银杏叶提取物对ADP、胶原引起的人血小板聚集性的影响
【摘要】 目的 观察银杏叶提取物对5-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)、胶原引起的人血小板聚集性的影响。方法 用体外法测定不同浓度的银杏叶提取物对ADP、血管胶原诱导人血小板1min聚集度(PAG 1 )、5min聚集度(PAG 5 )、最大聚集度(MA)和最大聚集度时间(TMA)。结果 银杏叶提取物(2mg/ml)能抑制ADP诱导的人血小板聚集，降低PAG 1 、PAG5 和MA，缩短TMA，与对照组比较差异有显著性(P<0.01、<0.01、<0.01、<0.01)，最大聚集度时间后，有解聚现象。银杏叶提取物(2mg/ml、0.2mg/ml、0.02mg/ml)能不同程度地抑制血管胶原诱导的人血小板聚集，降低PAG 1 、PAG 5 和MA，与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论 银杏叶提取物能抑制ADP和血管胶原诱导的人血小板聚集。
关键词 银杏叶提取物 血小板聚集 5-腺苷二磷酸二钠盐 胶原
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-6424(2003)03-0199-02
, http://www.100md.com
Effect of ginkgo leaf on platelet aggregation
induced by ADP and collagen
Mo Zhaojing，Yu Nina，Li Qinglao.
The First People’s Hospital of Zhaoqing，Guangdong256021.
【Abstract】 Objective To observe the effect of ginkgo leaf extract on the platelet aggregation induced by ADP and collagen.Methods Detecting method in vitro was used to determine the effect of ginkgo leaf extract in different concetrations on ADP and vascular collagen induced PAG1/1min，PAG5/5min，MA-PAG and TMA-PAG.Results Ginkgo leaf extract(2mg/ml)can inhibit the ADP induced platelet aggregation，reduce PAG 1 ，PAG5，MA-PAG and TMA-PAG，copared with the controls，there existed a significant difference(P<0.01).After TMA-PAG，the disaggregationoccurred.Ginkgo leaf extract(2mg/ml，0.2mg/ml，0.02mg/ml)can inhibit the vascular collagen inˉduced platelet aggregations and reduce PAG 1 ，PAG5and MA-PAG，contrast to cotrols，there was a significant differˉence(P<0.01).Conclusion Ginkgo leaf extract could inhibit the platelet aggregation induced by ADP and vascular collagen.
, 百拇医药
Key words ginkgo leaf extract platelet aggregation ADP coollagen
1 实验材料
1.1 人血浆及试剂 人空腹血浆，采自健康自愿者。加入盛有3.28%枸橼酸钠溶液(抗凝剂)的塑料试管中，血浆与抗凝剂的比例为9:1，轻轻混匀，离心(800rPm)5min，吸出上层米黄色悬液即为富血小板血浆(PRP)。然后再离心(3000rPm)8min，吸取上清液，即得贫血小板血浆(PPP)。
1.2 药品和试剂 银杏叶提取物溶液，每毫升含银杏黄酮和银杏内酯8.75mg [1] 。用0.2mol/L磷酸缓冲液稀释2、20和200倍，按下述方法加入比色杯，药物浓度即依次为2、0.2、0.02mg/ml。5-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)[上海伯奥生物科技公司(进口分装)，批号:030208]，用0.2mol/L磷酸缓冲液配成1mg/10ml的ADP溶液。舒血宁注射液，每支5ml，含银杏黄酮醇甙4.2mg、银杏内酯0.3mg，(北京双鹤高科天然药物公司，批号:0211405)。血管胶原的制备:处死家兔，分离胸、腹动脉血管，用蒸馏水冲洗干净，置于匀浆器中，反复研磨，加蒸馏水制成约5%的血管匀浆，3000rPm离心10min，吸取上清液，备用。
, 百拇医药
1.3 主要设备 TYXN-96多功能智能血液凝集仪(上海海特医学设备有限公司制造)。
2 试验方法
取2只比色杯，分别加入贫血小板血浆(PPP)和富血小板血浆(PRP)各200ml，置聚集仪中37℃预热5min，用PPP杯校“0”，测定PRP中的血小板数，然后用PPP稀释PRP，调整血小板数至30～40万/mm 3 。试验时，取2只比色杯，分别加入PPP、调整好血小板数的PRP各200μl，在2只比色杯中同时加入供试药液10μl，在PRP杯中放搅拌小棒1只。置预热孔内预热5min，用PPP杯调聚集仪“0”点后，将PPP杯放入聚集仪测定孔中，加入1mg/10ml的ADP磷酸缓冲液溶液或5%的血管匀浆10μl，记录5min的聚集曲线。以1min(PAG 1 )、5min聚集度(PAG 5 )、最大聚集度(MA)和最大聚集度时间(TMA)为指标，分别测定不同浓度的银杏叶提取物对ADP、血管胶原诱导人血小板聚集性的影响。药物浓度(mg/ml)以在测量杯中的浓度表示。对照组以磷酸缓冲液代替药液。
, 百拇医药
3 结果
试验所得数据用t值法进行显著性检验，比较各药物组与对照组的差异，结果见表1、表2。
表1 对ADP诱导人血小板聚集性的影响(略)
结果表明，银杏叶提取物(2mg/ml)能抑制ADP诱导的人血小板聚集，明显降低PAG 1 、PAG 5 和MA，TMA明显缩 短，与对照组比较差异有显著性(P<0.01、<0.01、<0.01、<0.01)，最大聚集密度时间后，还有解聚现象。
表2 对胶原诱导人血小板聚集性的影响(略)
结果表明，银杏叶提取物(2mg/ml、0.2mg/ml、0.02mg/ml)能抑制血管胶原诱导的人血小板聚集，降低PAG 1 、PAG 5 和MA，与对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。
, 百拇医药
3 讨论
本研究所用银杏叶提取物是从银杏(Glikgobiloba L)叶中提取分离制得。据报道，银杏叶及其提取物如黄酮类和萜内酯类化合物具有扩张心脑血管 [2，3] 、抗心肌缺血 [4] 和抑制血栓形成等 [5，6] 药理作用。本实验证明，银杏叶提取物能不同程度地抑制ADP和血管胶原诱导的人血小板聚集，其抗血小板聚集作用与拮抗血小板活化因子(PAF)有关 [7] 。上述作用是银杏叶及其制剂临床治疗冠心病、脑卒中的中药药理学基础。
参考文献
1 陈奇.中药药理研究方法，北京:人民卫生出版社，1993，581.
2 谢人明.银杏叶注射液对动物脑循环作用的研究.中草药，1986，1(8):23.
, 百拇医药
3 耿秀芳.银杏叶黄酮扩血管机理的探讨.中医药研究，1996，2(1):55.
4 龙建军.银杏叶提取物对心肌缺血再灌注微循环的保护作用.微循环技术杂志，1996，2(3):121.
5 潘苏华.异银杏双黄酮抑制血栓形成作用的研究.江西医药，1990，3(2):75.
6 潘苏华.异银杏双黄酮对兔血小板聚集和纤维蛋白原含量的影响.安徽中医学院学报，1994，1(4):59.
7 沈映君.中药药理学，北京:人民卫生出版社，2000，1040.
(收稿日期:2003-06-16) (编辑 李欣), 百拇医药(莫肇江)
关键词 银杏叶提取物 血小板聚集 5-腺苷二磷酸二钠盐 胶原
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-6424(2003)03-0199-02
, http://www.100md.com
Effect of ginkgo leaf on platelet aggregation
induced by ADP and collagen
Mo Zhaojing，Yu Nina，Li Qinglao.
The First People’s Hospital of Zhaoqing，Guangdong256021.
【Abstract】 Objective To observe the effect of ginkgo leaf extract on the platelet aggregation induced by ADP and collagen.Methods Detecting method in vitro was used to determine the effect of ginkgo leaf extract in different concetrations on ADP and vascular collagen induced PAG1/1min，PAG5/5min，MA-PAG and TMA-PAG.Results Ginkgo leaf extract(2mg/ml)can inhibit the ADP induced platelet aggregation，reduce PAG 1 ，PAG5，MA-PAG and TMA-PAG，copared with the controls，there existed a significant difference(P<0.01).After TMA-PAG，the disaggregationoccurred.Ginkgo leaf extract(2mg/ml，0.2mg/ml，0.02mg/ml)can inhibit the vascular collagen inˉduced platelet aggregations and reduce PAG 1 ，PAG5and MA-PAG，contrast to cotrols，there was a significant differˉence(P<0.01).Conclusion Ginkgo leaf extract could inhibit the platelet aggregation induced by ADP and vascular collagen.
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Key words ginkgo leaf extract platelet aggregation ADP coollagen
1 实验材料
1.1 人血浆及试剂 人空腹血浆，采自健康自愿者。加入盛有3.28%枸橼酸钠溶液(抗凝剂)的塑料试管中，血浆与抗凝剂的比例为9:1，轻轻混匀，离心(800rPm)5min，吸出上层米黄色悬液即为富血小板血浆(PRP)。然后再离心(3000rPm)8min，吸取上清液，即得贫血小板血浆(PPP)。
1.2 药品和试剂 银杏叶提取物溶液，每毫升含银杏黄酮和银杏内酯8.75mg [1] 。用0.2mol/L磷酸缓冲液稀释2、20和200倍，按下述方法加入比色杯，药物浓度即依次为2、0.2、0.02mg/ml。5-腺苷二磷酸二钠盐(ADP)[上海伯奥生物科技公司(进口分装)，批号:030208]，用0.2mol/L磷酸缓冲液配成1mg/10ml的ADP溶液。舒血宁注射液，每支5ml，含银杏黄酮醇甙4.2mg、银杏内酯0.3mg，(北京双鹤高科天然药物公司，批号:0211405)。血管胶原的制备:处死家兔，分离胸、腹动脉血管，用蒸馏水冲洗干净，置于匀浆器中，反复研磨，加蒸馏水制成约5%的血管匀浆，3000rPm离心10min，吸取上清液，备用。
, 百拇医药
1.3 主要设备 TYXN-96多功能智能血液凝集仪(上海海特医学设备有限公司制造)。
2 试验方法
取2只比色杯，分别加入贫血小板血浆(PPP)和富血小板血浆(PRP)各200ml，置聚集仪中37℃预热5min，用PPP杯校“0”，测定PRP中的血小板数，然后用PPP稀释PRP，调整血小板数至30～40万/mm 3 。试验时，取2只比色杯，分别加入PPP、调整好血小板数的PRP各200μl，在2只比色杯中同时加入供试药液10μl，在PRP杯中放搅拌小棒1只。置预热孔内预热5min，用PPP杯调聚集仪“0”点后，将PPP杯放入聚集仪测定孔中，加入1mg/10ml的ADP磷酸缓冲液溶液或5%的血管匀浆10μl，记录5min的聚集曲线。以1min(PAG 1 )、5min聚集度(PAG 5 )、最大聚集度(MA)和最大聚集度时间(TMA)为指标，分别测定不同浓度的银杏叶提取物对ADP、血管胶原诱导人血小板聚集性的影响。药物浓度(mg/ml)以在测量杯中的浓度表示。对照组以磷酸缓冲液代替药液。
, 百拇医药
3 结果
试验所得数据用t值法进行显著性检验，比较各药物组与对照组的差异，结果见表1、表2。
表1 对ADP诱导人血小板聚集性的影响(略)
结果表明，银杏叶提取物(2mg/ml)能抑制ADP诱导的人血小板聚集，明显降低PAG 1 、PAG 5 和MA，TMA明显缩 短，与对照组比较差异有显著性(P<0.01、<0.01、<0.01、<0.01)，最大聚集密度时间后，还有解聚现象。
表2 对胶原诱导人血小板聚集性的影响(略)
结果表明，银杏叶提取物(2mg/ml、0.2mg/ml、0.02mg/ml)能抑制血管胶原诱导的人血小板聚集，降低PAG 1 、PAG 5 和MA，与对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。
, 百拇医药
3 讨论
本研究所用银杏叶提取物是从银杏(Glikgobiloba L)叶中提取分离制得。据报道，银杏叶及其提取物如黄酮类和萜内酯类化合物具有扩张心脑血管 [2，3] 、抗心肌缺血 [4] 和抑制血栓形成等 [5，6] 药理作用。本实验证明，银杏叶提取物能不同程度地抑制ADP和血管胶原诱导的人血小板聚集，其抗血小板聚集作用与拮抗血小板活化因子(PAF)有关 [7] 。上述作用是银杏叶及其制剂临床治疗冠心病、脑卒中的中药药理学基础。
参考文献
1 陈奇.中药药理研究方法，北京:人民卫生出版社，1993，581.
2 谢人明.银杏叶注射液对动物脑循环作用的研究.中草药，1986，1(8):23.
, 百拇医药
3 耿秀芳.银杏叶黄酮扩血管机理的探讨.中医药研究，1996，2(1):55.
4 龙建军.银杏叶提取物对心肌缺血再灌注微循环的保护作用.微循环技术杂志，1996，2(3):121.
5 潘苏华.异银杏双黄酮抑制血栓形成作用的研究.江西医药，1990，3(2):75.
6 潘苏华.异银杏双黄酮对兔血小板聚集和纤维蛋白原含量的影响.安徽中医学院学报，1994，1(4):59.
7 沈映君.中药药理学，北京:人民卫生出版社，2000，1040.
(收稿日期:2003-06-16) (编辑 李欣), 百拇医药(莫肇江)