我们检测了17例多发性骨髓瘤(MM)患者外周血单个核细胞p170和CD₃₈ 的表达,以期探讨二者表达的相关性及其意义。

1 研究对象
1.1 实验组:17例MM住院患者,根据Durie和Salmon标准诊断,无急性感染,形态学未发现外周血中有浆细胞,其中男性14例,女性3例,初治9例,复发8例,年龄40～73岁,平均年龄60岁,Ⅱ期5例,Ⅲ期12例。
1.2 对照组:11名健康献血员,男性9名,女性2名,年龄31～48岁,平均年龄39岁。
1.3 化疗方案:检测患者p170和CD₃₈ 后,无论初治和复发患者,均以COMP(环磷酰胺、马法兰、泼尼松、长春新碱)方案化疗,其中6例患者用COMP方案3个疗程无效后改用VAD(长春新碱、阿霉素、地塞米松)方案。
1.4 疗效观察:化疗3个疗程后观察6～12个月,疗效按文献[1]标准判定。
2 试剂及实验方法
2.1 试剂:p170单抗JSB₁ 购自美国Signet公司,CD₃₈ 单抗购自中国医学科学院血液学研究所免疫室。生物素亲和素过氧化物酶(ABC)试剂购自美国Vector公司。
2.2 实验方法:采用免疫组织化学ABC法^[2] ,抽取6ml静脉血,肝素抗凝,经Ficoll-Hypaque分离出单个核细胞,调整细胞浓度为(1～2)×10⁶ /ml,滴片,1%多聚甲醛固定,3%H₂ O₂ 处理后,2%Tris小牛血清清蛋白和马血清分别孵育,依次加入第一、二、三抗体,DAB染色,封片后专人读片。每次实验均设阳性和阴性对照,细胞膜呈棕黄色者为阳性细胞,计数200个细胞，计算细胞阳性率,以p170≥10%为阳性分界。
3 统计方法 各组测量值用±s表示,用确切概率法,t′检验进行比较,直线相关分析判断两指标相关性。

1 11名健康对照外周血单个核细胞CD₃₈ 为9.64%±5.23%;p170表达均为阴性(阳性细胞为2.68%±1.44%)。
2 患者CD₃₈ 和p170的表达
2.1 CD₃₈ 表达:17例MM患者外周血单个核细胞的CD₃₈ ⁺ 细胞为35.20%±15.89%,明显高于对照组(P<0.001)。
2.2 p170表达:9例表达阳性(阳性细胞18.00%±4.52%),其中初治4例,复发5例,临床疗效差8例,经追踪观察6～12个月后,死亡5例,未缓解3例,1例部分缓解追踪观察12个月有复发趋势。8例表达阴性(阳性细胞4.43%±1.88%),其中5例初治患者呈部分缓解,3例复发患者追踪观察6个月,2例仍未缓解,1例呈部分缓解。
3 患者p170表达和CD₃₈ ⁺ 细胞率与临床疗效关系 p170表达阳性组CD₃₈ ⁺ 细胞率(46.67%±19.27%)显著高于p170表达阴性组(28.37%±13.28%)(P<0.05)，阳性组临床疗效(无效和进步8例,部分缓解1例)显著差于阴性组(无效和进步2例,部分缓解6例)(P<0.05)。
4 患者p170阳性和CD₃₈ ⁺ 细胞的相关分析 CD₃₈ ⁺ 细胞率随p170阳性细胞增多而增多,二者呈明显正相关(r=0.70,P<0.01)。二者回归方程为Y=1.622X+18.30(Y代表CD₃₈ ⁺ 细胞率,X代表p170阳性细胞率)。

大量研究已表明p170高表达与血液恶性肿瘤耐药密切相关。本组资料显示,p170表达阳性组CD₃₈ ⁺ 细胞率明显高于p170表达阴性组,且临床疗效显著低于阴性组(P<0.05),可能与p170表达阳性的肿瘤前体细胞耐受常规化疗有关,提示检测MM外周血单个核细胞CD₃₈ ⁺ 与p170表达可作为预测疗效判定的一项指标。p170阳性表达组中4例为初治患者,临床疗效差,一直未缓解,其中3例死亡。提示MM患者除化疗后引起的多药耐药以外,还存在内源性耐药,应引起临床医生注意。p170表达阴性组中临床疗效差2例,而无p170表达,说明MM患者的多药耐药除p170高表达以外,还存在其他机制参与,有待进一步研究。

1 张之南,主编.血液病诊断及疗效标准.第1版.天津:天津科学技术出版社,1991.303-306.
2 谢兆霞.抗MOR抗体检测白血病细胞P-糖蛋白.湖南医科大学学报,1992,17:63-66.

(收稿:1998-02-16 修回:1998-04-29)