抗结直肠癌单克隆抗体测定胃、肠癌患者血清中癌相关抗原
项目负责人:袁耀宗, 200025, 上海第二医科大学瑞金医院消化科
Measurement of serum carcino_associated antigen by anti_colon cancer monoclonal antibody in patients with gastric and colon cancer
Yao-Zong Yuan, Qin Wang,Jia-Yu Xu, Wen-Da Zhou, Ying-Ying Yu and Wei Luo
Department of Gastroenterology, Ruijin Hospital, Shanghai SecondMedical University, Shanghai 200025 China
, 百拇医药
AbstractAIMS To apply anti-colon monoclonal antibody to diagnosisof gastrointestinal maligant tumors serologically.
METHODS We measured the carcino-associated antigen(CCA) levelby ELISA method in gastric and rectosigmoid cancer, benign gastric diseases and health controls. Serum CEA level was also measured simultaneously in above subjects.
RESULTS The positivity rates of CCA were as follows: 1.5% in normal controls, 52.8% in gastric cancer, 52.9% in rectosigmoid cancer, 10% in benign gastric diseases, 30.0% and 48.2% respectively in CEA negative patients with gastric or rectosigmoid cancer. Serum CEA positivity rates were 24.5% and 20.6% respectively in gastric and rectosigmoid cancer.
, 百拇医药
CONCLUSIONS No cross reaction between CCA and CEA antibodies is found. Detection of serum CCA provide a new clinical index for gastric and rectosigmoid cancer.
Subject headings colorectal neoplasms/diagnosis; stomachneoplasms/diagnosis; antigens, neoplasms/analysis; antibody, monoclonal;serodiagnosis
Yuan YZ, Wang Q, Xu JY, Zhou WD, Yu YY, Luo W. Measurement of serum carcino_associated antigen by anti_colon cancer monoclonal antibody in patients with gastric and colon cancer.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1995；3(1)：3-4
, 百拇医药
摘要目的 应用结直肠癌单克隆抗体对胃肠癌患者进行血清学诊断。
方法 采用ELISA法对胃癌、结直肠癌、胃良性疾病和健康供血者血清中结直肠癌抗原(CCA)进行了测定，同时测定了胃癌、结直肠癌患者血清中CEA含量。
结果 正常人血清CCA阳性仅1.5%。胃癌血清(CCA)阳性率52.8%，CEA阳性率24.5%。CEA阳性病例中CCA阳性率为30.0%。结直肠癌患者CCA阳性率为52.9%，CEA阳性率为20.6%。CEA阴性病例中CCA阳性率为48.2%。胃良性疾病组CCA阳性率为10%。
结论 CCA单抗与CEA无交叉反应，临床上测定CCA可作为CEA的补充，为临床诊断及普查提供了新的诊断指标。
, 百拇医药
主题词 结肠直肠肿瘤/诊断；胃肿瘤/诊断；抗原，肿瘤/分析；抗体，单克隆；血清诊断
袁耀宗, 王琴, 徐家裕, 周文达, 俞莺莺, 罗伟.抗结直肠癌单克隆抗体测定胃、肠癌患者血清中癌相关抗原.
新消化病学杂志，1995；3(1)：3-4
应用肿瘤单克隆抗体对恶性肿瘤患者进行血清学诊断是当今临床重点研究课题之一。但迄今尚未发现对胃癌、结直肠癌具有诊断灵敏度高、特异性好，能进行血清学诊断的单克隆抗体。作者用三株结肠癌细胞株(DUD-1, SW116, COLO205)作为混合免疫原制备产生的一株抗结直肠癌抗原(CCA)单克隆抗体，并用ELISA法对胃癌、结直肠癌、胃良性疾病以及健康供血者血清中CCA进行了测定，同时对胃癌、结直肠癌患者测定了CEA，比较其灵敏度和特异性如下。
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 抗体 以结直肠细胞株DUD-1，SW116和COLO205作为混合免疫原，免疫BALB/C小鼠，与SP2/0骨髓瘤细胞融合，获得分泌抗结直肠癌抗原(CCA)的单克隆抗体。
1.2 血清 来自我院确诊病例以及血库健康献血员。其中胃癌(进展期)53例，结直肠癌(进展期)34例，胃良性疾病40例(慢性浅表性胃炎12例，慢性萎缩性胃炎18例，胃、十二指肠溃疡10例)，正常人200例。
1.3 ELISA法 将单克隆抗体(腹水)稀释至每毫升含IgG5μg，酶标孔中每孔100μl，4加盖过夜。次日加入0.5% BSA封闭液置37加盖1h,洗涤，吸干。每孔加样品100μl，37温育后洗涤3次，吸干。再加入100μl酶标抗体，37温育后洗涤4次，吸干。加入OPD底物(新鲜配制)，按2mg OPD 5ml底物缓冲液，每孔100μl，37温育15min。取出后每孔加入2N H2SO4 25μl，终止反应。用美国Bio-Reu公司产品Model ELISA酶标仪读数。CEA测定的方法同上。
, 百拇医药
2 结果
本方法批内变异系数为5.81%，批间变异系数6.84%。正常人血清中CCA含量很低，OD值为0.0238±0.0692(-0.033～0.615)。以大于0.3为阳性判断标准，结果仅3例(1.5%)。胃癌患者53例中CCA阳性者为28例，阳性率52.8%，OD值为0.3384±0.3546，CEA阳性者为13例，阳性率24.5%。CEA阳性病例中，CCA的检出率为48.2%。结直肠癌34例中，CCA阳性18例，阳性率52.9%。胃良性疾病40例中CCA阳性者4例，阳性率为10%；OD值为0.1177±0.2433。
3 讨论
近年来，用血清学方法诊断消化系统恶性肿瘤日趋增多[1，2]。但迄今尚未发现具有器官特异性的抗原，往往某一器官恶性肿瘤免疫所获得的抗体与多种器官恶性肿瘤起反应，造成临床诊断的困难[3]。胃、结直肠癌是我国最常见的恶性肿瘤，早期诊断仍远未获得显著提高[4]。本研究所用单克隆抗体分子量为30000左右的IgG，经免疫印渍法证实与CEA无交叉反应。结果显示抗CCA单克隆抗体识别52.8%的胃癌患者和52.9%的结直肠癌患者，且在部分CEA阴性病例中，胃癌和结直肠患者的CCA阳性率分别为30.0%和48.2%，提示抗CCA单克隆抗体可作为CEA的补充，为开展胃、结直肠癌的普查、临床诊断提供了一种新的诊断指标。本研究血清学检测阳性率偏低的原因可能是：正常人血清中都含有一定量的相关抗原，导致阳性阈值的升高；各种抗原进入血循环后又经肝脏部分分解破坏。避免各种因素对检测的影响和改进检测方法及灵敏度是提高血清学诊断阳性率的重要途径。 在胃良性疾病组中CCA阳性率为10%(4/40)，阳性率较高的可能原因为部分患者为慢性萎缩性胃炎伴肠化生或不典型增生，血清中确实存在一定量的相关抗原，导致良性疾病组CCA阳性率增高[5]。
, 百拇医药
4 参考文献1 张学庸. 单克隆抗体在胃肠道肿瘤诊断和治疗中的应用.中华消化杂志，1992；12(1)18-19
2 Favero G D, Fabris C, Plebani M, et al. CA19-9 and carcinoembryonic antigen in pancreatic
cancer diagnosis. Cancer, 1986;57(4)：1576-1579
3 Kawajar M, Terasaki Pl, Chia D, et al. Use of four monoclonal antibodies to detect
tumor markers. Cancer, 1986;58(6):2008-2012
4 林言箴. 进一步提高胃癌治疗水平的几个关键问题.中华消化杂志，1991；11(6)：311-312
5 Ming SC, Baitai A, Correa P, et al. Gastric dysplasia: Significance and pathologic criteria.
Cancer, 1984;54(5):1794-1801, 百拇医药(袁耀宗,王琴,徐家裕,周文达,俞莺莺,罗伟)
Measurement of serum carcino_associated antigen by anti_colon cancer monoclonal antibody in patients with gastric and colon cancer
Yao-Zong Yuan, Qin Wang,Jia-Yu Xu, Wen-Da Zhou, Ying-Ying Yu and Wei Luo
Department of Gastroenterology, Ruijin Hospital, Shanghai SecondMedical University, Shanghai 200025 China
, 百拇医药
AbstractAIMS To apply anti-colon monoclonal antibody to diagnosisof gastrointestinal maligant tumors serologically.
METHODS We measured the carcino-associated antigen(CCA) levelby ELISA method in gastric and rectosigmoid cancer, benign gastric diseases and health controls. Serum CEA level was also measured simultaneously in above subjects.
RESULTS The positivity rates of CCA were as follows: 1.5% in normal controls, 52.8% in gastric cancer, 52.9% in rectosigmoid cancer, 10% in benign gastric diseases, 30.0% and 48.2% respectively in CEA negative patients with gastric or rectosigmoid cancer. Serum CEA positivity rates were 24.5% and 20.6% respectively in gastric and rectosigmoid cancer.
, 百拇医药
CONCLUSIONS No cross reaction between CCA and CEA antibodies is found. Detection of serum CCA provide a new clinical index for gastric and rectosigmoid cancer.
Subject headings colorectal neoplasms/diagnosis; stomachneoplasms/diagnosis; antigens, neoplasms/analysis; antibody, monoclonal;serodiagnosis
Yuan YZ, Wang Q, Xu JY, Zhou WD, Yu YY, Luo W. Measurement of serum carcino_associated antigen by anti_colon cancer monoclonal antibody in patients with gastric and colon cancer.Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1995；3(1)：3-4
, 百拇医药
摘要目的 应用结直肠癌单克隆抗体对胃肠癌患者进行血清学诊断。
方法 采用ELISA法对胃癌、结直肠癌、胃良性疾病和健康供血者血清中结直肠癌抗原(CCA)进行了测定，同时测定了胃癌、结直肠癌患者血清中CEA含量。
结果 正常人血清CCA阳性仅1.5%。胃癌血清(CCA)阳性率52.8%，CEA阳性率24.5%。CEA阳性病例中CCA阳性率为30.0%。结直肠癌患者CCA阳性率为52.9%，CEA阳性率为20.6%。CEA阴性病例中CCA阳性率为48.2%。胃良性疾病组CCA阳性率为10%。
结论 CCA单抗与CEA无交叉反应，临床上测定CCA可作为CEA的补充，为临床诊断及普查提供了新的诊断指标。
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主题词 结肠直肠肿瘤/诊断；胃肿瘤/诊断；抗原，肿瘤/分析；抗体，单克隆；血清诊断
袁耀宗, 王琴, 徐家裕, 周文达, 俞莺莺, 罗伟.抗结直肠癌单克隆抗体测定胃、肠癌患者血清中癌相关抗原.
新消化病学杂志，1995；3(1)：3-4
应用肿瘤单克隆抗体对恶性肿瘤患者进行血清学诊断是当今临床重点研究课题之一。但迄今尚未发现对胃癌、结直肠癌具有诊断灵敏度高、特异性好，能进行血清学诊断的单克隆抗体。作者用三株结肠癌细胞株(DUD-1, SW116, COLO205)作为混合免疫原制备产生的一株抗结直肠癌抗原(CCA)单克隆抗体，并用ELISA法对胃癌、结直肠癌、胃良性疾病以及健康供血者血清中CCA进行了测定，同时对胃癌、结直肠癌患者测定了CEA，比较其灵敏度和特异性如下。
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 抗体 以结直肠细胞株DUD-1，SW116和COLO205作为混合免疫原，免疫BALB/C小鼠，与SP2/0骨髓瘤细胞融合，获得分泌抗结直肠癌抗原(CCA)的单克隆抗体。
1.2 血清 来自我院确诊病例以及血库健康献血员。其中胃癌(进展期)53例，结直肠癌(进展期)34例，胃良性疾病40例(慢性浅表性胃炎12例，慢性萎缩性胃炎18例，胃、十二指肠溃疡10例)，正常人200例。
1.3 ELISA法 将单克隆抗体(腹水)稀释至每毫升含IgG5μg，酶标孔中每孔100μl，4加盖过夜。次日加入0.5% BSA封闭液置37加盖1h,洗涤，吸干。每孔加样品100μl，37温育后洗涤3次，吸干。再加入100μl酶标抗体，37温育后洗涤4次，吸干。加入OPD底物(新鲜配制)，按2mg OPD 5ml底物缓冲液，每孔100μl，37温育15min。取出后每孔加入2N H2SO4 25μl，终止反应。用美国Bio-Reu公司产品Model ELISA酶标仪读数。CEA测定的方法同上。
, 百拇医药
2 结果
本方法批内变异系数为5.81%，批间变异系数6.84%。正常人血清中CCA含量很低，OD值为0.0238±0.0692(-0.033～0.615)。以大于0.3为阳性判断标准，结果仅3例(1.5%)。胃癌患者53例中CCA阳性者为28例，阳性率52.8%，OD值为0.3384±0.3546，CEA阳性者为13例，阳性率24.5%。CEA阳性病例中，CCA的检出率为48.2%。结直肠癌34例中，CCA阳性18例，阳性率52.9%。胃良性疾病40例中CCA阳性者4例，阳性率为10%；OD值为0.1177±0.2433。
3 讨论
近年来，用血清学方法诊断消化系统恶性肿瘤日趋增多[1，2]。但迄今尚未发现具有器官特异性的抗原，往往某一器官恶性肿瘤免疫所获得的抗体与多种器官恶性肿瘤起反应，造成临床诊断的困难[3]。胃、结直肠癌是我国最常见的恶性肿瘤，早期诊断仍远未获得显著提高[4]。本研究所用单克隆抗体分子量为30000左右的IgG，经免疫印渍法证实与CEA无交叉反应。结果显示抗CCA单克隆抗体识别52.8%的胃癌患者和52.9%的结直肠癌患者，且在部分CEA阴性病例中，胃癌和结直肠患者的CCA阳性率分别为30.0%和48.2%，提示抗CCA单克隆抗体可作为CEA的补充，为开展胃、结直肠癌的普查、临床诊断提供了一种新的诊断指标。本研究血清学检测阳性率偏低的原因可能是：正常人血清中都含有一定量的相关抗原，导致阳性阈值的升高；各种抗原进入血循环后又经肝脏部分分解破坏。避免各种因素对检测的影响和改进检测方法及灵敏度是提高血清学诊断阳性率的重要途径。 在胃良性疾病组中CCA阳性率为10%(4/40)，阳性率较高的可能原因为部分患者为慢性萎缩性胃炎伴肠化生或不典型增生，血清中确实存在一定量的相关抗原，导致良性疾病组CCA阳性率增高[5]。
, 百拇医药
4 参考文献1 张学庸. 单克隆抗体在胃肠道肿瘤诊断和治疗中的应用.中华消化杂志，1992；12(1)18-19
2 Favero G D, Fabris C, Plebani M, et al. CA19-9 and carcinoembryonic antigen in pancreatic
cancer diagnosis. Cancer, 1986;57(4)：1576-1579
3 Kawajar M, Terasaki Pl, Chia D, et al. Use of four monoclonal antibodies to detect
tumor markers. Cancer, 1986;58(6):2008-2012
4 林言箴. 进一步提高胃癌治疗水平的几个关键问题.中华消化杂志，1991；11(6)：311-312
5 Ming SC, Baitai A, Correa P, et al. Gastric dysplasia: Significance and pathologic criteria.
Cancer, 1984;54(5):1794-1801, 百拇医药(袁耀宗,王琴,徐家裕,周文达,俞莺莺,罗伟)