当前位置: 首页 > 期刊 > 《分析化学》 > 2004年第12期
编号:10794561
毛细管电动色谱分离手性氨基酸及其在生物样品分析中的应用
http://www.100md.com 《分析化学》 2004年第12期
毛细管电动色谱,,毛细管电动色谱,激光诱导荧光,氨基酸对映体,β2环糊精,大鼠
     毛细管电动色谱分离手性氨基酸及其在生物样品分析中的应用

    付煜荣1 ,2 颜流水1 罗国安3 1 陈翠真3 王义明1 张兰桐4

    1 (清华大学分析中心, 北京100084) 2 (河北北方学院化学教研室, 张家口075000)

    3 (北京市眼科研究所,北京100005) 4 (河北医科大学药学院, 石家庄050017)

    摘 要 建立了MEKC法分离丙氨酸(Ala) 、谷氨酸(Glu) 和天门冬氨酸(Asp) 三对手性氨基酸,并对大鼠正常

    组和白内障组晶体和血清中D2Ala、L2Ala、D2Glu、L2Glu、D2Asp 和L2Asp 进行定量分析。利用FITC 柱前衍生,以β2环糊精(β2CD) 作为手性添加剂,激光诱导荧光检测(LIF) ,优化电泳条件为:气压进样5 s ,分离温度25 ℃,分离电压为20 kV ,运行缓冲溶液为40 mmol/ L 硼砂缓冲溶液(pH 9. 3) ,其中包含50 mmol/ L SDS 和13 mmol/ L

    β2CD。考察了硼砂缓冲溶液浓度、pH值、分离电压、β2环糊精浓度对分离的影响。在优化电泳条件下,上述3

    种氨基酸对映体均得到基线分离,并可对大鼠的晶体和血清进行定量分析。本方法操作简单,检测灵敏度高,可用于药品质量监测以及生物样品的分析。

    关键词 毛细管电动色谱,激光诱导荧光,氨基酸对映体,β2环糊精,大鼠

    2003212220 收稿;2004205209 接受

    本文系国家973 项目资助(No. 2001CB510306)

    1 引 言

    对映体异构体的分离要求分离技术具有高灵敏度、高选择性和高分辨率。毛细管电动色谱(MEKC)

    是手性拆分常用的分离模式之一,只需在背景电解质中添加手性选择剂,构建手性环境,即可进行手性

    拆分。环糊精及其衍生物(CDs) 是应用最广泛的手性选择剂1 ,2 。人体中存在D2氨基酸,其含量一般

    较L 型低,随着检测技术的不断发展,检测极微量D2氨基酸成为可能。文献3 以气相色谱法研究了

    Asp 消旋化的增长率与年龄的相关性。Fisher 等4 报道了老年前期痴呆患者脑室和腰椎脑脊液中存在

    游离的D2氨基酸。某些D2氨基酸与疾病的相关性正引起人们的重视。

    本实验所研究的丙氨酸、谷氨酸和天门冬氨酸是与生命科学密切相关的手性氨基酸。丙氨酸

    (Ala) 、谷氨酸(Glu) 和天门冬氨酸(Asp) 是分子量较小且均不含苯环的氨基酸,因而手性拆分难度较大 ......

您现在查看是摘要页,全文长 15557 字符