人IL-18结合蛋白A在CHO细胞中表达的研究

http://www.100md.com 黄丰 万永玲 吴达龙 吴德政

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     黄丰；万永玲；吴达龙；吴德政；袁志宏；李克勤 军事医学科学院附属307医院临床药理室；军事医学科学院附属307医院临床药理室；军事医学科学院肿瘤分子生物学实验室 北京100039 细胞与分子免疫学杂志 2002 3

    关键词：人IL-18结合蛋白A；基因表达；CHO细胞

    目的 克隆人IL 18结合蛋白A (hIL 18BPa)的cDNA ,构建真核表达载体及其在CHO细胞中的表达。方法采用RT PCR ,自人白血病血细胞株Jurkat中获得hIL 18BPa的cDNA。将其克隆至T vector中 ,经测序确证后 ,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3 1中。以脂质体介导法 ,将其转染CHO细胞 ,用G4 18筛选抗性克隆 ,ELISA法测定其生物学活性。结果 获得的IL 18BPa的cDNA序列与GeneBank登录的cDNA序列一致。将hIL 18BPa插入载体pcDNA3.1后 ,成功地构建稳定表达的载体。转染CHO细胞后 ,获得可稳定表达hIL 18BPa的基因工程细胞株。经纯化后 ,证明具有良好的生物学活性.

    http://www.100md.com/html/DirDu/2005/05/03/60/14/18.htm

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