竞争聚合酶链反应定量bcr-abl mRNA方法的建立及应用
关键词：
我们根据bcr-abl基因的特点，用重组聚合酶链反应(PCR)法定点改建b3a2型bcr-abl cDNA，得到b3a2和b2a2型bcr-abl cDNA的通用竞争内标物。在此基础上，我们建立竞争PCR法定量检测bcr-abl mRNA的方法并初步用于临床。
材料和方法
1 竞争性内标物 利用本室经重组PCR构建的bcr-abl cDNA中一276bp片段的类似物mimic,长240bp,较原276bp片段仅中间部分序列缺失，两侧引物结合区完全相同。将其克隆至pGEM-5Zf(+)质粒上，得到的pGEM-mimic经紫外分光光度计(UV)定量后作为内标物 ......
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