万伟东 杨松林 高春芳 王皓 伍严安 林子豪 万伟东(第二军医大学长征医院整形外科，上海 200003)；杨松林(第二军医大学长征医院整形外科，上海 200003) 高春芳(临床实验科) 王皓(临床实验科) 伍严安(临床实验科)；林子豪(第二军医大学长征医院整形外科，上海 200003) 第二军医大学学报 2000 0 21 8


    关键词：地塞米松；基因，胶原；启动子 期刊 dejydxxb 0 专题报道器官纤维化基础和临床研究 fur -->


    

[摘要] 目的：探讨地塞米松对人α1(Ⅰ)原胶原基因调控序列的作用。方法：用组织块法原代培养人皮肤成纤维细胞并进行传代培养作为本研究的模型细胞。(1)采用BrdU掺入的ELISA法，测定经不同浓度地塞米松处理24h后成纤维细胞的增殖情况。(2)构建含长短不一的人α1(Ⅰ)原胶原基因5′侧翼序列与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的3种重组质粒；以脂质体法转染人皮肤成纤维细胞；ELISA法测定不同浓度地塞米松作用24h后，转染了3种重组质粒的成纤维细胞的CAT表达量。结果：(1)在加入2%FCS或10%FCS的培养条件下，1×10^-9 ～1×10^-4 mol/L地塞米松处理24 h后，各浓度组成纤维细胞增殖值之间以及与对照组之间差异均无显著性(P>0.05)。(2)3种重组体转染成纤维细胞，并经地塞米松处理24h后，转染细胞的CAT相对表达量测定：地塞米松组与对照组之间、地塞米松较高浓度组(1×10^-5 mol/L)与较低浓度组(1×10^-6 mol/L)之间，差异均有显著性(P<0.05) ......