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编号:10618826
小鼠趋化素样因子超家族成员1cDNA的克隆化和鉴定
http://www.100md.com 《中华医学研究杂志》 2004年第9期
2方法,3结果,4讨论,参考文献
     【摘要】 目的 为了研究人趋化素样因子超家族成员1(CKLFSF1)的基因进化,并为其开展动物实验研究提供基础,本文进行了小鼠趋化素样因子超家族成员1(Cklfsf1)cDNA的克隆化。方法 利用生物信息学、PCR、DNA测序等方法克隆Cklfsf1,利用RT-PCR、Northern Blot和激光显微切割(LCM)等手段研究Cklfsf1的正常组织表达谱、睾丸组织不同细胞表达谱。结果 成功地克隆了Cklfsf1编码区序列,并鉴定了3个变异体,均在GenBank进行了登录,分别命名为:Cklfsf1 — v1,v2,v3。Cklfsf1 — v1、v2、v3与CKLFSF1 — v17在氨基酸水平的一致性根据BlastP程序分别为16/35、没有显著相似性、58/145。Northern Blot显示Cklfsf1在睾丸组织高表达,在其它组织检测不到阳性信号。激光显微切割(LCM)RT-PCR结果显示Cklfsf1表达于睾丸组织的初级和次级精母细胞。结论 小鼠Cklfsf1与人CKLFSF1在序列、结构特征、染色体定位、表达谱等方面均有相似性,表明人类CKLFSF1基因在进化上至少可以上溯到小鼠,可以利用小鼠模型研究CKLFSF1的功能。

    Cheng Shanhong,Wang Lu

    Beijing University,Beijing100083.

    【Abstract】 Objective To investigate the gene evolution of human CKLFSF1and provide a basis for the aniˉmal experimental research of it,this article conducted the experiment of cloning of mouse Cklfsf1cDNA.Methods Clone Cklfsf1using bioinformatics tools,PCR and DNA sequencing etc,and analyze the expression pattern of Cklfsf1in normal tissues and specific cells of testis of mouse using RT-PCR,Northern blot and LCM.Results Successfully cloned the coding sequence of Cklfsf1and identified three alternative spliced isoforms the sequences of which were deˉposited in GenBank and were named Cklfsf1 — v1 ......

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