不育男性精浆转铁蛋白含量与精子顶体形态的关系
不育男性精浆转铁蛋白含量与精子顶体形态的关系
郑晓群 吕杰强 何有华 温怀凯
摘 要 目的:探讨不育男性精浆转铁蛋白(Tf)含量与精子顶体完整性的关系。方法:149例不育男性患者按精子密度≥20×106/ml和<20×106/ml分正常精子密度组和少精子组，同时进行精浆Tf和精子顶体完整率(PIA)分析。结果:不育男性少精子组精浆Tf含量显著低于正常精子密度组(P<0.01)；正常精子密度的不育男性精子PIA<80%组精浆Tf含量显著低于精子PIA≥80%组(P<0.01)。结论:正常精子密度的不育男性精子PIA下降与精浆Tf水平有密切的关系。
关键词：不育，男性；转铁蛋白；顶体
睾丸支持细胞能分泌多种物质参与生精过程，如转铁蛋白(transferrin ,Tf),它是衡量睾丸功能的参数[1]。支持细胞合成、分泌并利用Tf将血中的铁转移到生殖细胞，促进其发育与成熟。已有报道不育男性精浆Tf含量与精子密度成正相关[2～4]，但精浆Tf含量与精子顶体形态的关系尚未见报道。作者着重测定了149例不育男性精浆中Tf含量及精子顶体完整率(Percentage integrity acrosin, PIA)，以探讨它们之间的关系。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 研究对象 149例不育男性系本院不育门诊病人，年龄23～40岁，性生活正常，未采取任何避孕措施，婚后二年以上未孕(排除女方不育原因)；无精子症，精液液化不全，生殖系统感染及精索静脉曲张的不育患者不在本研究之列。受试者禁欲3～7天，手淫法采集一次射精全部精液，置37℃水浴保温，待完全液化后，分为二份，一份作精液常规和精子PIA分析，另一份精液于2000r/min离心10min，分离精浆保存在-40℃备用。
1.2 研究对象分组 精子密度分组依据WHO(第三版)的标准，正常精子密度组82例，精子密度≥20×106/ml；少精子组67例，精子密度<20×106/ml。
在精子密度分组基础上按精子PIA分为四组：A组48例，精子密度≥20×106/ml，精子PIA≥80%；B组34例，精子密度≥20×106/ml，精子PIA<80%；C组37例，精子密度<20×106/ml，精子PIA≥80%；D组30例，精子密度<20×106/ml，精子PIA<80%。
, 百拇医药
1.3 检测方法 精子PIA测定按文献[5]操作。精浆Tf含量采用美国贝克曼Array360特定蛋白分析仪测定，Tf参考标准及Tf抗血清均购自美国贝克曼公司。操作如下：取精浆50μl加20mmol/L PBS 450μl混匀(1：9稀释)作为分析样品，选用尿液Tf测定应用程序进行检测，测定结果×10(mg/L)即精浆Tf含量。
1.4 统计学处理 数据以X±s表示，组间比较采用两样本间t检验。
2 结果
2.1 149例不育男性正常精子密度组和少精子组精浆Tf含量见表1。
表1 不育男性正常密度组与少精子组精浆Tf含量(X±s)
组别
例数
, 百拇医药
精浆Tf(mg/L)
正常密度组
82
107.3±42.3
少精子组
67
68.6±29.8**
与正常密度组比较：** P<0.01。
2.2 不育男性精子PIA与精浆Tf含量的关系见表2。表2 不育男性精子PIA与精浆Tf含量关系(X±s)
组别
例数
, 百拇医药
精子密度(×106/ml)
精子PIA(%)
精浆Tf(mg/L)
A
48
≥20
≥80
121.7±40.2
B
34
≥20
<80
, 百拇医药 80.3±30.5**
C
37
<20
≥80
75.2±28.4
D
30
<20
<80
64.9±24.7
与A组比较：** P<0.01。
, 百拇医药 表2结果表明，正常精子密度的不育男性，精子PIA<80%组(B组)精浆Tf含量显著低于精子PIA≥80%组(A组)(P<0.01)；少精子组精子PIA≥80%与<80%两组(C与D组)精浆Tf含量无统计学差异(P>0.05)。
3 讨论
Tf是一种糖蛋白，每一个Tf分子都有两个能与Fe3+高亲合的部位。精浆中80%的Tf是由睾丸支持细胞分泌，支持细胞利用Tf与血中铁结合，通过支持细胞膜上Tf受体，形成Tf-Tf受体复合物，以铁蛋白形式将铁贮存于支持细胞内，支持细胞以顶端分泌的形式将铁传送至生殖细胞，特别是粗线期精母细胞及早期圆精子细胞，促进生殖细胞的发育与成熟，以维持生精过程[1]。因此，精浆Tf含量对精子的生成和发育有影响作用。国内、外报道认为精浆Tf含量与精子密度成正相关，精浆Tf水平的减低可能提示支持细胞功能异常或曲线精管生精功能异常[2～4]，我们的研究结果也支持这一观点。
, 百拇医药
精子顶体在生育方面起着重要作用，顶体内富含蛋白水解酶类(顶体酶)，在精子进入卵子透明带过程中，顶体酶起主要作用[5]。顶体不完整的精子顶体酶就会漏出，影响精子对卵细胞卵丘的分解及对透明带的穿透。因此， PIA测定可作为了解精子顶体完整性及生育力的一种可靠指标[6]。本实验结果表明，正常精子密度的不育男性精子PIA<80%组较精子PIA≥80%组精浆Tf含量低，这说明Tf在精浆中的含量与精子PIA有关，至于精浆Tf水平的减低是否会引起精子顶体完整性及顶体反应的下降，有待于进一步证实。少精子组不育男性精子PIA与精浆Tf含量无关，这可能是精子顶体在附睾内成熟，精子顶体的完整性也受附睾等功能的影响，同时又说明男性不育原因的复杂性，尚待我们做深入的研究。
综上所述，我们认为不育男性精浆Tf含量与精子密度有关，正常精子密度的不育男性精子PIA与精浆Tf水平有密切的关系。精浆Tf含量不仅可作为支持细胞或曲线精管的功能指标，也可作为评价男性生育力的一种有用指标，在男性不育的诊断中有一定的意义。
, 百拇医药
作者简介：郑晓群(1973-),男，浙江温州人，检验师。
郑晓群(温州医学院附属第二医院 检验科，浙江 温州 325027)
吕杰强(妇产科)
何有华(泌尿科)
温怀凯(温州医学院附属第二医院 检验科，浙江 温州 325027)
参考文献
[1] 王蔚东.转铁蛋白在睾丸中的分泌及其调节[J]. 国外医学计划生育分册，1996,15(2):98-101.
[2] 缪钟端，高榜华，叶英，等.生育与不育男性精浆的转铁蛋白[J].男性学杂志，1993，(3):140-142.
, 百拇医药
[3] Zalata A, Hafez T, Schoonjans F, et al. The possible meaning of transferrin and its soluble receptors in seminal plasma as markers of the seminiferous epithelium[J].Hum Reprod. 1996 ,11(4):761-764.
[4] Irisama C, Nakada T, Kubota Y, et al. Transferrin concentration in seminal plasma with special reference to serum hormone levels in infertile men[J].Arch Androl， 1993,30:13-21.
[5] 黄宇烽，许瑞吉. 男科诊断学[M].上海：第二军医大学出版社，1999.10.
[6] 苏昀，周性明，陈甸英苏,等.人精子顶体完整率的测定及其临床意义[J].江苏医药，1999,25(2)：103-104., http://www.100md.com
郑晓群 吕杰强 何有华 温怀凯
摘 要 目的:探讨不育男性精浆转铁蛋白(Tf)含量与精子顶体完整性的关系。方法:149例不育男性患者按精子密度≥20×106/ml和<20×106/ml分正常精子密度组和少精子组，同时进行精浆Tf和精子顶体完整率(PIA)分析。结果:不育男性少精子组精浆Tf含量显著低于正常精子密度组(P<0.01)；正常精子密度的不育男性精子PIA<80%组精浆Tf含量显著低于精子PIA≥80%组(P<0.01)。结论:正常精子密度的不育男性精子PIA下降与精浆Tf水平有密切的关系。
关键词：不育，男性；转铁蛋白；顶体
睾丸支持细胞能分泌多种物质参与生精过程，如转铁蛋白(transferrin ,Tf),它是衡量睾丸功能的参数[1]。支持细胞合成、分泌并利用Tf将血中的铁转移到生殖细胞，促进其发育与成熟。已有报道不育男性精浆Tf含量与精子密度成正相关[2～4]，但精浆Tf含量与精子顶体形态的关系尚未见报道。作者着重测定了149例不育男性精浆中Tf含量及精子顶体完整率(Percentage integrity acrosin, PIA)，以探讨它们之间的关系。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 研究对象 149例不育男性系本院不育门诊病人，年龄23～40岁，性生活正常，未采取任何避孕措施，婚后二年以上未孕(排除女方不育原因)；无精子症，精液液化不全，生殖系统感染及精索静脉曲张的不育患者不在本研究之列。受试者禁欲3～7天，手淫法采集一次射精全部精液，置37℃水浴保温，待完全液化后，分为二份，一份作精液常规和精子PIA分析，另一份精液于2000r/min离心10min，分离精浆保存在-40℃备用。
1.2 研究对象分组 精子密度分组依据WHO(第三版)的标准，正常精子密度组82例，精子密度≥20×106/ml；少精子组67例，精子密度<20×106/ml。
在精子密度分组基础上按精子PIA分为四组：A组48例，精子密度≥20×106/ml，精子PIA≥80%；B组34例，精子密度≥20×106/ml，精子PIA<80%；C组37例，精子密度<20×106/ml，精子PIA≥80%；D组30例，精子密度<20×106/ml，精子PIA<80%。
, 百拇医药
1.3 检测方法 精子PIA测定按文献[5]操作。精浆Tf含量采用美国贝克曼Array360特定蛋白分析仪测定，Tf参考标准及Tf抗血清均购自美国贝克曼公司。操作如下：取精浆50μl加20mmol/L PBS 450μl混匀(1：9稀释)作为分析样品，选用尿液Tf测定应用程序进行检测，测定结果×10(mg/L)即精浆Tf含量。
1.4 统计学处理 数据以X±s表示，组间比较采用两样本间t检验。
2 结果
2.1 149例不育男性正常精子密度组和少精子组精浆Tf含量见表1。
表1 不育男性正常密度组与少精子组精浆Tf含量(X±s)
组别
例数
, 百拇医药
精浆Tf(mg/L)
正常密度组
82
107.3±42.3
少精子组
67
68.6±29.8**
与正常密度组比较：** P<0.01。
2.2 不育男性精子PIA与精浆Tf含量的关系见表2。表2 不育男性精子PIA与精浆Tf含量关系(X±s)
组别
例数
, 百拇医药
精子密度(×106/ml)
精子PIA(%)
精浆Tf(mg/L)
A
48
≥20
≥80
121.7±40.2
B
34
≥20
<80
, 百拇医药 80.3±30.5**
C
37
<20
≥80
75.2±28.4
D
30
<20
<80
64.9±24.7
与A组比较：** P<0.01。
, 百拇医药 表2结果表明，正常精子密度的不育男性，精子PIA<80%组(B组)精浆Tf含量显著低于精子PIA≥80%组(A组)(P<0.01)；少精子组精子PIA≥80%与<80%两组(C与D组)精浆Tf含量无统计学差异(P>0.05)。
3 讨论
Tf是一种糖蛋白，每一个Tf分子都有两个能与Fe3+高亲合的部位。精浆中80%的Tf是由睾丸支持细胞分泌，支持细胞利用Tf与血中铁结合，通过支持细胞膜上Tf受体，形成Tf-Tf受体复合物，以铁蛋白形式将铁贮存于支持细胞内，支持细胞以顶端分泌的形式将铁传送至生殖细胞，特别是粗线期精母细胞及早期圆精子细胞，促进生殖细胞的发育与成熟，以维持生精过程[1]。因此，精浆Tf含量对精子的生成和发育有影响作用。国内、外报道认为精浆Tf含量与精子密度成正相关，精浆Tf水平的减低可能提示支持细胞功能异常或曲线精管生精功能异常[2～4]，我们的研究结果也支持这一观点。
, 百拇医药
精子顶体在生育方面起着重要作用，顶体内富含蛋白水解酶类(顶体酶)，在精子进入卵子透明带过程中，顶体酶起主要作用[5]。顶体不完整的精子顶体酶就会漏出，影响精子对卵细胞卵丘的分解及对透明带的穿透。因此， PIA测定可作为了解精子顶体完整性及生育力的一种可靠指标[6]。本实验结果表明，正常精子密度的不育男性精子PIA<80%组较精子PIA≥80%组精浆Tf含量低，这说明Tf在精浆中的含量与精子PIA有关，至于精浆Tf水平的减低是否会引起精子顶体完整性及顶体反应的下降，有待于进一步证实。少精子组不育男性精子PIA与精浆Tf含量无关，这可能是精子顶体在附睾内成熟，精子顶体的完整性也受附睾等功能的影响，同时又说明男性不育原因的复杂性，尚待我们做深入的研究。
综上所述，我们认为不育男性精浆Tf含量与精子密度有关，正常精子密度的不育男性精子PIA与精浆Tf水平有密切的关系。精浆Tf含量不仅可作为支持细胞或曲线精管的功能指标，也可作为评价男性生育力的一种有用指标，在男性不育的诊断中有一定的意义。
, 百拇医药
作者简介：郑晓群(1973-),男，浙江温州人，检验师。
郑晓群(温州医学院附属第二医院 检验科，浙江 温州 325027)
吕杰强(妇产科)
何有华(泌尿科)
温怀凯(温州医学院附属第二医院 检验科，浙江 温州 325027)
参考文献
[1] 王蔚东.转铁蛋白在睾丸中的分泌及其调节[J]. 国外医学计划生育分册，1996,15(2):98-101.
[2] 缪钟端，高榜华，叶英，等.生育与不育男性精浆的转铁蛋白[J].男性学杂志，1993，(3):140-142.
, 百拇医药
[3] Zalata A, Hafez T, Schoonjans F, et al. The possible meaning of transferrin and its soluble receptors in seminal plasma as markers of the seminiferous epithelium[J].Hum Reprod. 1996 ,11(4):761-764.
[4] Irisama C, Nakada T, Kubota Y, et al. Transferrin concentration in seminal plasma with special reference to serum hormone levels in infertile men[J].Arch Androl， 1993,30:13-21.
[5] 黄宇烽，许瑞吉. 男科诊断学[M].上海：第二军医大学出版社，1999.10.
[6] 苏昀，周性明，陈甸英苏,等.人精子顶体完整率的测定及其临床意义[J].江苏医药，1999,25(2)：103-104., http://www.100md.com