人肝癌细胞株HCV体外复制模型的建立
第三军医大学西南医院全军传染病专科中心 重庆市 400038
*国家自然科学基金资助课题，No.39670672
项目负责人 宋志强第三军医大学西南医院全军传染病专科中心 重庆市 400038
收稿日期 1998-11-26
Subject headings hepatitis C virus; viral replication; liver neoplasms; cell line
主题词 丙型肝炎病毒；病毒复制；肝肿瘤；细胞株
0 引言
缺乏适宜丙型肝炎病毒(HCV)复制模型的窘况已极大地阻碍了对HCV系统和深入的研究. 只有建立方便易得、价格低廉、对HCV易感的细胞模型，才能更好地研究HCV. 本研究用自然存在于慢性丙型肝炎患者血清中的HCV直接感染培养中的人肝癌细胞7721，旨在建立接近体内自然感染状态并能稳定支持HCV体外长期复制的感染细胞模型.
1 方法
用慢性丙型肝炎患者的血清与人肝癌细胞系7721共同孵育8h后，以1640液彻底洗去感染血清，定期收集培养上清和细胞，以反转录-聚合酶链反应、免疫组化、原位杂交分别对细胞和(或)培养上清中的HCV正、负链RNA、HCV NS3抗原在感染细胞内的表达及HCV负链RNA在感染细胞内的定位做检测.
2 结果
从感染血清和细胞共同孵育后的d2起，即可从细胞内和培养上清中间断地检测出HCV正、负RNA，一直到感染后d68，即使其间细胞传代4次；免疫组化显示，表达HCV NS3抗原的7721细胞多呈散在或点状分布，阳性物质多位于细胞浆，少数细胞核亦有表达；原位杂交结果显示杂交阳性细胞多呈点状分布，HCV负链RNA多位于细胞浆中.
3 讨论
人肝癌细胞株7721不但对HCV易感，而且可以稳定地支持HCV的长期复制，此HCV感染、复制模型可以用于HCV复制的研究、抗病毒药物的评价及保护性抗体/疫苗的初步筛选., 百拇医药(宋志强 郝 飞 王宇明 马巧玉)
*国家自然科学基金资助课题，No.39670672
项目负责人 宋志强第三军医大学西南医院全军传染病专科中心 重庆市 400038
收稿日期 1998-11-26
Subject headings hepatitis C virus; viral replication; liver neoplasms; cell line
主题词 丙型肝炎病毒；病毒复制；肝肿瘤；细胞株
0 引言
缺乏适宜丙型肝炎病毒(HCV)复制模型的窘况已极大地阻碍了对HCV系统和深入的研究. 只有建立方便易得、价格低廉、对HCV易感的细胞模型，才能更好地研究HCV. 本研究用自然存在于慢性丙型肝炎患者血清中的HCV直接感染培养中的人肝癌细胞7721，旨在建立接近体内自然感染状态并能稳定支持HCV体外长期复制的感染细胞模型.
1 方法
用慢性丙型肝炎患者的血清与人肝癌细胞系7721共同孵育8h后，以1640液彻底洗去感染血清，定期收集培养上清和细胞，以反转录-聚合酶链反应、免疫组化、原位杂交分别对细胞和(或)培养上清中的HCV正、负链RNA、HCV NS3抗原在感染细胞内的表达及HCV负链RNA在感染细胞内的定位做检测.
2 结果
从感染血清和细胞共同孵育后的d2起，即可从细胞内和培养上清中间断地检测出HCV正、负RNA，一直到感染后d68，即使其间细胞传代4次；免疫组化显示，表达HCV NS3抗原的7721细胞多呈散在或点状分布，阳性物质多位于细胞浆，少数细胞核亦有表达；原位杂交结果显示杂交阳性细胞多呈点状分布，HCV负链RNA多位于细胞浆中.
3 讨论
人肝癌细胞株7721不但对HCV易感，而且可以稳定地支持HCV的长期复制，此HCV感染、复制模型可以用于HCV复制的研究、抗病毒药物的评价及保护性抗体/疫苗的初步筛选., 百拇医药(宋志强 郝 飞 王宇明 马巧玉)