逆转录病毒介导的多药耐药基因导入人骨髓CD34+细胞的实验研究
关键词:
为探索恶性肿瘤治疗中保护造血干细胞的方法。我们利用逆转录病毒介导的基因转移方法,在骨髓CD34 + 细胞分离的基础上,将人多药耐药基因导入造血干/祖细胞,并初步观察了转基因造血细胞对化疗药物的耐受性。
材料和方法
1 包装细胞的建立 按照操作说明,利用脂质体介导的基因转移方法将含人全长mdr1cDNA的重组逆转录病毒载体PHa mdr1/A导入包装细胞PA317,用含有60ng/ml秋水仙素的选择培养基筛选,获得抗性克隆,经扩增后进行鉴定,提高秋水仙素的浓度加压培养,收集上清进行病毒滴度测定。
2 病毒上清的制备及其滴度的测定 将处于对数生长期的PA317/mdr1细胞 ......
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