肝癌特异性超抗原SEA(D227A)基因表达载体的构建与表达

http://www.100md.com 禄韶英 隋延仿 李增山 潘承恩 叶菁 张秀敏 王文勇

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     禄韶英；隋延仿；李增山；潘承恩；叶菁；张秀敏；王文勇 西安交通大学第一医院普外科 陕西西安710061；第四军医大学基础部病理学教研室 陕西西安710032 细胞与分子免疫学杂志 2003 4

    关键词：超抗原；逆转录病毒载体；AFP顺式作用元件；肝细胞癌

    目的:构建受AFP顺式作用元件调控的超抗原表达载体,将SEA(D2 2 7A)特异性的表达于AFP阳性肝癌细胞膜表面。方法:PCR扩增AFP基因启动子、增强子、linker CD80tm和SEA(D2 2 7A)。将上述片断插入逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点,构建AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原表达载体(pLXSNSEA(D2 2 7A) linker CD80tm)。通过脂质体介导,以表达载体转染表达或不表达AFP的肿瘤细胞系,用RT PCR和间接免疫荧光染色,检测SEA的表达。结果:成功地将AFP基因的启动子、增强子、linker CD80tm和SEA(D2 2 7A)克隆到逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点,酶切鉴定...

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