大肠腺癌中nm23基因的低表达与淋巴结转移
解放军254医院病理科 天津市 300142
张桂芬，女，1950-02-14生，天津市人，汉族.1974年天津医科大学医疗系毕业，副主任医师，病理专业，发表论文10篇
项目负责人 张桂芬,300142 天津市亲涨区五号路160号,天津市,解放军254医院病理科
Tel: 022- 6355983收搞日期 1995-10-05 接收日期 1995-11-16
Low expression of nm23 gene and lymph node metastasis in large intestinal adenocarcinoma
, 百拇医药
Gui-Fen Zhang, Zhi-Cai Sun, Yu-Yuan Lu, Guo-Hong Wei and Rong Liu
Department of Pathoiogy, Chinese PLA 254 Hospital, Tianjin 300142 China
Abstract
AIMS To study the nm23 gene expression and the nucleoside diphosphae kinase (NDPK) which is the product of the metastasis suppressor gene of tumor, in large intestinal adenocarcinoma.
METHODS Labelled streptavidin-biotia(LSAB) immunihistoche mistrical expression method was used in 78 patients with colon cancer.
, 百拇医药
RESULTS The nm23 revealed positive expression in normal colon mucosa but low expression in large intestine adenocarcinom. The negative rate was 74%(58/78) and the total cells were not expressive in 35 out of 58 cases, and only in 23 the part positive. With or without lymph node metasis, their primary lesion, negative expression was 85%(40/47) and 59% (18/31) respectively with remarkable significant difference (P <0.05). There was a close relationship between expression rate of nm23 and the differentiation degree of large intestinal adenocarcinoma. The highly differentiated adenocarcinoma showed more positive expression and viserersa but it did not correlate with clinical stages.
, 百拇医药
CONCLUSIONS The low expression of nm23 gene in large intestinal carcinoma correlated with metastatic status, infiltration and differentiation.
Subject headings colorectal neoplasms gene expression lymphatic metstasis adenocarcinoma
Zhang GF, Sun ZC, Lu YY, Wei GH,Liu R.Low expression of nm23 gene and lymph node metastasis in large intestinal adenocarcinoma.
, http://www.100md.com Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(9)：487-488
摘要
目的 研究肿瘤转移抑制基因nm23表达产物二磷酸核苷激酶在大肠腺癌中的表达意义.
方法 应用LSAB免疫组织化学染色方法研究大肠腺癌标本78例.
结果 nm23基因在正常结肠粘膜腺体细胞为阳性表达. 在大肠腺癌中呈现低表达，阴性率为74%(58/78)，其中全部细胞无表达35例，部分细胞表达23例. 伴有淋巴结转移者其原发病灶表达阴性率为85%(40/47)，不伴有淋巴结转移者其阴性率为58%(18/31)，差异有显著意义(P<0.05). nm23基因表达与大肠腺癌的分化程度有关，高分化腺癌大多数呈现阳性表达，低分化腺癌呈现低表达. 与临床分期无显著相关.
, 百拇医药
结论 nm23基因在大肠腺癌的低表达与肿瘤的转移、浸润、分化程度有关.
主题词 结肠直肠肿瘤;腺癌;基因表达;淋巴转移
张桂芬,孙智才,芦于原,魏国红,刘嵘.大肠腺癌中nm23基因的低表达与淋巴结转移.新消化病学杂志,1996；4(9)：487-488
近年许多研究表明，癌基因的许多结构变化与异常表达是肿瘤发生的基本原因，它们起着调控细胞生长和分化的重要作用.nm23基因是与上皮细胞的分化调控和转移抑制相关的基因.我们应用LSAB法检测78例大肠腺癌，以分析nm23基因的表达与大肠腺癌的转移、分化程度及与临床分期的关系.
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料 均取自本科近10年的手术切除标本存档蜡块.其中高分化腺癌8例，中分化腺癌42例，低分化腺癌28例.手术时已有局部或区域淋巴结转移者47例，其中3例伴远处转移.按Turbull临床分期，A期10例(即癌肿尚局限于肠壁内，无转移)，B期21例(癌肿已穿透肠壁，侵入周围脂肪组织，但无转移)，C期44例(有局部淋巴结转移，但无远处转移)，D期3例(已有远处转移).
1.2 方法 常规石蜡包埋，4μm切片.nm23抗体系美国Oncor公司产品，应用丹麦Dako公司LSAB组合试剂盒进行免疫组织化学染色，DAB显色染色步骤按说明书进行.结果判定：染色阳性信号为棕黄色，主要存在于细胞浆内.观察肿瘤细胞有低染色区，以胞浆内有无显色作为nm23基因表达的标志，分为阴性(-)全部肿瘤细胞无显色；部分阴性(+)部分肿瘤细胞显色，阳性(++)全部肿瘤细胞显色.对照以PBS缓冲液代替nm23抗体作为阴性对照.
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 大肠腺癌nm23基因的表达 大肠腺癌78例中nm23基因表达阴性35例，部分阴性23例，阳性20例，阴性率为74.0%；正常结肠粘膜腺体细胞为阳性(图1).
2.2 nm23基因表达与大肠腺癌分化 高分化腺癌8例，阴性1例，阳性7例(图2)；中分化腺癌42例，阴性9例，部分阴性20例(图3)，阳性13例；低分化腺癌28例，阴性26例(图4)，部分阴性2例.不同分化程度的阴性率分别为12.5%(1/8)，69%(28/42)，100%(28/28)，三者比较差异有显著性(P<0.05).2.3 nm23基因表达与淋巴结转移伴有淋巴结转移的大肠腺癌47例，其中40例原发病灶表达为阴性及部分阴性，阴性率为85.0%；不伴有淋巴结转移的大肠腺癌31例中18例原发病灶为阴性及部分阴性，阴性率为58.0%.二者比较差异有显著性(P<0.05).提示nm23基因与大肠腺癌淋巴结转移的关系密切.
, 百拇医药
2.4 nm23基因表达与大肠腺癌临床分期 按Turbull临床分期，A期10例中4例为阴性或部分阴性；B期21例中14例为阴性；C期44例中37例为阴性；D期3例均为阴性；阴性率分别为400%，666%，840%，100%，四者比较差异无显著性(P>0.05).
图1 正常结肠粘膜腺体细胞阳性 ×200
图2 高分化腺癌细胞阳性 ×200
图3 中分化腺癌细胞部分阴性 ×200
图4 低分化腺癌细胞阴性 ×200
, http://www.100md.com
3 讨论
nm23基因定位于17q染色体，Steeg等[1]发现nm23基因表达在有低转移潜力的肿瘤中增高，nm23基因表达显示与人类肿瘤转移潜力呈负相关.人类nm23基因产物可能是一种二磷酸核苷酸激酶(NDPK)，这种酶是合成三磷酸核苷酸的重要酶，与微管的聚合生成、G蛋白介导的信号传递有密切关系.从目前的研究看，nm23是与上皮细胞的分化调控和转移抑制相关的基因.
Barnes等[2]对39例乳腺浸润型性导管癌的研究显示nm23基因呈低表达.正常乳腺导管上皮着色程度比肿瘤细胞深，浸润性导管癌的nm23着色程度是不同的，许多肿瘤有低着色区域，这个区域为成片的瘤细胞或为侵犯间质的细胞.本结果也显示，78例大肠腺癌中58例nm23基因呈阴性或部分阴性的低表达，阴性率为74%；而结肠正常粘膜腺体细胞呈着色不一的阳性表达.Leone等[3]报告在20例NSCLC中的12例有资料的病例中，5例有nm23的丢失，占42%，而且均为肺腺癌.这说明nm23基因在不同肿瘤中表达水平不一，可能与某些肿瘤组织中基因的缺失、失活、突变有关，而且与浸润转移相关.
, 百拇医药
Hennessy等[4]也研究了人乳腺癌中nm23的表达与其淋巴结转移的关系.71例中61例淋巴结转移，其中35例阳性，26例阴性，表明nm23的水平与淋巴结转移有密切关系.未浸及淋巴结的患者69%呈高表达，而淋巴结阳性者只有37%的表达率.Steeg等[1]把5例有高度转移性的鼠的K-1735恶性黑色素瘤与2例相关的低度转移性的恶黑进行比较，发现在高度转移的恶黑中稳定状态的nm23水平减少.本研究结果表明47例伴淋巴结转移的大肠腺癌中40例呈现低表达，占85.0%，31例不伴有淋巴结转移中18例呈现低表达，占58.0%.这说明nm23是一种与转移抑制相关的基因，参与了肿瘤转移调节机制.
Hennessy等[4]的研究还认为乳腺肿瘤的组织分化和nm23的表达也有密切关系.按Slom标准分级后发现高分化癌中76%呈nm23表达，而低分化癌中只有43.5%的阳性率.具有高表达nm23的乳腺癌患者无病生存期及整个生存期都比表达低者长，二者间有显著差异.nm23的表达为从那些传统方法认为预后良好的患者中区分出预后差的患者，提供了有价值的预后指标.Barnes等[2]的研究是三位病理学家同时应用Cox's比例机会模式方法作为nm23表达生存期的标志，结果，均提供了nm23的低表达与乳腺癌患者生存期减少有关.本结果也显示了nm23基因与大肠腺癌的分化程度有关系，高分化腺癌大多数呈现阳性表达，低分化腺癌呈现明显低表达.本研究nm23基因的表达与临床分期的关系无显著相关性，与患者生存期的关系，有待进一步研究.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 Steeg PS, Bevilacqua G, Kopper L, et al. Evidence for a novel gene associated with low matastatic potential.
J Ntl Cancer Inst, 1988;80(2):200-203
2 Barnes R, Masood S, Barker E, et al. Low nm23 protein expression in infiltrating ductal breast carcinomas correlates with
reduced patient surrvival. Am J Pathol, 1991;139(2):245-250
, 百拇医药
3 Leoe A, Flatow U, King CR, et al. Reduced tomor incidence, matastatic potential and cytokone responsiveness of nm23
transfected melanoma cell. Cell, 1991;65(1):25-35
4 Hennessy C, Henry JA, May FEB, et al. Expression of the anti-metastatic gene nm23 in human breast cancer: association with
good prognosis. J Natl Cancer Inst, 1991;83(2):281-285, 百拇医药(张桂芬 孙智才 芦于原 魏国红 刘嵘)
张桂芬，女，1950-02-14生，天津市人，汉族.1974年天津医科大学医疗系毕业，副主任医师，病理专业，发表论文10篇
项目负责人 张桂芬,300142 天津市亲涨区五号路160号,天津市,解放军254医院病理科
Tel: 022- 6355983收搞日期 1995-10-05 接收日期 1995-11-16
Low expression of nm23 gene and lymph node metastasis in large intestinal adenocarcinoma
, 百拇医药
Gui-Fen Zhang, Zhi-Cai Sun, Yu-Yuan Lu, Guo-Hong Wei and Rong Liu
Department of Pathoiogy, Chinese PLA 254 Hospital, Tianjin 300142 China
Abstract
AIMS To study the nm23 gene expression and the nucleoside diphosphae kinase (NDPK) which is the product of the metastasis suppressor gene of tumor, in large intestinal adenocarcinoma.
METHODS Labelled streptavidin-biotia(LSAB) immunihistoche mistrical expression method was used in 78 patients with colon cancer.
, 百拇医药
RESULTS The nm23 revealed positive expression in normal colon mucosa but low expression in large intestine adenocarcinom. The negative rate was 74%(58/78) and the total cells were not expressive in 35 out of 58 cases, and only in 23 the part positive. With or without lymph node metasis, their primary lesion, negative expression was 85%(40/47) and 59% (18/31) respectively with remarkable significant difference (P <0.05). There was a close relationship between expression rate of nm23 and the differentiation degree of large intestinal adenocarcinoma. The highly differentiated adenocarcinoma showed more positive expression and viserersa but it did not correlate with clinical stages.
, 百拇医药
CONCLUSIONS The low expression of nm23 gene in large intestinal carcinoma correlated with metastatic status, infiltration and differentiation.
Subject headings colorectal neoplasms gene expression lymphatic metstasis adenocarcinoma
Zhang GF, Sun ZC, Lu YY, Wei GH,Liu R.Low expression of nm23 gene and lymph node metastasis in large intestinal adenocarcinoma.
, http://www.100md.com Xin Xiaohuabingxue Zazhi,1996；4(9)：487-488
摘要
目的 研究肿瘤转移抑制基因nm23表达产物二磷酸核苷激酶在大肠腺癌中的表达意义.
方法 应用LSAB免疫组织化学染色方法研究大肠腺癌标本78例.
结果 nm23基因在正常结肠粘膜腺体细胞为阳性表达. 在大肠腺癌中呈现低表达，阴性率为74%(58/78)，其中全部细胞无表达35例，部分细胞表达23例. 伴有淋巴结转移者其原发病灶表达阴性率为85%(40/47)，不伴有淋巴结转移者其阴性率为58%(18/31)，差异有显著意义(P<0.05). nm23基因表达与大肠腺癌的分化程度有关，高分化腺癌大多数呈现阳性表达，低分化腺癌呈现低表达. 与临床分期无显著相关.
, 百拇医药
结论 nm23基因在大肠腺癌的低表达与肿瘤的转移、浸润、分化程度有关.
主题词 结肠直肠肿瘤;腺癌;基因表达;淋巴转移
张桂芬,孙智才,芦于原,魏国红,刘嵘.大肠腺癌中nm23基因的低表达与淋巴结转移.新消化病学杂志,1996；4(9)：487-488
近年许多研究表明，癌基因的许多结构变化与异常表达是肿瘤发生的基本原因，它们起着调控细胞生长和分化的重要作用.nm23基因是与上皮细胞的分化调控和转移抑制相关的基因.我们应用LSAB法检测78例大肠腺癌，以分析nm23基因的表达与大肠腺癌的转移、分化程度及与临床分期的关系.
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料 均取自本科近10年的手术切除标本存档蜡块.其中高分化腺癌8例，中分化腺癌42例，低分化腺癌28例.手术时已有局部或区域淋巴结转移者47例，其中3例伴远处转移.按Turbull临床分期，A期10例(即癌肿尚局限于肠壁内，无转移)，B期21例(癌肿已穿透肠壁，侵入周围脂肪组织，但无转移)，C期44例(有局部淋巴结转移，但无远处转移)，D期3例(已有远处转移).
1.2 方法 常规石蜡包埋，4μm切片.nm23抗体系美国Oncor公司产品，应用丹麦Dako公司LSAB组合试剂盒进行免疫组织化学染色，DAB显色染色步骤按说明书进行.结果判定：染色阳性信号为棕黄色，主要存在于细胞浆内.观察肿瘤细胞有低染色区，以胞浆内有无显色作为nm23基因表达的标志，分为阴性(-)全部肿瘤细胞无显色；部分阴性(+)部分肿瘤细胞显色，阳性(++)全部肿瘤细胞显色.对照以PBS缓冲液代替nm23抗体作为阴性对照.
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2 结果
2.1 大肠腺癌nm23基因的表达 大肠腺癌78例中nm23基因表达阴性35例，部分阴性23例，阳性20例，阴性率为74.0%；正常结肠粘膜腺体细胞为阳性(图1).
2.2 nm23基因表达与大肠腺癌分化 高分化腺癌8例，阴性1例，阳性7例(图2)；中分化腺癌42例，阴性9例，部分阴性20例(图3)，阳性13例；低分化腺癌28例，阴性26例(图4)，部分阴性2例.不同分化程度的阴性率分别为12.5%(1/8)，69%(28/42)，100%(28/28)，三者比较差异有显著性(P<0.05).2.3 nm23基因表达与淋巴结转移伴有淋巴结转移的大肠腺癌47例，其中40例原发病灶表达为阴性及部分阴性，阴性率为85.0%；不伴有淋巴结转移的大肠腺癌31例中18例原发病灶为阴性及部分阴性，阴性率为58.0%.二者比较差异有显著性(P<0.05).提示nm23基因与大肠腺癌淋巴结转移的关系密切.
, 百拇医药
2.4 nm23基因表达与大肠腺癌临床分期 按Turbull临床分期，A期10例中4例为阴性或部分阴性；B期21例中14例为阴性；C期44例中37例为阴性；D期3例均为阴性；阴性率分别为400%，666%，840%，100%，四者比较差异无显著性(P>0.05).
图1 正常结肠粘膜腺体细胞阳性 ×200
图2 高分化腺癌细胞阳性 ×200
图3 中分化腺癌细胞部分阴性 ×200
图4 低分化腺癌细胞阴性 ×200
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3 讨论
nm23基因定位于17q染色体，Steeg等[1]发现nm23基因表达在有低转移潜力的肿瘤中增高，nm23基因表达显示与人类肿瘤转移潜力呈负相关.人类nm23基因产物可能是一种二磷酸核苷酸激酶(NDPK)，这种酶是合成三磷酸核苷酸的重要酶，与微管的聚合生成、G蛋白介导的信号传递有密切关系.从目前的研究看，nm23是与上皮细胞的分化调控和转移抑制相关的基因.
Barnes等[2]对39例乳腺浸润型性导管癌的研究显示nm23基因呈低表达.正常乳腺导管上皮着色程度比肿瘤细胞深，浸润性导管癌的nm23着色程度是不同的，许多肿瘤有低着色区域，这个区域为成片的瘤细胞或为侵犯间质的细胞.本结果也显示，78例大肠腺癌中58例nm23基因呈阴性或部分阴性的低表达，阴性率为74%；而结肠正常粘膜腺体细胞呈着色不一的阳性表达.Leone等[3]报告在20例NSCLC中的12例有资料的病例中，5例有nm23的丢失，占42%，而且均为肺腺癌.这说明nm23基因在不同肿瘤中表达水平不一，可能与某些肿瘤组织中基因的缺失、失活、突变有关，而且与浸润转移相关.
, 百拇医药
Hennessy等[4]也研究了人乳腺癌中nm23的表达与其淋巴结转移的关系.71例中61例淋巴结转移，其中35例阳性，26例阴性，表明nm23的水平与淋巴结转移有密切关系.未浸及淋巴结的患者69%呈高表达，而淋巴结阳性者只有37%的表达率.Steeg等[1]把5例有高度转移性的鼠的K-1735恶性黑色素瘤与2例相关的低度转移性的恶黑进行比较，发现在高度转移的恶黑中稳定状态的nm23水平减少.本研究结果表明47例伴淋巴结转移的大肠腺癌中40例呈现低表达，占85.0%，31例不伴有淋巴结转移中18例呈现低表达，占58.0%.这说明nm23是一种与转移抑制相关的基因，参与了肿瘤转移调节机制.
Hennessy等[4]的研究还认为乳腺肿瘤的组织分化和nm23的表达也有密切关系.按Slom标准分级后发现高分化癌中76%呈nm23表达，而低分化癌中只有43.5%的阳性率.具有高表达nm23的乳腺癌患者无病生存期及整个生存期都比表达低者长，二者间有显著差异.nm23的表达为从那些传统方法认为预后良好的患者中区分出预后差的患者，提供了有价值的预后指标.Barnes等[2]的研究是三位病理学家同时应用Cox's比例机会模式方法作为nm23表达生存期的标志，结果，均提供了nm23的低表达与乳腺癌患者生存期减少有关.本结果也显示了nm23基因与大肠腺癌的分化程度有关系，高分化腺癌大多数呈现阳性表达，低分化腺癌呈现明显低表达.本研究nm23基因的表达与临床分期的关系无显著相关性，与患者生存期的关系，有待进一步研究.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 Steeg PS, Bevilacqua G, Kopper L, et al. Evidence for a novel gene associated with low matastatic potential.
J Ntl Cancer Inst, 1988;80(2):200-203
2 Barnes R, Masood S, Barker E, et al. Low nm23 protein expression in infiltrating ductal breast carcinomas correlates with
reduced patient surrvival. Am J Pathol, 1991;139(2):245-250
, 百拇医药
3 Leoe A, Flatow U, King CR, et al. Reduced tomor incidence, matastatic potential and cytokone responsiveness of nm23
transfected melanoma cell. Cell, 1991;65(1):25-35
4 Hennessy C, Henry JA, May FEB, et al. Expression of the anti-metastatic gene nm23 in human breast cancer: association with
good prognosis. J Natl Cancer Inst, 1991;83(2):281-285, 百拇医药(张桂芬 孙智才 芦于原 魏国红 刘嵘)