柳氮磺胺吡啶对大鼠乙酸性溃疡性结肠炎肠组织中氧自由基的影响
1徐州医学院附属医院消化科 江苏省徐州市 221002
2北京医科大学第三医院消化科 北京市 100083
作者简介 朱炳喜，男，1965-06-08生，江苏省江都市人，汉族. 1989年江苏徐州医学院医疗系本科毕业，1996年北京医科大学研究生毕业，主治医师，讲师，主要从事内科消化系统疾病的诊治研究，发表论文4篇
[江苏徐州市淮海西路99号. 电话(0516)5698950-2173].(收稿 1997-04-21)
Effects of sulfphasalazine on oxygen free radicals in experimental colitis
, 百拇医药
ZHU Bing-Xi1, LU Yu-Min2 and YE Si-Mao2
1Department of Gastroenterology, Affiliated Hospital, Xuzhou Medical College, Xuzhou 221002, Jiangsu Province, China
2Department of Gastroenterology, The Third Hospital, Beijing Medical University, Beijing 100083, China
Subject headings sulfphasalazine/pharmacology; colitis, ulcerative/drug therapy; free radicals/metabolism; oxygen/metabolism
, 百拇医药
Abstract
AIM To study the oxygen free radicals (OFR) scavenger property of sulfphasalazine (SASP) in the treatment of acid-induced colitis in rats.
METHODS Experimental colitis in 20 rats was induced by the intrarectal administration of 100ml/L acetic acid. Animals were then divided randomly into 2 groups, one treated with SASP (SASP group) and the other with the equivalent volume of normal saline (NS group) for 7 days, and then were killed and the gut tissues were removed. The inflammatory scores were evaluated and the contents of superoxide dismutase (SOD) and malondialdehyde (MDA) measured.
, http://www.100md.com
RESULTS The content of SOD (U/g) in SASP group was considerably higher than that in NS group (79.98±3.441 vs 63.64±2.455) (P<0.01) and the content of MDA (nmol/g) in SASP group was significantly lower than that in NS group (21.56±2.08 vs 35.24±4.48) (P<0.01). Inflammatory scores in NS group was markedly higher than that in SASP group (16.5±5.19 vs 6.30±1.25) (P<0.01).[JP2]
CONCLUSION SASP is OFR scavenger and the OFR scavenging property may be one of the main mechanism by which SASP improves active inflammation of ulcerative colitis (UC).
, 百拇医药
主题词 柳氮磺胺吡啶/药理学；结肠炎，溃疡性/药物疗法；自由基/代谢；氧/代谢
中国图书资料分类号 R574.62
摘要
目的 探讨柳氮磺胺吡啶(SASP)治疗大鼠乙酸性溃疡性结肠炎(UC)时清除氧自由基(OFR)的特性.
方法 SASP灌胃治疗大鼠乙酸性UC后，检测肠组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量，评价其炎症指数，并与生理盐水(NS)治疗对照组比较.
结果 SASP组和NS组SOD含量(U/g)分别为79.98±3.441和63.64±2.455. SASP组和NS组MDA含量(nmol/g)分别为21.56±2.08、35.24±4.48. NS组和SASP组炎症指数分别为16.5±5.19、6.30±1.25. SASP组SOD含量显著高于NS组(79.98±3.441对63.64±2.455，P<0.01)，SASP组MDA含量明显低于NS组(21.56±2.08对35.24±4.48，P<0.01). NS组炎症指数明显高于SASP组(16.5±5.19对6.30±1.25，P<0.01).
, 百拇医药
结论 SASP为氧自由基清除剂，是治疗溃疡性结肠炎的主要机理之一.
SASP广泛用于治疗UC，但其抗炎机理尚不明确. 近来发现SASP具有清除OFR的特性. 作者用SASP治疗大鼠乙酸性UC后，检测肠组织中SOD、MDA的含量，评价其炎症指数，并且与对照组比较，以探讨SASP清除OFR的特性.
1 材料和方法
1.1 材料 雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠20只，体重305g～485g，全部由中国科学院动物研究所动物室提供，喂以标准饲料. UC模型的复制参照Tannahill等[1]的方法：SD大鼠术前禁食24h，可自由饮水. 试验时行巴比妥钠腹腔麻醉(30mg/kg体重)后，用直径为3mm导管经肛门插入结肠8cm处，注入10%乙酸溶液2ml，准确定时15s后，再用5ml生理盐水冲洗，苏醒后正常饮食.
, http://www.100md.com
1.2 方法 20只雄性SD大鼠按上述方法制备模型后，随机分为NS组10只，SASP组10只，各组间大鼠体重无明显差异. 24h后，SASP组经口灌胃给予SASP 66.7mg/(kg·d)(按人常用剂量的5倍量换算)，NS组则经胃给予NS 2ml/只·次(与SASP等容积). 治疗7d后处死，常规石蜡包埋，切片，HE染色，参考Keshavarzian等[2]标准，评价炎症指数. 两组大鼠处死同时，在距肛门7cm～9cm处取3mm×5mm大小结肠新鲜标本，快速滤纸吸干后，置于液氮中速冻，供检测SOD，MDA. SOD采用亚硝酸盐形成抑制法[3]，测定结果用每克湿重组织单位数(U/g)来表示；MDA采用TBA显色法[4]，结果用每克湿重组织钠摩尔数(nmol/g)表示.
统计学处理 实验数据用均数±标准差(x±s)来表示，两样本均数采用t检验.
, http://www.100md.com
2 结果
SASP组炎症指数(6.30±1.25)明显低于NS组(16.5±5.19，P<0.01)；SASP组SOD含量(U/g)(79.98±3.441)显著高于NS组(63.64±2.455，P<0.01)；SASP组MDA含量(nmol/g)(21.56±2.08)明显低于NS组(35.24±4.48，P<0.01).
3 讨论
Tannahill等[1]认为大鼠乙酸性UC模型与人类活动期UC类似，可以作为UC的OFR代谢模型. 结肠急性炎症时，大量中性粒细胞通过“呼吸爆发”产生过量的OFR，触发细胞膜的多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的链式反应，产生MDA等脂质过氧化物，损伤结肠组织. 因临床上直接检测OFR十分困难，人们通常用MDA的水平来间接反映OFR的多少[5]. 而SOD能清除过量的OFR，对结肠组织起保护作用[6]. 本实验表明，经过SASP治疗后乙酸性UC肠组织中MDA水平比未治疗的NS组明显下降(P<0.01)，而且组织学提示SASP治疗组炎症指数比未治疗的NS组显著降低(P<0.01)，说明SASP能清除OFR，从而减轻结肠炎症程度. 本实验还表明，未治疗的NS组乙酸性UC肠组织中SOD含量明显低于SASP组，说明乙酸性UC肠组织中因重要的内源性抗氧化酶SOD显著减少，结肠组织清除OFR及抗氧化能力大大下降. 而经过SASP治疗后肠组织中SOD含量明显高于NS组(P<0.01)可能与SASP清除OFR，使内源性SOD损耗减少，SOD活性上升有关. SASP用于治疗UC近半个世纪，但其抗炎机理尚不明确，最近国外有学者[6]认为SASP能清除多种OFR，国内尚无这方面的报道. 本文实验结果提示SASP为氧自由基的清除剂，SASP清除OFR的特性可能是其治疗UC的主要机理之一.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 Tannahill CL, Stevenot SA, Campbell-Thompson M, et al. Induction and immunlolcalization of manganese superoxide dismmutase
in acute acetic acid-induced colitis in the rat. Gastroenterology, 1995;109(3):800-811
2 Keshavarzian A, Morgah G, Sedghi S, et al. Role of reactive oxygen metabolites in experimental colitis. Gut,
1990;31(7):786-790
, 百拇医药
3 Oyanagui Y. Reevaluation of assay methods and establishment of kit for superoxide dismutase activity. Annal Biochem,
1984;142(1):290-296
4 Asakawa T. Thiobabituric acid test for detection lipid peroxides. Lipids, 1979;14(4):401-408
5 Sedghi S, Keshavarzian A, Klamut M, et al. Elevated breath ethane levels in active ulcerative colitis: evidence for excessive
lipid peroxidation. Am J Gastroenterol, 1994;89(12):2217-2221
6 Grisham MB. Oxidants and free radicals in inflammatory bowel disease. Lancet, 1994;344(8926):859-861, http://www.100md.com(朱炳喜1 吕愈敏2 叶嗣懋2 )
2北京医科大学第三医院消化科 北京市 100083
作者简介 朱炳喜，男，1965-06-08生，江苏省江都市人，汉族. 1989年江苏徐州医学院医疗系本科毕业，1996年北京医科大学研究生毕业，主治医师，讲师，主要从事内科消化系统疾病的诊治研究，发表论文4篇
[江苏徐州市淮海西路99号. 电话(0516)5698950-2173].(收稿 1997-04-21)
Effects of sulfphasalazine on oxygen free radicals in experimental colitis
, 百拇医药
ZHU Bing-Xi1, LU Yu-Min2 and YE Si-Mao2
1Department of Gastroenterology, Affiliated Hospital, Xuzhou Medical College, Xuzhou 221002, Jiangsu Province, China
2Department of Gastroenterology, The Third Hospital, Beijing Medical University, Beijing 100083, China
Subject headings sulfphasalazine/pharmacology; colitis, ulcerative/drug therapy; free radicals/metabolism; oxygen/metabolism
, 百拇医药
Abstract
AIM To study the oxygen free radicals (OFR) scavenger property of sulfphasalazine (SASP) in the treatment of acid-induced colitis in rats.
METHODS Experimental colitis in 20 rats was induced by the intrarectal administration of 100ml/L acetic acid. Animals were then divided randomly into 2 groups, one treated with SASP (SASP group) and the other with the equivalent volume of normal saline (NS group) for 7 days, and then were killed and the gut tissues were removed. The inflammatory scores were evaluated and the contents of superoxide dismutase (SOD) and malondialdehyde (MDA) measured.
, http://www.100md.com
RESULTS The content of SOD (U/g) in SASP group was considerably higher than that in NS group (79.98±3.441 vs 63.64±2.455) (P<0.01) and the content of MDA (nmol/g) in SASP group was significantly lower than that in NS group (21.56±2.08 vs 35.24±4.48) (P<0.01). Inflammatory scores in NS group was markedly higher than that in SASP group (16.5±5.19 vs 6.30±1.25) (P<0.01).[JP2]
CONCLUSION SASP is OFR scavenger and the OFR scavenging property may be one of the main mechanism by which SASP improves active inflammation of ulcerative colitis (UC).
, 百拇医药
主题词 柳氮磺胺吡啶/药理学；结肠炎，溃疡性/药物疗法；自由基/代谢；氧/代谢
中国图书资料分类号 R574.62
摘要
目的 探讨柳氮磺胺吡啶(SASP)治疗大鼠乙酸性溃疡性结肠炎(UC)时清除氧自由基(OFR)的特性.
方法 SASP灌胃治疗大鼠乙酸性UC后，检测肠组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量，评价其炎症指数，并与生理盐水(NS)治疗对照组比较.
结果 SASP组和NS组SOD含量(U/g)分别为79.98±3.441和63.64±2.455. SASP组和NS组MDA含量(nmol/g)分别为21.56±2.08、35.24±4.48. NS组和SASP组炎症指数分别为16.5±5.19、6.30±1.25. SASP组SOD含量显著高于NS组(79.98±3.441对63.64±2.455，P<0.01)，SASP组MDA含量明显低于NS组(21.56±2.08对35.24±4.48，P<0.01). NS组炎症指数明显高于SASP组(16.5±5.19对6.30±1.25，P<0.01).
, 百拇医药
结论 SASP为氧自由基清除剂，是治疗溃疡性结肠炎的主要机理之一.
SASP广泛用于治疗UC，但其抗炎机理尚不明确. 近来发现SASP具有清除OFR的特性. 作者用SASP治疗大鼠乙酸性UC后，检测肠组织中SOD、MDA的含量，评价其炎症指数，并且与对照组比较，以探讨SASP清除OFR的特性.
1 材料和方法
1.1 材料 雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠20只，体重305g～485g，全部由中国科学院动物研究所动物室提供，喂以标准饲料. UC模型的复制参照Tannahill等[1]的方法：SD大鼠术前禁食24h，可自由饮水. 试验时行巴比妥钠腹腔麻醉(30mg/kg体重)后，用直径为3mm导管经肛门插入结肠8cm处，注入10%乙酸溶液2ml，准确定时15s后，再用5ml生理盐水冲洗，苏醒后正常饮食.
, http://www.100md.com
1.2 方法 20只雄性SD大鼠按上述方法制备模型后，随机分为NS组10只，SASP组10只，各组间大鼠体重无明显差异. 24h后，SASP组经口灌胃给予SASP 66.7mg/(kg·d)(按人常用剂量的5倍量换算)，NS组则经胃给予NS 2ml/只·次(与SASP等容积). 治疗7d后处死，常规石蜡包埋，切片，HE染色，参考Keshavarzian等[2]标准，评价炎症指数. 两组大鼠处死同时，在距肛门7cm～9cm处取3mm×5mm大小结肠新鲜标本，快速滤纸吸干后，置于液氮中速冻，供检测SOD，MDA. SOD采用亚硝酸盐形成抑制法[3]，测定结果用每克湿重组织单位数(U/g)来表示；MDA采用TBA显色法[4]，结果用每克湿重组织钠摩尔数(nmol/g)表示.
统计学处理 实验数据用均数±标准差(x±s)来表示，两样本均数采用t检验.
, http://www.100md.com
2 结果
SASP组炎症指数(6.30±1.25)明显低于NS组(16.5±5.19，P<0.01)；SASP组SOD含量(U/g)(79.98±3.441)显著高于NS组(63.64±2.455，P<0.01)；SASP组MDA含量(nmol/g)(21.56±2.08)明显低于NS组(35.24±4.48，P<0.01).
3 讨论
Tannahill等[1]认为大鼠乙酸性UC模型与人类活动期UC类似，可以作为UC的OFR代谢模型. 结肠急性炎症时，大量中性粒细胞通过“呼吸爆发”产生过量的OFR，触发细胞膜的多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的链式反应，产生MDA等脂质过氧化物，损伤结肠组织. 因临床上直接检测OFR十分困难，人们通常用MDA的水平来间接反映OFR的多少[5]. 而SOD能清除过量的OFR，对结肠组织起保护作用[6]. 本实验表明，经过SASP治疗后乙酸性UC肠组织中MDA水平比未治疗的NS组明显下降(P<0.01)，而且组织学提示SASP治疗组炎症指数比未治疗的NS组显著降低(P<0.01)，说明SASP能清除OFR，从而减轻结肠炎症程度. 本实验还表明，未治疗的NS组乙酸性UC肠组织中SOD含量明显低于SASP组，说明乙酸性UC肠组织中因重要的内源性抗氧化酶SOD显著减少，结肠组织清除OFR及抗氧化能力大大下降. 而经过SASP治疗后肠组织中SOD含量明显高于NS组(P<0.01)可能与SASP清除OFR，使内源性SOD损耗减少，SOD活性上升有关. SASP用于治疗UC近半个世纪，但其抗炎机理尚不明确，最近国外有学者[6]认为SASP能清除多种OFR，国内尚无这方面的报道. 本文实验结果提示SASP为氧自由基的清除剂，SASP清除OFR的特性可能是其治疗UC的主要机理之一.
, http://www.100md.com
4 参考文献
1 Tannahill CL, Stevenot SA, Campbell-Thompson M, et al. Induction and immunlolcalization of manganese superoxide dismmutase
in acute acetic acid-induced colitis in the rat. Gastroenterology, 1995;109(3):800-811
2 Keshavarzian A, Morgah G, Sedghi S, et al. Role of reactive oxygen metabolites in experimental colitis. Gut,
1990;31(7):786-790
, 百拇医药
3 Oyanagui Y. Reevaluation of assay methods and establishment of kit for superoxide dismutase activity. Annal Biochem,
1984;142(1):290-296
4 Asakawa T. Thiobabituric acid test for detection lipid peroxides. Lipids, 1979;14(4):401-408
5 Sedghi S, Keshavarzian A, Klamut M, et al. Elevated breath ethane levels in active ulcerative colitis: evidence for excessive
lipid peroxidation. Am J Gastroenterol, 1994;89(12):2217-2221
6 Grisham MB. Oxidants and free radicals in inflammatory bowel disease. Lancet, 1994;344(8926):859-861, http://www.100md.com(朱炳喜1 吕愈敏2 叶嗣懋2 )