
3.74
6.88
98.3
48
0.365
1.91
6.90
98.6
72
0.175
0.92
, 百拇医药
6.92
98.9
表3 体内髓腔替硝唑累计释放百分率
封药时间(d)
剩余药量(mg)
剩余百分率(%)
累计释放百分率(%)
3
1.330±0.023
53.2
46.8
4
, http://www.100md.com
1.315±0.009
52.6
47.6
5
0.890±0.017
35.6
64.4
6
0.360±0.034
14.4
85.6
7
0.340±0.021
, http://www.100md.com
13.6
86.4
3 讨论 作为常用的膜材料，PVA的抗拉强度、柔韧性、吸湿性和水溶性均最好，且对皮肤和粘膜无刺激性[3]，PVA溶液浇注模具中，经冷冻再解冻后可形成表面光滑、韧性好，能与模具紧密结合的模块，且40℃以下加热不液化。本实验制备的替硝唑缓释药条具有优良的成型性、脱膜性，释放性能良好，且具有一定的韧性，易于插入根管，适合感染根 管的局部使用。
牙齿的根管由于牙本质的包绕，根管缓释药条置于根管后，其药物的溶出和扩散有赖于牙本质小管和根尖孔与根尖组织液及根尖炎症产生的渗出液的沟通。PVA的水溶性很大程度上与其分子量相关，分子量越小水溶性越好，且PVA在温水中溶解度较大[3]。虽然炎症时髓腔内的温度有利于PVA的溶解，但因水分较少，药膜不能充分地吸水而溶解，故PVA药膜在髓腔内形成一个内稠外稀的凝胶体，其表面药物释放迅速，而内部的药物释放缓慢。体外释放度实验表明，药膜可持续释放72h，缓释效果十分明显。
, 百拇医药
药物释放度是评价缓释制剂性能的重要指标之一，体外实验方法简单易行，重复性好，但牙体是一特殊环境，体外释放实验不能很真实地反应体内髓腔释药情况，因此作者同时设计了体内实验[4]，临床选择病例均为尖周炎的单根牙(治疗效果另文报道)。本文仅从取出药条剩余药量的测定采用逆推法来间接获得其体内释放量[4]，更真实地反应替硝唑缓释药条体内药物释放情况。
柏干荣[5]等在对替硝唑的药理研究中认为：单剂量口服2g，服药后2h平均血药浓度为51mg/L，24、48h与72h分别为19.0、4.2、1.3mg/L，而后每天给药1g，给药3d，总剂量为4g。我们研制的缓释药条，每条仅含替硝唑2.5mg，用药量仅为全身用药的1/1600。由于局部用药较全身用药具有更长的持续时间，更稳定的有效浓度，且毒副作用极低等优点，有望成为尖周炎的主要治疗途径，关于制剂的缓释性能还有待于更深入的研究和探讨。
沈素勤(昆明制药股份有限公司 云南 昆明 650021)
, 百拇医药
丁江生(省红会医院 云南 昆明 650021)
林一南(昆明制药股份有限公司 云南 昆明 650021)
参考文献：
[1]Book F,Frazier EH,Thomposon DH,et al.Aerobic and anaerobic micro biolog of perioapical abscess[J].Oral Micro Immuno,1991,6:123
[2]沈素勤.替硝唑用于乳牙急性根尖周炎应急治疗的研究[J].昆明医学院学报，1997，18(2B)：16
[3]奚念朱,主编.药剂学[M].第三版.北京：人民卫生出版社，1994.396
[4]汪竹平，王铎，高静,等.测量甲硝唑根管控释系统药物释放度方法的评价[J].华西口腔医学杂志，1999，17(2)：119
[5]柏干荣,胡友梅.替硝唑的药理与临床应用进展[J].中国药房，1998，9(1)：42, http://www.100md.com