慢性HBV感染时影响肝细胞Fas表达的因素
1上海第二医科大学附属新华医院 上海市 200092
2山东省立医院 山东省济南市 250000
项目负责人 魏红山上海第二医科大学附属新华医院 上海市 200092
收稿日期 1999-01-09 接收日期 1999-03-27
Subject headings Fas antigen; hepatitis B virus; Apoptosis； DNA viral
主题词 Fas抗原；乙型肝炎病毒；细胞凋亡；DNA病毒
, 百拇医药
继往的研究显示Fas分子是介导肝细胞凋亡与损伤的关键分子，肝细胞Fas分子的表达强度与其组织学损伤程度相一致，因此，调节Fas分子的表达必然有助于肝病的治疗，但是哪些因素影响肝细胞Fas分子的表达至今仍不明确，本研究旨在阐述慢性HBV感染时影响肝细胞Fas表达的因素.
1 材料和方法
1.1 材料 标本取自慢性乙肝患者肝穿剌组织标本，其中男49例，女32例，年龄19岁～66岁，平均44.2岁. 诊断标准采用1990年5月上海全国病毒性肝炎会议标准. 组织学类型包括：慢性迁延性肝炎(CPH)62例，慢性活动性肝炎(CAH)19例. 肝穿剌组织标本采用100mL/L福尔马林固定，石蜡包埋备检.
1.2 方法 肝细胞Fas分子和HLA-DR的表达采用免疫组化LSAB法，细胞凋亡采用TUNEL法，操作按试剂盒说明书进行，血清HBV DNA采用PCR法测定. Fas，HLA-DR阳性为细胞浆(膜)染成棕红色(DAB显色)，凋亡指数的计算方法为计数100个～300个细胞取其平均值.
, 百拇医药
2 结果①Fas分子在肝组织中的表达与肝组织的炎症程度相一致，在CAH中的表达明显高于CPH(χ2=7.80，P<0.005). ②Fas分子的表达与HBV复制状态相关，HBV DNA阳性(主要见于间质细胞)的51例患者中46例Fas表达阳性，而HBV DNA阴性的30例患者中仅7例Fas表达阳性
(χ2=34.44，P<0.001). ③尽管HLA-DR阳性的47例患者中HBV DNA阳性31例(66.0%)，高于HLA-DR阴性的4例患者中的HBV DNA阳性率(58.8%)但未显示统计学差异(χ2=0.43，P>0.05). ④HLA-DR阳性的47例患者中Fas阳性39例，明显高于HLA-DR患者中的阳性率(χ2＝11.12，P<0.001). ⑤Fas分子在肝细胞上的表达与肝细胞凋亡指数呈正相关，CAH明显高于CPH(12.4±2.0 vs 7.2±1.8，t=5.27 P<0.01).
, 百拇医药
3 讨论
从目前的研究来看，HBV DNA的阳性程度与肝细胞Fas分子的表达有关，且Fas分子的表达强度与肝组织学变化相一致，这提示HBV复制可以上调肝细胞Fas分子的表达. Sieg et al[1]最近发现某些病毒感染可以上调T细胞表面Fas分子的表达，并促进表达Fas的T细胞凋亡. 因此，可以认为，HBV复制上调肝细胞Fas分子的表达的意义可能在于促进病毒感染肝细胞的清除，而不至于诱发过度的炎症.
Yoshino et al[2]，发现同时给予HLA Ⅱ类分子单抗比单纯给予Fas单抗介导的前B细胞凋亡平均增加1.5倍. 从我们的研究结果来看，肝组织HLA-DR的表达与Fas分子的表达呈正相关，提示非实质细胞HLA-DR的表达可以上调肝实质细胞Fas分子的表达，由于Fas分子的表达强度与肝细胞凋亡指数呈正相关，因此可以认为上调Fas表达，加速病毒感染细胞的凋亡，可能是HLA-DR保护性机制的重要因素. 本研究中另外一个值得注意的现象是，尽管Fas分子的表达与肝细胞凋亡指数呈正相关，与肝组织炎症程度相一致，但表达Fas的绝大部分肝细胞并未显示凋亡现象，这提示在慢性HBV感染时存在着严重的凋亡信号传递抑制，其分子生物学机制值得进一步探讨.
, http://www.100md.com
总之，我们认为，在慢性HBV感染时，肝细胞Fas分子的表达受多种因素的影响，其中病毒复制可能是最基本的因素. HBV在肝实质细胞内复制以及HLA-DR在间质细胞上的表达均可上调肝实质细胞Fas抗原的表达.
4 参考文献
1 Sieg S, Huang G, Kaplan D. Viral regulation of CD95 expression and apoptosis in T lymphocytes. J Immunol 1997；159：1192
2 Yoshino T, Cao I, Nisiuchi R, Matsuo Y, Yamadori I, Kondo E, Teramoto N, Hayashi K, Takahashi K, Kamikawaji N. Ligation of
HLA-DR class-Ⅱmolecles promotes sensitivity to CD95(Fas/apo-1)mediated apoptosis. Eur Immunol 1995;265:528, 百拇医药(魏红山1 陆伟君2 李定国1 陆汉明1 王延军2 劳 平2)
2山东省立医院 山东省济南市 250000
项目负责人 魏红山上海第二医科大学附属新华医院 上海市 200092
收稿日期 1999-01-09 接收日期 1999-03-27
Subject headings Fas antigen; hepatitis B virus; Apoptosis； DNA viral
主题词 Fas抗原；乙型肝炎病毒；细胞凋亡；DNA病毒
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继往的研究显示Fas分子是介导肝细胞凋亡与损伤的关键分子，肝细胞Fas分子的表达强度与其组织学损伤程度相一致，因此，调节Fas分子的表达必然有助于肝病的治疗，但是哪些因素影响肝细胞Fas分子的表达至今仍不明确，本研究旨在阐述慢性HBV感染时影响肝细胞Fas表达的因素.
1 材料和方法
1.1 材料 标本取自慢性乙肝患者肝穿剌组织标本，其中男49例，女32例，年龄19岁～66岁，平均44.2岁. 诊断标准采用1990年5月上海全国病毒性肝炎会议标准. 组织学类型包括：慢性迁延性肝炎(CPH)62例，慢性活动性肝炎(CAH)19例. 肝穿剌组织标本采用100mL/L福尔马林固定，石蜡包埋备检.
1.2 方法 肝细胞Fas分子和HLA-DR的表达采用免疫组化LSAB法，细胞凋亡采用TUNEL法，操作按试剂盒说明书进行，血清HBV DNA采用PCR法测定. Fas，HLA-DR阳性为细胞浆(膜)染成棕红色(DAB显色)，凋亡指数的计算方法为计数100个～300个细胞取其平均值.
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2 结果①Fas分子在肝组织中的表达与肝组织的炎症程度相一致，在CAH中的表达明显高于CPH(χ2=7.80，P<0.005). ②Fas分子的表达与HBV复制状态相关，HBV DNA阳性(主要见于间质细胞)的51例患者中46例Fas表达阳性，而HBV DNA阴性的30例患者中仅7例Fas表达阳性
(χ2=34.44，P<0.001). ③尽管HLA-DR阳性的47例患者中HBV DNA阳性31例(66.0%)，高于HLA-DR阴性的4例患者中的HBV DNA阳性率(58.8%)但未显示统计学差异(χ2=0.43，P>0.05). ④HLA-DR阳性的47例患者中Fas阳性39例，明显高于HLA-DR患者中的阳性率(χ2＝11.12，P<0.001). ⑤Fas分子在肝细胞上的表达与肝细胞凋亡指数呈正相关，CAH明显高于CPH(12.4±2.0 vs 7.2±1.8，t=5.27 P<0.01).
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3 讨论
从目前的研究来看，HBV DNA的阳性程度与肝细胞Fas分子的表达有关，且Fas分子的表达强度与肝组织学变化相一致，这提示HBV复制可以上调肝细胞Fas分子的表达. Sieg et al[1]最近发现某些病毒感染可以上调T细胞表面Fas分子的表达，并促进表达Fas的T细胞凋亡. 因此，可以认为，HBV复制上调肝细胞Fas分子的表达的意义可能在于促进病毒感染肝细胞的清除，而不至于诱发过度的炎症.
Yoshino et al[2]，发现同时给予HLA Ⅱ类分子单抗比单纯给予Fas单抗介导的前B细胞凋亡平均增加1.5倍. 从我们的研究结果来看，肝组织HLA-DR的表达与Fas分子的表达呈正相关，提示非实质细胞HLA-DR的表达可以上调肝实质细胞Fas分子的表达，由于Fas分子的表达强度与肝细胞凋亡指数呈正相关，因此可以认为上调Fas表达，加速病毒感染细胞的凋亡，可能是HLA-DR保护性机制的重要因素. 本研究中另外一个值得注意的现象是，尽管Fas分子的表达与肝细胞凋亡指数呈正相关，与肝组织炎症程度相一致，但表达Fas的绝大部分肝细胞并未显示凋亡现象，这提示在慢性HBV感染时存在着严重的凋亡信号传递抑制，其分子生物学机制值得进一步探讨.
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总之，我们认为，在慢性HBV感染时，肝细胞Fas分子的表达受多种因素的影响，其中病毒复制可能是最基本的因素. HBV在肝实质细胞内复制以及HLA-DR在间质细胞上的表达均可上调肝实质细胞Fas抗原的表达.
4 参考文献
1 Sieg S, Huang G, Kaplan D. Viral regulation of CD95 expression and apoptosis in T lymphocytes. J Immunol 1997；159：1192
2 Yoshino T, Cao I, Nisiuchi R, Matsuo Y, Yamadori I, Kondo E, Teramoto N, Hayashi K, Takahashi K, Kamikawaji N. Ligation of
HLA-DR class-Ⅱmolecles promotes sensitivity to CD95(Fas/apo-1)mediated apoptosis. Eur Immunol 1995;265:528, 百拇医药(魏红山1 陆伟君2 李定国1 陆汉明1 王延军2 劳 平2)