摘要 目的 ：研究bcr/abl融合基因在慢性粒细胞白血病(CML)中的作用以及探索CML基因治疗的可能性。方法 ：合成针对 bcr/abl融合基因转录本b3a2断裂点“锤头状”核酶的cDNA序列，定向克隆于逆转录病毒载体内，通过脂质体介导的DNA转染法，将核酶基因导入K562细胞，并通过克隆分析法、流式细胞术(FCM)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、DNA电泳及电镜观察等方法检测核酶对K562细胞的影响。结果 ：①核酶转染K562细胞后48小时克隆形成抑制率达85%；②细胞内P210蛋白合成受到明显抑制；③RT-PCR半定量检测bcr/abl mRNA表达水平明显下降；④核酶处理组K562细胞发生凋亡，表现为：在FCM图谱上可见明显的凋亡峰；DNA电泳分析出现典型的梯状DNA带；电镜观察呈现凋亡早期形态学改变。结论 ：核酶基因通过逆转录病毒载体导入K562细胞后可成功表达，使K562细胞bcr/abl mRNA及P210蛋白表达水平下降，抑制K562细胞增殖，同时诱导 K562细胞发生凋亡。

    Construction of retrovirus vector of bcr/abl mRNA cleaving ribozyme gene and its effects on K562 cells Wu Yong, Chen Yuanzhong, Hu Jianda,et al.Fujian Institute of Hematology, Union Hospital, Fujian Medical University ......