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编号:10670700
混合淋巴细胞培养后CD69抗原表达检测法与3H-TdR掺入法测定淋巴细胞活化和增殖的对比研究
http://www.100md.com 《中华血液学杂志》 1999年第12期
混合淋巴细胞培养后CD<sub>69</sub>抗原表达检测法与<sup>3</sup>H-TdR掺入法测定淋巴细胞活化和增殖的对比研究
混合淋巴细胞培养后CD<sub>69</sub>抗原表达检测法与<sup>3</sup>H-TdR掺入法测定淋巴细胞活化和增殖的对比研究

     徐晓武 谢毅 200040 上海医科大学附属华山医院血液科 中华血液学杂志 1999 0 20 12


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异基因造血干细胞移植需作HLA配型和混合淋巴细胞培养(MLC)以判定供、受者间组织相容性。传统的MLC通过细胞计数(淋巴母细胞比例)和同位素(常用3 H-TdR)掺入的结果来判定淋巴细胞的激活、增殖情况。我们拟建立常规混合淋巴细胞培养,在异基因抗原特异性刺激条件下,同时作流式细胞术检测活化的淋巴细胞及其亚群抗原CD69 的表达和3 H-TdR掺入分析,探讨两种方法之间的相关性。

材料和方法

    1 细胞来源 上海市血液中心献血员76名,年龄27~49岁,平均年龄32岁。男、女比例为1∶1。无菌取外周血,肝素抗凝,分离单个核细胞用台盼蓝检测细胞活力,活力应>95%。

    2 主要试剂 FITC和PE连接的单抗(CD3 ,CD4 ,CD8 ,CD69 ,IgG1 isotype对照抗体)为美国Becton Dickinson产品。

    3 混合淋巴细胞培养 用RPMI 1640培养液调整细胞浓度为1×106 /ml ......


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