毛细管电泳2间接化学发光法分离检测儿茶酚胺及儿茶酚

    李欣欣 胡涌刚

    3

    杨泽玉

    (华中科技大学环境科学与工程学院,武汉430074)

    摘 要 根据儿茶酚胺及儿茶酚淬灭铁氰化钾2鲁米诺体系发光的原理,利用毛细管电泳2化学发光联用技术

    分离测定了3种儿茶酚胺和儿茶酚,并优化了检测和分离条件。在最佳条件下,测得多巴胺、肾上腺素、去甲

    肾上腺素和儿茶酚的检出限分别为0. 33、1. 8、2. 4和0. 12μmol/L。本方法具有一定的选择性,对于医用注射

    液及尿样在未经预处理条件下可直接进行分离分析,结果令人满意。

    关键词 毛细管电泳, 化学发光, 儿茶酚胺, 尿样

    2004209210收稿; 2005201204接受

    本文系国家自然科学基金资助(No. 2005005)和武汉市晨光计划(No. 2005004026)资助项目

    1 引 言

    多巴胺(DA) 、肾上腺素( E)和去甲肾上腺素(NE)等儿茶酚胺(CA)作为神经递质和激素与人们的

    健康密切相关[ 1 ] ,分离和测定生物样本中的痕量儿茶酚胺,对于研究其生理功能、与之有关的疾病诊断

    和药物及手术疗效的鉴定都具有重要意义。毛细管电泳(CE)是一种高效、快速的分离分析方法,目前,毛细管电泳技术用于儿茶酚胺类物质的分析主要采用紫外可见吸收[ 2, 3 ] 、激光诱导荧光[ 4, 5 ] 、化学发

    光[ 6, 7 ]等检测方式。由于生物样品成分复杂,因此,实际样品通常需要经过渗析、离心及固相微萃取等

    预处理后才能用于CE分离分析。本实验根据在碱性条件下儿茶酚胺及儿茶酚猝灭铁氰化钾2鲁米诺

    体系发光反应的原理,结合毛细管电泳分离技术,在优化条件下,实现了3种儿茶酚胺、儿茶酚标准样品

    及未经预处理的3种临床药物和实际尿样的在线分离分析。

    2 实验部分

    2. 1 仪器与试剂

    高压电源(上海原子能研究所) ;光电倍增管(北京滨松光子技术有限公司) ;石英毛细管(河北永年

    光纤厂) ;直流前置放大器(南京大学微弱信号检测中心) ; N22000型色谱工作站(浙大智达信息工程有

    限公司) 。鲁米诺( Fluka公司) ;生化试剂:肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺( Sigma公司) ; K3 Fe (CN) 6、儿茶酚、四硼酸钠均为国产分析纯试剂。所用水为二次蒸馏水。

    2. 2 毛细管电泳2化学发光检测装置 ......