中药腹腔灌注治疗大鼠重症胰腺炎的实验研究
项目负责人:王宇,北京友谊医院普外科主任、教授、主任医师.中华外科杂志编委，中华实验外科杂志编委.[北京宣武区永安路95号(100050)，电话：01-3014411-720(O)-909(H)，传真：3023261].
摘要
目的：中药腹腔灌洗治疗急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)， 克服口服中药患者因恶心、呕吐、胃肠道麻痹性扩张影响中药的作用效果，使中药更能广泛应用于临床。
方法：采用中药水提酒精沉淀消毒后腹腔灌洗。
结果：中药腹腔灌洗组的疗效显著优于中药口服组和非中药组，并且对腹膜无刺激作用。
, 百拇医药
结论：中药腹腔灌洗 依赖腹膜广泛的吸收功能及对胰腺等组织的直接作用，使中药治疗AHNP作用得到充分发挥，为中药在救治急诊危重患者开辟了新的给药途径。
主题词 冲洗法 腹腔 胰腺炎 中药
王宇, 许元弟, 薛建国, 袁振铎, 王正明, 黄向红, 刘卫, 张彤.中药腹腔灌注治疗大鼠重症胰腺炎的实验研究.新消化病学杂志,1994;2(1):16-18
AIMAbdominal irrigation with herbs in treatmet of the acute hemorrhagic necroticpancreatitis (AHNP) in rats was studied.
METHODS Combined water extract and alcohol precipitation, herbs wasadministrated after sterilization.
, 百拇医药
RESULTS The effect of abdominal irrigation was superior to oral administrationin treatment of the AHNP.
CONCLUSIONS Abdominal irrigation with herbs is a new and useful method in treatment of the AHNP.
KEYWORDS irrigation, abdominal pancreatitis Herb
Wang Y, Xu YD, Xue JG, Yuan ZD, Wang ZM, Huang XH, Liu W, Zhang T. Experimentalstudy on abdominal irrigation with herbs in treatment of the acutehemorrhagic necrotic pancreatitis in rats. Xin XiaohuabingxueZazhi,1994;2(1):16-18
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AHNP是一种凶险的急腹症。发病急、进展快、病情重，且常并发多器官衰竭。目前死亡率仍停留在20%～50%的高水平上。1958年以来国内应用中西医结合疗法治疗本病，均为口服法给药，而AHNP时不但胃肠道麻痹性扩张，且常因恶心、呕吐严重影响中药作用的充分发挥，也使其广泛应用受到了很大地限制。为进一步探讨中药治疗AHNP的新途径及作用机制，本文就腹腔中药灌注治疗AHNP大鼠的胰腺组织病理生理演变过程及生存情况的影响进行实验观察，并结合国内外有关文献进行分析讨论如下：
1 材料和方法
1.1 Wistar大鼠210只，雄雌各半，300g/kg～350g/kg (首都医学院动物室提供)。随机分6组，每组35只，实验前不禁饮食。
1.2 中药方剂及制备 中药方剂：丹参20g，红花10g，木香10g，元胡10g，大青叶20g，枝子10g，厚朴10g，鱼腥草10g,大黄10g，枳壳10g，二芍各15g。中药制备：用蒸馏水将中药洗净，浸泡30min后加蒸馏水煎煮3次，合并药液，浓缩至200mL，冷却后加入2倍量95%酒精混匀，冷藏24h，滤纸过滤，回收或挥发酒精至无味，再次滤纸过滤至药液澄清，加入注射用水至200mL，115高温消毒备用。
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1.3 模型制备 麻醉：戊巴比妥纳40mg/kg腹腔注射。模型建立：平卧固定，取上腹正中切口，将胃提出腹外翻转，使胰腺充分暴露，用加工412号针头平面朝上于胰尾被膜下穿刺，依次向胰管开口方向推进，缓慢推注5%牛黄胆酸纳1.0mL，使整个胰腺均匀隆起，退出针头，灭滴灵冲洗腹腔，关腹。术后经颈静脉插管，输液泵恒速输液24h拔管。分组：A组：腹腔引流+中药腹腔灌洗。模型建立后于胃后缘及胆总管右侧各置一根3mm硅胶管引流，关腹12h后间断进行中药灌洗，24h后腹腔灌注中药4mL拔除引流管。B组：腹腔引流+灭滴灵灌洗。同A组置腹腔引流管关腹12h后间断用灭滴灵腹腔灌洗，24h后腹腔灌注灭滴灵4mL拔除引流管。C组：腹腔引流组。同A组置腹腔引流管，24h后拔除引流管。D组：口服中药组。模型建立后，经口插管服用中药3次/d。E组：对照组。F组：模型建立后静点低分子右旋糖苷每12h，5mL/只，共3次。
, 百拇医药 表1 6组动物模型RNase, SOD,腹水淀粉酶测定结果
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正常大鼠: RNase X±SD=21.8u±3.03u; SOD X±SD=60.19ng±8.15ng
1.4 观察项目 血核糖核酸(RNase)。超氧化物歧化酶活性测定(SOD)。 腹水淀粉酶测定(酶法)。大体解剖观察，光镜检查。
1.5 标本采集 6组AHNP动物模型分别于胰腺被膜下注射5%牛黄胆酸纳后12h，2h，6h，24h，48h，10d取动物血及腹水标本进行上述诸项指标检验，并处死进行大体解剖观察及光镜检查。
2 结果
2.1 血RNase, SOD、腹水淀粉酶测定 血RNase随胰腺坏死程度加重而持续升高24h～48h达高峰。SOD降低。腹水淀粉于AHNP制备12h后升高>2100u。测定结果见表1。
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2.2 大体解剖观察 6组动物模型制备后，12h胰腺充血水肿，2h胰腺灶性坏死，24h～48h胰腺成片或全胰坏死。口服中药组及非中药组并出现大网膜肠系膜皂化腹腔内广泛粘连，胃肠道麻痹性扩张，胰性腹水量也明显大于中药腹腔灌洗组。
2.3 光镜检查 6组动物模型制备后，12h胰腺组织轻度出血水肿，2h胰腺灶性坏死，出血水肿加重。24h～48h胰腺组织成片坏死，红细胞外渗及炎性细胞弥漫性浸润。10d中药腹腔灌洗组胰腺呈慢性炎症改变，口服中药组及非中药组胰腺组织被成堆炎性细胞破坏或形成脓肿，见图1～6。
2.4 6组动物模型10d生存情况统计学处理 腹腔中药灌洗组中与非中药组10d生存率经统计学分析有显著差异(P<0.05) 见表2。
表2 6组动物模型10d生存情况
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*非中药动物模型组.
图1 腹腔引流+中药灌洗10d胰腺病理. HE2.5×10
图2 腹腔引流+灭滴灵灌洗组10d胰腺病理. HE 2.5×10
图3 腹腔引流组10d胰腺病理. !HE 2.5×10
图4 口服中药组10d胰腺病理. HE 2.5×10
图5 对照组10d胰腺病理. HE 2.5×10
, 百拇医药
图6 低分子右旋糖苷组10d胰腺病理. HE2.5×10
3 讨论
参照国内外有关资料的基础上，我们设计了在胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸酸钠制作AHNP动物模型的方法。经20例预实验证实胰腺出血坏死呈进展性24*!h内动物胰腺均可发生多片状或全胰坏死及大网膜、肠系膜皂化。AHNP的血液流变学研究认为：AHNP时全身血容量下降，血液粘滞性升高，血液流动性下降，导致胰腺微循环血液的重新分布，胰腺的血供障碍，组织细胞缺血缺氧，细胞内原有的氧自由基(O-2)清除剂超氧化歧化酶(SOD)被耗竭，又无底物合成，致O-2升高，进一步加重胰腺坏死，早期应用改善微循环药物的治疗，可阻断AHNP的恶性循环，不少学者试采用血管活性药物，疏通胰腺微循环血液瘀滞，增加胰腺组织血流灌注，明显改善胰腺的炎症程度，减轻胰腺超微结构破坏，在治疗AHNP中发挥重要作用。但试验中我们发现低分子右旋糖苷在治疗AHNP过程中，其抗凝作用，使大鼠早期因大量胰性腹水而死亡，10d死亡率占80%。中医将血液流动性改变(内结，离经之血)及出血(内溢)定义为瘀血。认为，凡血行郁滞或瘀阻时，可致气血流通障碍，脉络不通，经脉失养，则造成内脏疼痛及症积。根据中医“气分不效，宜治血络”“血瘀通之”“通则不痛”气血理论。我们利用活血化瘀，通腹泻下法，采用腹腔引流加丹红大黄汤腹腔灌洗。对照6组动物模型大体解剖观察及光镜检查结果，中药腹腔灌洗组胰腺病理演变过程及大鼠生存质量明显优于口服中药组及非中药组。10d存活情况经统计学分析，有明显差异(P<0.05)。证明活血化瘀，通腹泻下中药有助于促进胃肠蠕动解除肠麻痹，减轻或控制胰腺炎症，阻断微循环障碍致胰腺损伤，胰酶对胰腺及血管破坏加重胰腺微循环障碍的恶性循环，胰腺血液循环改善，使渗入间质的消化酶迅速清除，防止胰腺坏死继续发展，促进损伤胰组织的恢复。 本实验结果表明，尽管同一中药，但因给药途径不同，效果欲明显不同。腹腔中药灌洗不仅利于清除腹腔内有毒物质，减少毒素吸收，并经腹膜的广泛吸收，使血内迅速达到药物有效浓度，而且因胰腺组织浸泡在高浓度的中药中，通过直接渗透，充分发挥药物的活血化瘀、解毒抗炎作用。其治疗结果明显优于口服中药及其他治疗组，口服中药效果差，可能是因胃肠道麻痹吸收功能差，甚至恶心、呕吐所致同时实验表明中药入腹腔后，腹腔内渗液减少，无胃肠道麻痹，且未见腹腔粘连，提示此中药对腹膜无刺激作用。, http://www.100md.com(王宇,许元弟,薛建国,袁振铎,王正明,黄向红,刘卫,张彤)
摘要
目的：中药腹腔灌洗治疗急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)， 克服口服中药患者因恶心、呕吐、胃肠道麻痹性扩张影响中药的作用效果，使中药更能广泛应用于临床。
方法：采用中药水提酒精沉淀消毒后腹腔灌洗。
结果：中药腹腔灌洗组的疗效显著优于中药口服组和非中药组，并且对腹膜无刺激作用。
, 百拇医药
结论：中药腹腔灌洗 依赖腹膜广泛的吸收功能及对胰腺等组织的直接作用，使中药治疗AHNP作用得到充分发挥，为中药在救治急诊危重患者开辟了新的给药途径。
主题词 冲洗法 腹腔 胰腺炎 中药
王宇, 许元弟, 薛建国, 袁振铎, 王正明, 黄向红, 刘卫, 张彤.中药腹腔灌注治疗大鼠重症胰腺炎的实验研究.新消化病学杂志,1994;2(1):16-18
AIMAbdominal irrigation with herbs in treatmet of the acute hemorrhagic necroticpancreatitis (AHNP) in rats was studied.
METHODS Combined water extract and alcohol precipitation, herbs wasadministrated after sterilization.
, 百拇医药
RESULTS The effect of abdominal irrigation was superior to oral administrationin treatment of the AHNP.
CONCLUSIONS Abdominal irrigation with herbs is a new and useful method in treatment of the AHNP.
KEYWORDS irrigation, abdominal pancreatitis Herb
Wang Y, Xu YD, Xue JG, Yuan ZD, Wang ZM, Huang XH, Liu W, Zhang T. Experimentalstudy on abdominal irrigation with herbs in treatment of the acutehemorrhagic necrotic pancreatitis in rats. Xin XiaohuabingxueZazhi,1994;2(1):16-18
, http://www.100md.com
AHNP是一种凶险的急腹症。发病急、进展快、病情重，且常并发多器官衰竭。目前死亡率仍停留在20%～50%的高水平上。1958年以来国内应用中西医结合疗法治疗本病，均为口服法给药，而AHNP时不但胃肠道麻痹性扩张，且常因恶心、呕吐严重影响中药作用的充分发挥，也使其广泛应用受到了很大地限制。为进一步探讨中药治疗AHNP的新途径及作用机制，本文就腹腔中药灌注治疗AHNP大鼠的胰腺组织病理生理演变过程及生存情况的影响进行实验观察，并结合国内外有关文献进行分析讨论如下：
1 材料和方法
1.1 Wistar大鼠210只，雄雌各半，300g/kg～350g/kg (首都医学院动物室提供)。随机分6组，每组35只，实验前不禁饮食。
1.2 中药方剂及制备 中药方剂：丹参20g，红花10g，木香10g，元胡10g，大青叶20g，枝子10g，厚朴10g，鱼腥草10g,大黄10g，枳壳10g，二芍各15g。中药制备：用蒸馏水将中药洗净，浸泡30min后加蒸馏水煎煮3次，合并药液，浓缩至200mL，冷却后加入2倍量95%酒精混匀，冷藏24h，滤纸过滤，回收或挥发酒精至无味，再次滤纸过滤至药液澄清，加入注射用水至200mL，115高温消毒备用。
, http://www.100md.com
1.3 模型制备 麻醉：戊巴比妥纳40mg/kg腹腔注射。模型建立：平卧固定，取上腹正中切口，将胃提出腹外翻转，使胰腺充分暴露，用加工412号针头平面朝上于胰尾被膜下穿刺，依次向胰管开口方向推进，缓慢推注5%牛黄胆酸纳1.0mL，使整个胰腺均匀隆起，退出针头，灭滴灵冲洗腹腔，关腹。术后经颈静脉插管，输液泵恒速输液24h拔管。分组：A组：腹腔引流+中药腹腔灌洗。模型建立后于胃后缘及胆总管右侧各置一根3mm硅胶管引流，关腹12h后间断进行中药灌洗，24h后腹腔灌注中药4mL拔除引流管。B组：腹腔引流+灭滴灵灌洗。同A组置腹腔引流管关腹12h后间断用灭滴灵腹腔灌洗，24h后腹腔灌注灭滴灵4mL拔除引流管。C组：腹腔引流组。同A组置腹腔引流管，24h后拔除引流管。D组：口服中药组。模型建立后，经口插管服用中药3次/d。E组：对照组。F组：模型建立后静点低分子右旋糖苷每12h，5mL/只，共3次。
, 百拇医药 表1 6组动物模型RNase, SOD,腹水淀粉酶测定结果
| A组 | B组 | C组 | D组 | E组 | F组 | |||||||||||||
| 1/2 24～48h 10d | 1/2 24～48h 10d | 1/2 24～48h 10d | 1/2 24～48h 10d | 1/2 24～48h 10d | 1/2 24～48h 10d | |||||||||||||
| RMase(U)X | 39.1 | 52.1 | 27.2 | 38.8 | 62.0 | 29.23 | 41.4 | 69 | 30.2 | 40.7 | 55 | 28.7 | 47.4 | 63.4 | 29 | 36.3 | 42.2 | 30.9 |
| SOD(ng)X | 60.9 | 48.9 | 58.5 | 62 | 40.6 | 59.3 | 61.5 | 39.5 | 48.4 | 54 | 18.9 | 57 | 54 | 37 | 59.5 | 57.4 | 46.7 | 58.2 |
| 淀粉酶(U) | >2100 | >2100 | >2100 | >2100 | >2100 | >2100 |
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正常大鼠: RNase X±SD=21.8u±3.03u; SOD X±SD=60.19ng±8.15ng
1.4 观察项目 血核糖核酸(RNase)。超氧化物歧化酶活性测定(SOD)。 腹水淀粉酶测定(酶法)。大体解剖观察，光镜检查。
1.5 标本采集 6组AHNP动物模型分别于胰腺被膜下注射5%牛黄胆酸纳后12h，2h，6h，24h，48h，10d取动物血及腹水标本进行上述诸项指标检验，并处死进行大体解剖观察及光镜检查。
2 结果
2.1 血RNase, SOD、腹水淀粉酶测定 血RNase随胰腺坏死程度加重而持续升高24h～48h达高峰。SOD降低。腹水淀粉于AHNP制备12h后升高>2100u。测定结果见表1。
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2.2 大体解剖观察 6组动物模型制备后，12h胰腺充血水肿，2h胰腺灶性坏死，24h～48h胰腺成片或全胰坏死。口服中药组及非中药组并出现大网膜肠系膜皂化腹腔内广泛粘连，胃肠道麻痹性扩张，胰性腹水量也明显大于中药腹腔灌洗组。
2.3 光镜检查 6组动物模型制备后，12h胰腺组织轻度出血水肿，2h胰腺灶性坏死，出血水肿加重。24h～48h胰腺组织成片坏死，红细胞外渗及炎性细胞弥漫性浸润。10d中药腹腔灌洗组胰腺呈慢性炎症改变，口服中药组及非中药组胰腺组织被成堆炎性细胞破坏或形成脓肿，见图1～6。
2.4 6组动物模型10d生存情况统计学处理 腹腔中药灌洗组中与非中药组10d生存率经统计学分析有显著差异(P<0.05) 见表2。
表2 6组动物模型10d生存情况
| A组 | B组* | C组* | D组 | E组* | F组* | 合计 | |
| 生存 | 6 | 1 | 1 | 5 | 1 | 2 | 16 |
| 死亡 | 4 | 9 | 9 | 5 | 9 | 8 | 44 |
| 合计 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 60 |
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*非中药动物模型组.
图1 腹腔引流+中药灌洗10d胰腺病理. HE2.5×10
图2 腹腔引流+灭滴灵灌洗组10d胰腺病理. HE 2.5×10
图3 腹腔引流组10d胰腺病理. !HE 2.5×10
图4 口服中药组10d胰腺病理. HE 2.5×10
图5 对照组10d胰腺病理. HE 2.5×10
, 百拇医药
图6 低分子右旋糖苷组10d胰腺病理. HE2.5×10
3 讨论
参照国内外有关资料的基础上，我们设计了在胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸酸钠制作AHNP动物模型的方法。经20例预实验证实胰腺出血坏死呈进展性24*!h内动物胰腺均可发生多片状或全胰坏死及大网膜、肠系膜皂化。AHNP的血液流变学研究认为：AHNP时全身血容量下降，血液粘滞性升高，血液流动性下降，导致胰腺微循环血液的重新分布，胰腺的血供障碍，组织细胞缺血缺氧，细胞内原有的氧自由基(O-2)清除剂超氧化歧化酶(SOD)被耗竭，又无底物合成，致O-2升高，进一步加重胰腺坏死，早期应用改善微循环药物的治疗，可阻断AHNP的恶性循环，不少学者试采用血管活性药物，疏通胰腺微循环血液瘀滞，增加胰腺组织血流灌注，明显改善胰腺的炎症程度，减轻胰腺超微结构破坏，在治疗AHNP中发挥重要作用。但试验中我们发现低分子右旋糖苷在治疗AHNP过程中，其抗凝作用，使大鼠早期因大量胰性腹水而死亡，10d死亡率占80%。中医将血液流动性改变(内结，离经之血)及出血(内溢)定义为瘀血。认为，凡血行郁滞或瘀阻时，可致气血流通障碍，脉络不通，经脉失养，则造成内脏疼痛及症积。根据中医“气分不效，宜治血络”“血瘀通之”“通则不痛”气血理论。我们利用活血化瘀，通腹泻下法，采用腹腔引流加丹红大黄汤腹腔灌洗。对照6组动物模型大体解剖观察及光镜检查结果，中药腹腔灌洗组胰腺病理演变过程及大鼠生存质量明显优于口服中药组及非中药组。10d存活情况经统计学分析，有明显差异(P<0.05)。证明活血化瘀，通腹泻下中药有助于促进胃肠蠕动解除肠麻痹，减轻或控制胰腺炎症，阻断微循环障碍致胰腺损伤，胰酶对胰腺及血管破坏加重胰腺微循环障碍的恶性循环，胰腺血液循环改善，使渗入间质的消化酶迅速清除，防止胰腺坏死继续发展，促进损伤胰组织的恢复。 本实验结果表明，尽管同一中药，但因给药途径不同，效果欲明显不同。腹腔中药灌洗不仅利于清除腹腔内有毒物质，减少毒素吸收，并经腹膜的广泛吸收，使血内迅速达到药物有效浓度，而且因胰腺组织浸泡在高浓度的中药中，通过直接渗透，充分发挥药物的活血化瘀、解毒抗炎作用。其治疗结果明显优于口服中药及其他治疗组，口服中药效果差，可能是因胃肠道麻痹吸收功能差，甚至恶心、呕吐所致同时实验表明中药入腹腔后，腹腔内渗液减少，无胃肠道麻痹，且未见腹腔粘连，提示此中药对腹膜无刺激作用。, http://www.100md.com(王宇,许元弟,薛建国,袁振铎,王正明,黄向红,刘卫,张彤)