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编号:10618336
成人虹膜色素上皮细胞的培养
http://www.100md.com 《中华医学实践杂志》 2004年第7期
成人虹膜,成人,虹膜色素上皮细胞,体外,分离,培养
     【摘要】 目的 进一步地研究IPE的功能,及其在眼科疾病中发挥的作用,为将来的人自体色素上皮细胞移植奠定基础。方法 采用酶辅助的显微分离法对15只成人眼进行IPE的原代和传代培养,免疫组化鉴定细胞,并评价其部分生物学特性。结果 培养的成功率达85%,原代培养需10~20天,而传代培养需10~14天,分裂时间为5~11天,总分裂次数为6~8代。免疫组化显示,培养获得的IPE细胞的细胞角蛋白(AE1/AE3)和S-100抗原染色均为阳性,未见阴性染色细胞。结论 采用酶辅助的显微分离法培养的IPE细胞体系是一个高效纯化的细胞体系,可用于进一步地研究IPE的功能及其在眼科疾病中发挥的作用,以及将来的人自体色素上皮细胞移植。

    关键词 成人 虹膜色素上皮细胞 体外 分离 培养

    视网膜色素上皮细胞(RPE)的功能异常是许多视网膜疾病的病因之一,因此人们力图通过RPE的移植来治疗这些疾病。自从Gouras [1] 等首次报道将体外培养的人类RPE细胞成功地移植于猴的玻璃膜上之后,对同种异体RPE细胞的移植便广泛地开展起来。然而,虽然视网膜下腔被认为是“免疫特赦区”,但研究表明其并不能完全地逃脱免疫排斥反应 [2~4] 。因此,人们又把目光投向了自体色素上皮细胞的移植。

    虹膜色素上皮细胞(IPE)与RPE在胚胎起源上具有同源性,在解剖上具有连续性,如果IPE具有相同或者相似的功能,那么就可以用IPE代替RPE来进行视网膜细胞移植。然而,虽然RPE的体外培养已经有20多年的历史,但是直到Hu等 [5] 在90年代初首次成功地对IPE成功地进行了分离和体外纯化培养,人们才对IPE的功能和IPE在一些眼科疾病中的作用 [6]有所认识。为了进一步地研究IPE的功能,及其在眼科疾病中的作用,为将来的人自体色素上皮细胞移植奠定细胞培养基础,我们进行了成人IPE细胞原代及传代培养的实验技术研究,现将结果报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 成人IPE细胞的分离和原代培养 成人眼球由北京同仁医院眼库提供 ......

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