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编号:10670694
转染TK基因的人外周血单个核细胞对丙氧鸟苷敏感性的研究
http://www.100md.com 《中华血液学杂志》 1999年第12期
     闵风玲 达万明 魏亚明 欧剑峰 欧英贤 刘源 730050 兰州军区总医院血液科、全军血液病中心、兰州军区血液病研究所 中华血液学杂志 1999 0 20 12


    关键词: 期刊 zhxyxzz 0 研究报告 fur -->


    

异基因造血干细胞移植供者T淋巴细胞与移植物抗宿主病(GVHD)的产生关系密切。以往唯一有效的方法是体外去除T淋巴细胞及应用免疫抑制剂。为了最大限度提高移植物抗白血病(GVL)效应,防止肿瘤复发,同时减少GVHD发生,对T细胞进行基因改造是基因治疗肿瘤的方法之一。由于单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因能催化丙氧鸟苷(GCV)磷酸化后产生毒性物质,导致转基因细胞死亡。故我们应用逆转录病毒载体介导,将HSV-TK基因导入人外周血单个核细胞(PBMNC),观察不同细胞系基因转染效率,并测定GCV对转染后细胞生长抑制作用。

材料和方法

    1 主要试剂、细胞株及培养条件 rhIL-2购自北京中化合通药业有限公司,CD3 单克隆抗体(单抗)为军事医学科学院产品,PHA-P、噻唑蓝为Sigma公司产品;藻红素(PE)标记鼠抗人CD3 、CD4 、CD8 、CD19 、CD33 单抗购自深圳晶美生物工程有限公司;GCV购自上海罗氏药业有限公司。PA 317/GCGFPPTSN为含GFP基因、HSV-TK基因、NeoR基因的逆转录病毒包装细胞株、NIH3T3细胞株均由上海东方肝胆外科医院钱其军博士惠赠。培养条件为37℃、体积分数为5% CO2 、饱和湿度中培养。

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