SSH方法分离大剂量照射后小鼠骨髓差异表达EST序列
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饶亚岚；陈肖华；张军权；魏巍；董波；毛秉智
小鼠骨髓|电离辐射|抑制消减杂交|差异表达序列标签,关键词：
参见附件(58kb)。
饶亚岚；陈肖华；张军权；魏巍；董波；毛秉智 北京放射医学研究所 100850 中华放射医学与防护杂志 2003 3
关键词：小鼠骨髓；电离辐射；抑制消减杂交；差异表达序列标签
目的 为探讨骨髓辐射损伤的分子机理,研究了整体照射条件下,辐射前后骨髓基因表达的变化。方法 小鼠7Gyγ射线照射后4h提取骨髓总RNA为实验方(tester) ,对照组动物骨髓总RNA为驱动方(driver) ;实验方、驱动方总RNA由SMARTcDNA合成方法合成双链cDNA ,进而由抑制消减杂交(SSH)方法获得消减杂交产物,消减杂交产物克隆到T载体建立消减文库;对部分克隆进行杂交筛选及序列比对。结果 消减杂交文库挑取80 0个克隆进行PCR扩增,阳性率约为86 % ;部分克隆经两轮杂交筛选获得1 4个差异片段;7个差异片段与鼠EST库已有序列高度相似,其余7个差异片段可能是新的EST...
关键词：小鼠骨髓；电离辐射；抑制消减杂交；差异表达序列标签
目的 为探讨骨髓辐射损伤的分子机理,研究了整体照射条件下,辐射前后骨髓基因表达的变化。方法 小鼠7Gyγ射线照射后4h提取骨髓总RNA为实验方(tester) ,对照组动物骨髓总RNA为驱动方(driver) ;实验方、驱动方总RNA由SMARTcDNA合成方法合成双链cDNA ,进而由抑制消减杂交(SSH)方法获得消减杂交产物,消减杂交产物克隆到T载体建立消减文库;对部分克隆进行杂交筛选及序列比对。结果 消减杂交文库挑取80 0个克隆进行PCR扩增,阳性率约为86 % ;部分克隆经两轮杂交筛选获得1 4个差异片段;7个差异片段与鼠EST库已有序列高度相似,其余7个差异片段可能是新的EST...
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