钱文斌 林茂芳 孟海涛 310003杭州，浙江医科大学附属第一医院血液科 中华血液学杂志 1999 0 20 7


    关键词： 期刊 zhxyxzz 0 研究报告 fur -->


    

体外实验表明，在重组造血生长因子作用下，纯化的造血干/祖细胞(CD₃₄ ⁺ 细胞)可获得大量的扩增。然而，造血细胞在体外扩增的同时，也明显地加速了其分化，造血负调控因子与不同细胞因子组合配伍，可提高扩增效率，并使扩增导致的细胞分化明显减缓。因此，我们观察了重组人肿瘤坏死因子α(rhTNFα)对脐血CD₃₄ ⁺ 造血细胞体外扩增的调节作用。

    材料和方法

    1 细胞来源 在无菌条件下，密闭式采集母体健康的正常足月顺产儿脐血，肝素抗凝(20U/ml)，平均采血量(59±25)ml，样品在采集后24小时内处理，Ficoll(相对密度1.077)梯度离心，收集界面层单个核细胞(MNC)，洗涤备用。

    2 CD₃₄ ⁺ 细胞分离纯化 用Isolex50免疫磁珠分离系统(Baxter公司)分离细胞。MNC用RPMI1640(Gibco公司)调整细胞浓度为1×107/ml，加体积分数为5%的静脉用丙种球蛋白(上海莱氏公司)阻止非特异性结合，加CD₃₄ ⁺ 单抗(Baxter公司)混匀 ......