血小板活化过程中膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa构象变化的研究
血小板活化|膜糖蛋白类|流式细胞术|蛋白质构象,关键词:
关键词:血小板活化;膜糖蛋白类;流式细胞术;蛋白质构象
摘要 目的 对血小板活化过程中膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa构象变化进行初步探讨。方法 分别用供体荧光(FITC)与受体荧光(TR)标记识别GPⅡb/Ⅲa上不同抗原决定簇的单抗。用流式细胞仪检测活化血小板在530nm处的荧光强度值,并计算荧光供受体间的荧光共振能量转移值(FRETV)。结果 不论何种单抗作为荧光供体,静息态血小板均可被测得一低而稳定的FRETV(平均5.5%)。血小板被激活时FRETV会有显著升高,表明GPⅡb/Ⅲa内的亚单位间发生了位置或(和)方向上的变化,该变化也可因胞外钙离子的清除而发生,但不依赖于纤维蛋白原与其受体的结合。结论 血小板活化时FRETV的升高可定性反映出荧光标记单抗所结合的GPⅡb/Ⅲa内部亚单位间所发生的重新排列,这种构象的改变可最终导致纤维蛋白原受体的表达。
Study on conformationalchanges of GP Ⅱ b/Ⅲ a complex during plateletactivation
PENG Lin, LI Jiazeng, WU Huaizhu, et al.
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