食管贲门癌冷冻对免疫功能的调节
山东省肿瘤防治研究院胸外科 济南市 250117
杨瑞森，男，1942-09-29生，北京市人，满族.1966年青岛医学院医疗系毕业，副主任医师，主要从事胸外科肿瘤疾病的诊治研究，发表论文30篇，获1994年省卫生厅科技进步二等奖1项.
项目负责人 杨瑞森，山东省济南市西郊山东省肿瘤防治研究院
Telephone:0531-7984777收稿日期 1995-10-21 接收日期 1996-01-02
Immunological modulation of cryotherapy in patients with esophageal and cardiac carcinoma
, 百拇医药
Rei_Shen Yang, Qi Liu, Li-Min Zhnag, Bei-Jiang Zhang and Xing-Guo Zhang
Department of Thoracic Surgery, Shandong Provincial Tumor Hospital, Jinan 250117, China
AbstractAIM To study the immunological modulation of cryotherapy in 20 patients with esophageal and cardiac carcinoma.
METHODS Intracavitary cryosurgery was performed in esophagus an d then esophagectomy was done through throractomy in 20 patients with esophageal and cardiac carcinoma. Serum IgG, IgA, IgM, complement C3 and lymphocyte tran sforming tests (LTT) were made before and after surgery. Light and eletron microscopy was also performed.
, 百拇医药
RESULTS Lymph nodes enlarged around the primary focus of esopha geal and cardiac carcinoma. Cancer cell necrosis giant cells phagocizing cancer cells and lymph node folliculosis were seen. Serum IgG and IgM had no obvious ch anges after cryotherapy. The LTT was increased from 38.0% to 44.8% after cryot herapy. The serum IgA increased from 2.16g/L to 2.32g/L and C3 was incre ased from 1.3g/L to 2.0g/L after cryotherepy.
CONCLUSION Esophageal intracavitary cryotherapy can improve im mune function and kill cancer cells.
, http://www.100md.com
Subject headings Esophageal neoplasms/immunology;Stomach neoplasms/immunology\ \ Cardia\ \ Cryotherpy;Carcinoma, squamous cell/immunology\ \ Adenocarcinoma/immunology
Yang RS, Liu Q, Zhang LM, Zhang BJ,Zhang XG.Immunological modulation of cryotherapy in patients with esophageal and cardiac carcinoma.Xin Xiaohuabingxue Zazhi, 1997；5(3)：168-169
摘 要目的 研究食管贲门癌患者食管腔内冷冻对免疫功能的调节作用.
, http://www.100md.com
方法 食管癌15例，贲门癌5例；男11例，女9例.先行食管腔内冷冻，再行开胸手术切除。用光镜及电镜系统观察癌细胞变化及局部淋巴反应，以及血中免疫球蛋白、补体C3及淋巴细胞转化试验LTT.
结果 食管贲门癌原发灶周围淋巴结呈广泛性肿大，癌细胞坏死，可见异物巨细胞吞噬癌细胞，淋巴结呈滤泡增生反应.冷冻前后免疫球蛋白IgG、IgM无明显差异；LTT由冷冻前的38.0%增加到44.8%，IgA由冷冻前的2.16g/L增加到2.32g/L，C3也 由冷冻前1.3g/L增加到2.0g/L.
结论 食管贲门癌腔内冷冻能调节机体的免疫功能和杀伤癌细胞.
主题词 食管肿瘤/免疫学;胃肿瘤/免疫学;贲门;冷冻疗法癌，鳞状细胞/免疫学;腺癌/免疫学
, 百拇医药
杨瑞森,刘奇,张利民,张百江,张兴国.食管贲门癌冷冻对免疫功能的调节.新消化病学杂志, 1997；5(3)：168-169
大量的动物实验结果表明，冷冻治疗可以提高生物的免疫功能，特别是肿瘤特异性的免疫反 应有明显增强[1].我院1991年开始进行食管腔内冷冻治疗食管癌和贲门癌，并对 免疫功能的调节进行了研究.现已完成20例，报告如下.
1 对象和方法1.1 对象 食管癌15例(其中溃疡型10例，髓质型2例，蕈伞型、缩窄型、腔内型各1例)；贲门癌5例(其 中溃疡型4例，浸润型1例).男11例，女9例；年龄35岁～70岁，平均50.4岁；病灶3.5cm ～9cm，平均6.1cm.20例术前均经内镜和病理学诊断，其中鳞癌15例，腺癌5例.
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1.2 方法
1.2.1 仪器 选用液态氮做为致冷剂；应用自行设计并制造的软管冷冻探头；应用铂电阻做为测温用的 低温测温仪；将上消化道纤维内镜做为引导插管用；应用YDZ_6型液氮低温治疗机.
1.2.2 方法 术前禁食6h～8h，术前30min肌注阿托品1mg，地卡因粘膜麻醉下先行内镜检查术，确认病变大小及累及范围.在内镜引导下，将连接有铂电阻测温装置的冷冻探头插入到病变部位，取出内镜，固定冷冻软管，接通YDZ-6型冷冻治疗机，于3min之内迅速将病灶局部降温至-40℃～-100℃，持续恒温3min，缓慢复温15min为1个冻融周期，每次1个～3个周期.本组20例，食管腔内冷冻后分别间隔不同时间再行食管贲门癌病灶切除，食管胃吻合术，手 术经过顺利，未发生吻合口瘘，无手术死亡.
1.2.3 免疫功能指标 本组病例首先观察冷冻后患者胸腔内大体形态学改变，以及术后病理学改变和电子显微镜下超微结构的改变.同时分别测定冷冻前后多价的完全抗体IgG和双价的完全抗体IgM，IgA ，代表补体系统的核心部分C3以及淋巴细胞转化试验LTT.
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2 结果术中所见及大体标本的肉眼观察，食管壁高度肿胀，壁厚可达0.6cm～1.5cm，食管壁 断面呈淤血状.病灶周围所属1～2站淋巴结呈广泛性肿大，直径0.5cm～2.5cm，质软 ，色黑.部分淋巴结密集处，如隆突下或胃左动脉旁淋巴结呈部分融合状.病理学观察，癌细胞表面坏死，冷冻至-50℃以下者，可见冷冻处2/3壁厚的癌组织坏死，核溶解，可见异 物巨细胞吞噬癌细胞的图像.食管壁全层有大量中性粒细胞浸润.淋巴结呈滤泡增生反应.电镜下超微结构也发生了明显的改变，绝大部分癌细胞破损，部分退变明显，细 胞间连接桥粒消失，细胞膜破裂，胞浆减少，大量空泡形成.细胞质内超微结构不清，细胞 器呈碎片状，嵴结构消失，核膜、胞浆破损，染色体聚集.免疫指标测定结果表1.
表1 食管贲门癌冷冻前后各项免疫指标的变化 (n=20)
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从上表看出，冷冻前后免疫球蛋白IgG和IgM无明显差异，LTT确有明显的增加，免疫球蛋白I gA和补体C3冷冻治疗后均明显的高于冷冻前的水平.
3 讨论冷冻治疗法是近30年来所兴起的一种新的治疗肿瘤的方法.随着冷冻器械的不断更新和设计 ，冷冻医疗已经从单纯对体表肿物的治疗，进而发展到对体腔内的肿瘤进行治疗.近年来，日本以及东欧一些国家的学者，通过皮肤试验、 玫瑰花瓣试验、补体结合试验以及对局部组织的光镜观察发现冷冻不但能改善机体的一般状 况，而且有调节免疫反应的功能[2].我们通过纤维内镜引导下的食管腔内冷冻治疗原发性食管癌和原发性贲门癌20例，先行食管腔内冷冻，再行手术切除，结果发现了许 多与机体免疫反应增强有关的现象，①癌组织经冷冻治疗后表面肿瘤组织坏死.病理学发现，当冷冻至-50℃以下时，冷冻处2/3壁厚的癌组织坏死，核溶解.电镜下也证实了冷冻处绝大部分癌组织破损，细胞 的超微结构严重破坏，有时整个视野内见不到一个完整癌细胞的图像.癌组织的坏死在生物 体内必然形成一种特异性抗原，该抗原引起机体对坏死的肿瘤组织产生一种持异性抗体， 即冷冻后肿瘤特异性的免疫反应.②在手术切除过程中发现，冷冻后病灶周围所属1-2站的 淋巴结呈广泛性肿大，直径在0.5cm～2.5cm之间.隆突下淋巴结多呈现部分融合状.经病理学证实，淋巴结呈滤泡增生反应，估计与机体的免疫反应增强有关.③手术后病理学 检查发现，冷冻处食管壁的全层有大量的炎性细胞浸润，冷冻距离手术时间间隔短者可见有 大量中性粒细胞浸润，间隔时间长者转化为淋巴结细胞增生明显.有时镜下可见异物巨细胞 吞 噬癌细胞的现象.冷冻可致癌细胞坏死，已被上述资料所证实.冷冻致使癌细胞坏死的机理主 要通过：①温度变化(温度休克)，②细胞内外水晶形成，③细胞内外盐类浓缩和pH改变，④细胞皱缩所引起[3].经冷冻后所产生的坏死病灶可引起机体产生一种对肿瘤组织 引起一定反应的特殊抗体，这就是冷冻免疫.本组在冷冻食管癌、贲门癌后所产生的上述各种现象，如癌细胞坏死、淋巴结的滤泡样增生 、病灶周围大量的炎性细胞浸润和异物巨细胞吞噬癌细胞的现象都充分证实了机体的免疫功能得到了明显的增强，机体的免疫监视功能也得到了进一步 的发挥.中村观察了内痔、外痔和脱肛患者冷冻前后血清免疫球蛋白的变化，发现92.9%(39/42)见 有IgM值含量增高，83.8%(31/37)IgA值，59%(23/39)IgG值均见增高.龟谷等对9例宫颈癌 患者进行了冷冻治疗后，也发现血清球蛋白IgG,IgA,IgM明显增高.与同时期单独抗癌剂组(使用化疗药 物)作为对照发现，所有病例的血清蛋白IgG,IgA,IgM含量均呈急剧下降.本组20例冷冻加手术前后均测定了各项免疫指标，结果表明免疫球蛋白IgG和IgM冷冻前后无明显差异 ，LTT值冷冻及手术治疗后有上升趋势，免疫球蛋白IgA和补体C的检测结果表明高于冷冻前 的水平.通常手术治疗癌肿后，患者的血清癌特异性抗体一度骤降是近代癌肿免疫问题研究出来的一个客观事实.本组20例使用的治疗方法是冷冻加手术，冷冻可提高免疫功能，而手 术又可降低免疫功能，所以本组病例冷冻加手术后再检测免疫指标并未急剧上升是可以理解的.另外本文的免疫检测资料由于病例较少，而且动态观察时间较短，尚不能完全的反映出冷冻加手术免疫增强的真正水平，尚待进一步的追踪观察.
4 参考文献1 刘金刚，刘作斌.低温医学.北京：人民卫生出版社，1993：343-349
2 张忠兵.冷冻治疗对直肠癌患者免疫功能的调节.癌症，1990；9(5)：365
3 郭玉德.实用冷冻疗法.北京：人民卫生出版社，1990：51-57, 百拇医药(杨瑞森 刘奇 张利民 张百江 张兴国)
杨瑞森，男，1942-09-29生，北京市人，满族.1966年青岛医学院医疗系毕业，副主任医师，主要从事胸外科肿瘤疾病的诊治研究，发表论文30篇，获1994年省卫生厅科技进步二等奖1项.
项目负责人 杨瑞森，山东省济南市西郊山东省肿瘤防治研究院
Telephone:0531-7984777收稿日期 1995-10-21 接收日期 1996-01-02
Immunological modulation of cryotherapy in patients with esophageal and cardiac carcinoma
, 百拇医药
Rei_Shen Yang, Qi Liu, Li-Min Zhnag, Bei-Jiang Zhang and Xing-Guo Zhang
Department of Thoracic Surgery, Shandong Provincial Tumor Hospital, Jinan 250117, China
AbstractAIM To study the immunological modulation of cryotherapy in 20 patients with esophageal and cardiac carcinoma.
METHODS Intracavitary cryosurgery was performed in esophagus an d then esophagectomy was done through throractomy in 20 patients with esophageal and cardiac carcinoma. Serum IgG, IgA, IgM, complement C3 and lymphocyte tran sforming tests (LTT) were made before and after surgery. Light and eletron microscopy was also performed.
, 百拇医药
RESULTS Lymph nodes enlarged around the primary focus of esopha geal and cardiac carcinoma. Cancer cell necrosis giant cells phagocizing cancer cells and lymph node folliculosis were seen. Serum IgG and IgM had no obvious ch anges after cryotherapy. The LTT was increased from 38.0% to 44.8% after cryot herapy. The serum IgA increased from 2.16g/L to 2.32g/L and C3 was incre ased from 1.3g/L to 2.0g/L after cryotherepy.
CONCLUSION Esophageal intracavitary cryotherapy can improve im mune function and kill cancer cells.
, http://www.100md.com
Subject headings Esophageal neoplasms/immunology;Stomach neoplasms/immunology\ \ Cardia\ \ Cryotherpy;Carcinoma, squamous cell/immunology\ \ Adenocarcinoma/immunology
Yang RS, Liu Q, Zhang LM, Zhang BJ,Zhang XG.Immunological modulation of cryotherapy in patients with esophageal and cardiac carcinoma.Xin Xiaohuabingxue Zazhi, 1997；5(3)：168-169
摘 要目的 研究食管贲门癌患者食管腔内冷冻对免疫功能的调节作用.
, http://www.100md.com
方法 食管癌15例，贲门癌5例；男11例，女9例.先行食管腔内冷冻，再行开胸手术切除。用光镜及电镜系统观察癌细胞变化及局部淋巴反应，以及血中免疫球蛋白、补体C3及淋巴细胞转化试验LTT.
结果 食管贲门癌原发灶周围淋巴结呈广泛性肿大，癌细胞坏死，可见异物巨细胞吞噬癌细胞，淋巴结呈滤泡增生反应.冷冻前后免疫球蛋白IgG、IgM无明显差异；LTT由冷冻前的38.0%增加到44.8%，IgA由冷冻前的2.16g/L增加到2.32g/L，C3也 由冷冻前1.3g/L增加到2.0g/L.
结论 食管贲门癌腔内冷冻能调节机体的免疫功能和杀伤癌细胞.
主题词 食管肿瘤/免疫学;胃肿瘤/免疫学;贲门;冷冻疗法癌，鳞状细胞/免疫学;腺癌/免疫学
, 百拇医药
杨瑞森,刘奇,张利民,张百江,张兴国.食管贲门癌冷冻对免疫功能的调节.新消化病学杂志, 1997；5(3)：168-169
大量的动物实验结果表明，冷冻治疗可以提高生物的免疫功能，特别是肿瘤特异性的免疫反 应有明显增强[1].我院1991年开始进行食管腔内冷冻治疗食管癌和贲门癌，并对 免疫功能的调节进行了研究.现已完成20例，报告如下.
1 对象和方法1.1 对象 食管癌15例(其中溃疡型10例，髓质型2例，蕈伞型、缩窄型、腔内型各1例)；贲门癌5例(其 中溃疡型4例，浸润型1例).男11例，女9例；年龄35岁～70岁，平均50.4岁；病灶3.5cm ～9cm，平均6.1cm.20例术前均经内镜和病理学诊断，其中鳞癌15例，腺癌5例.
, http://www.100md.com
1.2 方法
1.2.1 仪器 选用液态氮做为致冷剂；应用自行设计并制造的软管冷冻探头；应用铂电阻做为测温用的 低温测温仪；将上消化道纤维内镜做为引导插管用；应用YDZ_6型液氮低温治疗机.
1.2.2 方法 术前禁食6h～8h，术前30min肌注阿托品1mg，地卡因粘膜麻醉下先行内镜检查术，确认病变大小及累及范围.在内镜引导下，将连接有铂电阻测温装置的冷冻探头插入到病变部位，取出内镜，固定冷冻软管，接通YDZ-6型冷冻治疗机，于3min之内迅速将病灶局部降温至-40℃～-100℃，持续恒温3min，缓慢复温15min为1个冻融周期，每次1个～3个周期.本组20例，食管腔内冷冻后分别间隔不同时间再行食管贲门癌病灶切除，食管胃吻合术，手 术经过顺利，未发生吻合口瘘，无手术死亡.
1.2.3 免疫功能指标 本组病例首先观察冷冻后患者胸腔内大体形态学改变，以及术后病理学改变和电子显微镜下超微结构的改变.同时分别测定冷冻前后多价的完全抗体IgG和双价的完全抗体IgM，IgA ，代表补体系统的核心部分C3以及淋巴细胞转化试验LTT.
, http://www.100md.com
2 结果术中所见及大体标本的肉眼观察，食管壁高度肿胀，壁厚可达0.6cm～1.5cm，食管壁 断面呈淤血状.病灶周围所属1～2站淋巴结呈广泛性肿大，直径0.5cm～2.5cm，质软 ，色黑.部分淋巴结密集处，如隆突下或胃左动脉旁淋巴结呈部分融合状.病理学观察，癌细胞表面坏死，冷冻至-50℃以下者，可见冷冻处2/3壁厚的癌组织坏死，核溶解，可见异 物巨细胞吞噬癌细胞的图像.食管壁全层有大量中性粒细胞浸润.淋巴结呈滤泡增生反应.电镜下超微结构也发生了明显的改变，绝大部分癌细胞破损，部分退变明显，细 胞间连接桥粒消失，细胞膜破裂，胞浆减少，大量空泡形成.细胞质内超微结构不清，细胞 器呈碎片状，嵴结构消失，核膜、胞浆破损，染色体聚集.免疫指标测定结果表1.
表1 食管贲门癌冷冻前后各项免疫指标的变化 (n=20)
| 指标 | 正常值 | 冷冻前 | 冷冻后 |
| IgG | 11.3g/L±3.20g/L | 13.50g/L | 12.20g/L |
| IgM | 1.36g/L±0.50g/L | 1.63g/L | 1.46g/L |
| IgA | 1.70g/L±0.57g/L | 216g/L | 2.32g/L |
| C3 | 0.50g/L～1.50g/L | 1.30g/L | 2.00g/L |
| LTT | 50%～70% | 38.0% | 44.8% |
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从上表看出，冷冻前后免疫球蛋白IgG和IgM无明显差异，LTT确有明显的增加，免疫球蛋白I gA和补体C3冷冻治疗后均明显的高于冷冻前的水平.
3 讨论冷冻治疗法是近30年来所兴起的一种新的治疗肿瘤的方法.随着冷冻器械的不断更新和设计 ，冷冻医疗已经从单纯对体表肿物的治疗，进而发展到对体腔内的肿瘤进行治疗.近年来，日本以及东欧一些国家的学者，通过皮肤试验、 玫瑰花瓣试验、补体结合试验以及对局部组织的光镜观察发现冷冻不但能改善机体的一般状 况，而且有调节免疫反应的功能[2].我们通过纤维内镜引导下的食管腔内冷冻治疗原发性食管癌和原发性贲门癌20例，先行食管腔内冷冻，再行手术切除，结果发现了许 多与机体免疫反应增强有关的现象，①癌组织经冷冻治疗后表面肿瘤组织坏死.病理学发现，当冷冻至-50℃以下时，冷冻处2/3壁厚的癌组织坏死，核溶解.电镜下也证实了冷冻处绝大部分癌组织破损，细胞 的超微结构严重破坏，有时整个视野内见不到一个完整癌细胞的图像.癌组织的坏死在生物 体内必然形成一种特异性抗原，该抗原引起机体对坏死的肿瘤组织产生一种持异性抗体， 即冷冻后肿瘤特异性的免疫反应.②在手术切除过程中发现，冷冻后病灶周围所属1-2站的 淋巴结呈广泛性肿大，直径在0.5cm～2.5cm之间.隆突下淋巴结多呈现部分融合状.经病理学证实，淋巴结呈滤泡增生反应，估计与机体的免疫反应增强有关.③手术后病理学 检查发现，冷冻处食管壁的全层有大量的炎性细胞浸润，冷冻距离手术时间间隔短者可见有 大量中性粒细胞浸润，间隔时间长者转化为淋巴结细胞增生明显.有时镜下可见异物巨细胞 吞 噬癌细胞的现象.冷冻可致癌细胞坏死，已被上述资料所证实.冷冻致使癌细胞坏死的机理主 要通过：①温度变化(温度休克)，②细胞内外水晶形成，③细胞内外盐类浓缩和pH改变，④细胞皱缩所引起[3].经冷冻后所产生的坏死病灶可引起机体产生一种对肿瘤组织 引起一定反应的特殊抗体，这就是冷冻免疫.本组在冷冻食管癌、贲门癌后所产生的上述各种现象，如癌细胞坏死、淋巴结的滤泡样增生 、病灶周围大量的炎性细胞浸润和异物巨细胞吞噬癌细胞的现象都充分证实了机体的免疫功能得到了明显的增强，机体的免疫监视功能也得到了进一步 的发挥.中村观察了内痔、外痔和脱肛患者冷冻前后血清免疫球蛋白的变化，发现92.9%(39/42)见 有IgM值含量增高，83.8%(31/37)IgA值，59%(23/39)IgG值均见增高.龟谷等对9例宫颈癌 患者进行了冷冻治疗后，也发现血清球蛋白IgG,IgA,IgM明显增高.与同时期单独抗癌剂组(使用化疗药 物)作为对照发现，所有病例的血清蛋白IgG,IgA,IgM含量均呈急剧下降.本组20例冷冻加手术前后均测定了各项免疫指标，结果表明免疫球蛋白IgG和IgM冷冻前后无明显差异 ，LTT值冷冻及手术治疗后有上升趋势，免疫球蛋白IgA和补体C的检测结果表明高于冷冻前 的水平.通常手术治疗癌肿后，患者的血清癌特异性抗体一度骤降是近代癌肿免疫问题研究出来的一个客观事实.本组20例使用的治疗方法是冷冻加手术，冷冻可提高免疫功能，而手 术又可降低免疫功能，所以本组病例冷冻加手术后再检测免疫指标并未急剧上升是可以理解的.另外本文的免疫检测资料由于病例较少，而且动态观察时间较短，尚不能完全的反映出冷冻加手术免疫增强的真正水平，尚待进一步的追踪观察.
4 参考文献1 刘金刚，刘作斌.低温医学.北京：人民卫生出版社，1993：343-349
2 张忠兵.冷冻治疗对直肠癌患者免疫功能的调节.癌症，1990；9(5)：365
3 郭玉德.实用冷冻疗法.北京：人民卫生出版社，1990：51-57, 百拇医药(杨瑞森 刘奇 张利民 张百江 张兴国)