基金项目:国家自然科学基金资助项目(NO.30070959)

    【摘要】 目的 探讨大鼠肝、肾、睾丸、脾DNA TOPOⅡ活性与衰老的关系。方法 从3月龄和20月龄雄性大鼠上述组织提取TOPOⅡ，电泳后用凝胶成像分析系统进行定量分析，比较二者TOPOⅡ活性。结果 老年大鼠TOPOⅡ的活性明显低于青年大鼠。结论 TOPOⅡ活性下降是引起衰老的重要原因之一。

    关键词 TOPOⅡ 衰老 补肾益精

    随着老龄化速度的加快，如何提高生命的质量，延长人类寿命，已引起全球普遍关注，抗衰老已成为热点研究课题之一。近年来，有关单氨氧化酶、端粒酶和超氧化歧化酶等与衰老方面的研究颇多，但DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoisoˉmeraseⅡ，TOPOⅡ)与衰老关系的研究未见报道。TOPOⅡ是生物界普遍存在的核酶，与DNA复制、修复、转录、重组及细胞增殖密切相关。因此研究机体内TOPOⅡ变化，应是探讨衰老机制的切入点之一。我们通过观察青年大鼠和自然衰老大鼠不同组织TOPOⅡ活性差异，初步探讨探讨衰老机制。

     1 材料与方法

    1.1 实验动物 Wistar雄性大白鼠购自中国科学院实验动物研究所，实验动物分为老年组和青年组，老年大鼠20月龄处死，青年大鼠3月龄处死。由本所二级动物室饲养。

    1.2 试剂 蛋白酶K、PMSF(苯甲基碘酰氟)、ATP、DTT、BSA为Sigama产品。SDS为华美公司产品。pBR 322 DNA为宝生物(大连)工程公司产品。其它均为国产及进口分析纯试剂。

    1.3 缓冲液 缓冲液A，50mmol/L Tris-HCL pH7.5。25mmol/L KCl，3mmol/L MgCl 2 ，2mmol/L CaCl 2 ，0.25mol/L蔗糖，1mmol/L PMSF。缓冲液B，同缓冲液A，但蔗糖为0.6mol/L。缓冲液C ......