通过载体DHFR基因的弱化提高抗体在CHO细胞中的表达
http://www.100md.com
白银 王琰 张海荣 周丽君 吕英谦 俞莉章
第1页 |
参见附件(1046KB,4页)。
关键词:嵌合抗体;二氢叶酸还原酶;CHO细胞;真核表达
目的:提高抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体在二氢叶酸还原酶缺陷的CHO细胞株(CHO/DHFR-)中表达的产量。方法:对表达载体中DHFR基因表达调控序列进行一系列的删除突变和点突变后,构建不同的嵌合抗体表达载体。用这些载体转染CHO细胞并以递增量的氨甲喋呤(MTX)筛选,用ELISA法测定每个加压水平的各组细胞中抗体的表达水平。结果:通过对表达载体中DHFR基因表达调控序列的突变,使DHFR的基础表达水平产生了不同程度的弱化。转染CHO细胞后,可明显提高MTX加压增加抗体表达的效果,抗体表达水平的增加基本与DHFR基因的弱化程度呈正相关。从弱化程度最高的pWS2-BDI组中, ...
您现在查看是摘要介绍页,详见PDF附件(1046KB,4页)。