Monohaem诊断粪潜血的价值
首都医科大学附属同仁医院消化内科 北京市 100730
项目负责人 王虹首都医科大学附属同仁医院消化内科 北京市 100730
收稿日期 1999-10-25 接收日期 1999-12-02
Subject headings gastrointestinal hemorrhage/diagnosis; Monohaem; colorectal neoplasm
主题词 胃肠出血/诊断；矛诺海目；结肠肿瘤
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 1998-05/07，以腹痛、腹泻、粘便和(或)血便、腹部包块、排便不畅等主诉到我院就诊的100例受检者进行结肠镜检查的同时，应用Monohaem进行粪潜血检测；男63例，女37例，年龄16岁～76岁. 从观察组中随机抽取48例，用同一份标本，进行酶联免疫法进行粪潜血检测；男29例，女19例，年龄20岁～67岁. 所有受检者排除了鼻出血、牙齿出血、月经出血、痔出血而造成的便潜血阳性的可能性.
1.2 方法 使用免疫发色粪潜血检测试纸由日本化学制药株式会社赠送. 检测标准以(+)为阳性，(-)为阴性. 阳性反应中，又根据显色深浅的不同，分为弱阳性(+)，阳性(++)，强阳性(+++). 原理：试纸上存在有单克隆抗体，能与粪中的人血红蛋白发生特异性抗原抗体结合反应. 复合物中的过氧化物酶能使发色了峄生呈色反应. 方法：将搅匀的标本，取适当量(100mg左右)涂抹到试纸的指定部位，在室温下放置30min～40min，使其反应；然后将试纸洗净、干燥；在充分干燥的试纸的十字部，加发色剂一滴(约15μL)；分别于发色剂加入后0.5，4，30min及24h观察反应结果. 48例对照组使用的是一种国产的三明治式的酶联免疫性粪潜血检查法. 它是利用特异性抗人血红蛋白抗体，通过扩散作用，与经过特殊试剂处理后的标本中的人血红蛋白发生某种反应，观察有无紫红色的色带形成，以判断结果. 如果标本中无人血红蛋白，反应区中就不会有色带出现，即粪潜血阴性；反之，为阳性. 以结肠镜(或内镜)和(或)病理学作为金标准，对便潜血检测的真实性评价(敏感性、阳性反应适中度).
, 百拇医药
统计学处理 采用国际通用的计算机统计软件进行统计学分析；应用卡方检验.
2 结果
观察组100例受检者中，内镜和病理检查正常54例；有胃肠病变46例，其中阳性反应30例，敏感性为65%(30/46)，阳性反应适中度100%(30/30). 对照组共48例，正常20例，有胃肠病变28例，阳性反应19例，敏感性为67%(19/28)，阳性反应适中度100%(19/19). 结肠镜或内镜下诊断及两组粪潜血(简称OB)检查在各种疾病中的反应情况见表1.
观察组分别在发色剂加入后0.5，4，30min，24h观察反应结果. 1例鲜血便标本在发色剂加入0.5min后结果由阳性转为阴性；3例在30min后阳性程度减弱；9例24h后阳性程度减弱；其余均在4min内反应结束并在相当一段时间内结果稳定. 应用卡方检验发现，观察组总体的阳性率与对照组无明显差异(P>0.05). 对照组的4例与相应的48例观察组的阳性率无明显差异(P>0.05). 说明免疫发色法与目前国内较多采用的酶联免疫法一样，在诊断消化道疾病(主要是出血性疾病方面)有着较高的诊断价值.
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表1 受检者100例内镜下诊断及粪潜血检查情况
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3 讨论
过去，临床使用的化学性粪潜血检查法易受食物甚至用药等因素的影响，假阳性率高，敏感性差. 近年来国内外开发使用了多种免疫性粪潜血检查法，主要分3类：①免疫凝集法，能将每克标本中，含量在0.1mg以下的Hb检测出来，具有检测方法简单、敏感性强、反应时间短、廉价等特点，但易发生假阳性；②酶联免疫法，同样能检测出含量在0.1mg/g标本以下的Hb，可大量处理标本，但易出现假阴性反应；③免疫发色法，能检测出每克标本中，含量在0.25mg以上的Hb，操作简单、廉价，但敏感性较前两者略低. 由此可见所采用的方法不同其测定原理、方法、取便量及敏感性等也不同[1，2].
我们在对照组所采用的酶联免疫法具有敏感性高等特点，但因所需标本量少，对于粪中混血不均匀者易漏诊. 此外，试剂在粪中血红蛋白含量过高的情况下(如鲜血便或粘液血便)，反应易受到抑制而造成假阴性的现象已经引起人们的重视，这是造成对肠癌的敏感性略低的重要原因. 一般认为：上消化道出血时，血红蛋白受到胃酸及胃蛋白酶的作用，抗原性会发生改变，影响反应结果. 本组对3例上消化道出血的检测都得到了满意的结果，而对照组有欠缺；但例数少，尚不能完全说明问题. 关于变性血红蛋白对反应影响的原因目前尚不十分清楚. 一般认为，粪潜血检测的阳性率受息肉生长部位及大小的影响. 观察组的息肉的敏感性仅20%，这与国外的有关报道接近. 从观察组检测结果看，阳性反应与息肉的位置及性质关系不明显，而与息肉的大小有一定的关系，这与息肉增大、受刺激、糜烂出血的机会增加有关. 另外，息肉不出血或间断出血是阳性率低的重要原因：考虑到息肉出血的间断性，一般认为至少两次的粪潜血检查是合理的[3].
, 百拇医药
观察组所采用的检测方法反应过程迅速，判定结果的时间应严格掌握，一般在发色剂加入后4min内完成，遇鲜血便或粘液血便时，应观察10，30s的反应，否则会造成假阴性. 观察组标本均在采集后的8h内完成检测. 因为长时间放置，尤其高温、高湿的环境下，粪便中的血红蛋白，易受蛋白水解酶及细菌的作用而变性，会影响反应结果. 在洗净过程中，试纸有被污染的可能，应该注意.
我们的观察结果证实，免疫发色粪潜血检查法，既具有免疫反应的特异性，又有化学反应的迅速可视性. 它兼有使用单可隆抗体，不需要限制饮食，敏感性较高，有较好的阳性反应适中度，结果易于观察、操作简单等特点，是一种有价值的大肠疾病诊断方法，并且已经被证实在大肠癌及癌前病变等出血性疾病的人群普查中也是有重要的意义[4].
4 参考文献
1 多田正大. 免疫便潜血检查. 胃と肠，1994；29(增刊)：5-11
2 相马悌，吉田丰. 免疫便潜血检查-检查法评价法一. 日内志，1994；83：1288-1292
3 吉田丰. 人Hb特异性粪潜血. 实验药理と治疗，1986；14(增刊)：11-14
4 河合 忠，川井启市，多田正大，石井 胜，度边能行. 免疫的便潜血反应试药[モノへム]の临床的检讨. 大肠肛门志，1987；40：308-313, http://www.100md.com(王 虹 谢新纪 毕春山 钱冬梅 邸 霞)
项目负责人 王虹首都医科大学附属同仁医院消化内科 北京市 100730
收稿日期 1999-10-25 接收日期 1999-12-02
Subject headings gastrointestinal hemorrhage/diagnosis; Monohaem; colorectal neoplasm
主题词 胃肠出血/诊断；矛诺海目；结肠肿瘤
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 1998-05/07，以腹痛、腹泻、粘便和(或)血便、腹部包块、排便不畅等主诉到我院就诊的100例受检者进行结肠镜检查的同时，应用Monohaem进行粪潜血检测；男63例，女37例，年龄16岁～76岁. 从观察组中随机抽取48例，用同一份标本，进行酶联免疫法进行粪潜血检测；男29例，女19例，年龄20岁～67岁. 所有受检者排除了鼻出血、牙齿出血、月经出血、痔出血而造成的便潜血阳性的可能性.
1.2 方法 使用免疫发色粪潜血检测试纸由日本化学制药株式会社赠送. 检测标准以(+)为阳性，(-)为阴性. 阳性反应中，又根据显色深浅的不同，分为弱阳性(+)，阳性(++)，强阳性(+++). 原理：试纸上存在有单克隆抗体，能与粪中的人血红蛋白发生特异性抗原抗体结合反应. 复合物中的过氧化物酶能使发色了峄生呈色反应. 方法：将搅匀的标本，取适当量(100mg左右)涂抹到试纸的指定部位，在室温下放置30min～40min，使其反应；然后将试纸洗净、干燥；在充分干燥的试纸的十字部，加发色剂一滴(约15μL)；分别于发色剂加入后0.5，4，30min及24h观察反应结果. 48例对照组使用的是一种国产的三明治式的酶联免疫性粪潜血检查法. 它是利用特异性抗人血红蛋白抗体，通过扩散作用，与经过特殊试剂处理后的标本中的人血红蛋白发生某种反应，观察有无紫红色的色带形成，以判断结果. 如果标本中无人血红蛋白，反应区中就不会有色带出现，即粪潜血阴性；反之，为阳性. 以结肠镜(或内镜)和(或)病理学作为金标准，对便潜血检测的真实性评价(敏感性、阳性反应适中度).
, 百拇医药
统计学处理 采用国际通用的计算机统计软件进行统计学分析；应用卡方检验.
2 结果
观察组100例受检者中，内镜和病理检查正常54例；有胃肠病变46例，其中阳性反应30例，敏感性为65%(30/46)，阳性反应适中度100%(30/30). 对照组共48例，正常20例，有胃肠病变28例，阳性反应19例，敏感性为67%(19/28)，阳性反应适中度100%(19/19). 结肠镜或内镜下诊断及两组粪潜血(简称OB)检查在各种疾病中的反应情况见表1.
观察组分别在发色剂加入后0.5，4，30min，24h观察反应结果. 1例鲜血便标本在发色剂加入0.5min后结果由阳性转为阴性；3例在30min后阳性程度减弱；9例24h后阳性程度减弱；其余均在4min内反应结束并在相当一段时间内结果稳定. 应用卡方检验发现，观察组总体的阳性率与对照组无明显差异(P>0.05). 对照组的4例与相应的48例观察组的阳性率无明显差异(P>0.05). 说明免疫发色法与目前国内较多采用的酶联免疫法一样，在诊断消化道疾病(主要是出血性疾病方面)有着较高的诊断价值.
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表1 受检者100例内镜下诊断及粪潜血检查情况
| 分组 | 正常 | 肠息肉 | 大肠癌 | UC | 出血性肠炎 | 放射性肠炎 | 感染性肠炎 | DU | GU |
| 观察组 | 54 | 20 | 9 | 6 | 2 | 2 | 4 | 2 | 1 |
| OB(+) | 0 | 4 | 9 | 6 | 2 | 2 | 4 | 2 | 1 |
| 对照组 | 20 | 6 | 9 | 6 | 0 | 2 | 4 | 1 | 0 |
| OB(+) | 0 | 0 | 9 | 6 | 0 | 1 | 4 | 0 | 0 |
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3 讨论
过去，临床使用的化学性粪潜血检查法易受食物甚至用药等因素的影响，假阳性率高，敏感性差. 近年来国内外开发使用了多种免疫性粪潜血检查法，主要分3类：①免疫凝集法，能将每克标本中，含量在0.1mg以下的Hb检测出来，具有检测方法简单、敏感性强、反应时间短、廉价等特点，但易发生假阳性；②酶联免疫法，同样能检测出含量在0.1mg/g标本以下的Hb，可大量处理标本，但易出现假阴性反应；③免疫发色法，能检测出每克标本中，含量在0.25mg以上的Hb，操作简单、廉价，但敏感性较前两者略低. 由此可见所采用的方法不同其测定原理、方法、取便量及敏感性等也不同[1，2].
我们在对照组所采用的酶联免疫法具有敏感性高等特点，但因所需标本量少，对于粪中混血不均匀者易漏诊. 此外，试剂在粪中血红蛋白含量过高的情况下(如鲜血便或粘液血便)，反应易受到抑制而造成假阴性的现象已经引起人们的重视，这是造成对肠癌的敏感性略低的重要原因. 一般认为：上消化道出血时，血红蛋白受到胃酸及胃蛋白酶的作用，抗原性会发生改变，影响反应结果. 本组对3例上消化道出血的检测都得到了满意的结果，而对照组有欠缺；但例数少，尚不能完全说明问题. 关于变性血红蛋白对反应影响的原因目前尚不十分清楚. 一般认为，粪潜血检测的阳性率受息肉生长部位及大小的影响. 观察组的息肉的敏感性仅20%，这与国外的有关报道接近. 从观察组检测结果看，阳性反应与息肉的位置及性质关系不明显，而与息肉的大小有一定的关系，这与息肉增大、受刺激、糜烂出血的机会增加有关. 另外，息肉不出血或间断出血是阳性率低的重要原因：考虑到息肉出血的间断性，一般认为至少两次的粪潜血检查是合理的[3].
, 百拇医药
观察组所采用的检测方法反应过程迅速，判定结果的时间应严格掌握，一般在发色剂加入后4min内完成，遇鲜血便或粘液血便时，应观察10，30s的反应，否则会造成假阴性. 观察组标本均在采集后的8h内完成检测. 因为长时间放置，尤其高温、高湿的环境下，粪便中的血红蛋白，易受蛋白水解酶及细菌的作用而变性，会影响反应结果. 在洗净过程中，试纸有被污染的可能，应该注意.
我们的观察结果证实，免疫发色粪潜血检查法，既具有免疫反应的特异性，又有化学反应的迅速可视性. 它兼有使用单可隆抗体，不需要限制饮食，敏感性较高，有较好的阳性反应适中度，结果易于观察、操作简单等特点，是一种有价值的大肠疾病诊断方法，并且已经被证实在大肠癌及癌前病变等出血性疾病的人群普查中也是有重要的意义[4].
4 参考文献
1 多田正大. 免疫便潜血检查. 胃と肠，1994；29(增刊)：5-11
2 相马悌，吉田丰. 免疫便潜血检查-检查法评价法一. 日内志，1994；83：1288-1292
3 吉田丰. 人Hb特异性粪潜血. 实验药理と治疗，1986；14(增刊)：11-14
4 河合 忠，川井启市，多田正大，石井 胜，度边能行. 免疫的便潜血反应试药[モノへム]の临床的检讨. 大肠肛门志，1987；40：308-313, http://www.100md.com(王 虹 谢新纪 毕春山 钱冬梅 邸 霞)