第32 卷

    2004 年5 月

    分析化学(FENXI HUAXUE) 研究报告

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第5 期

    565～568

    以单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂

    为基质的亲水性排阻色谱固定相的合成及其

    在生物大分子分离中的应用

    龚波林 王超展 王骊丽 耿信笃

    3

    (西北大学现代分离科学研究所,现代分离科学省重点实验室,西安710069)

    摘 要 以单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂为基质,将该树脂经化学改性后得到亲水性良好的新型

    尺寸排阻色谱固定相,其表面羟基含量高达6. 1 mmol/ g。详细评价了该改性后树脂对蛋白的质量回收率、亲

    水性、耐压性能及化学稳定性。用三羟甲基胺基甲烷( Tris) 缓冲溶液(pH = 7) 为流动相,对蛋白质混合样的分

    离遵循体积排阻色谱分离机理。

    关键词 单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球,尺寸排阻色谱,生物大分子

    2003207201 收稿;2003212219 接受

    本文系国家自然科学基金资助项目(No. 39880003 和No. 20175016)

    1 引 言

    尺寸排阻色谱(size exclusion chromatography , SEC) 在生物大分子的分析与分离中占有重要的地

    位。众所周知,SEC 固定相主要有无机和聚合物基质两大类。聚合物基质不溶于有机溶剂,在pH 为

    1～14 的溶剂环境中具有良好的化学稳定性及介质表面不存在自由离子等优良特征。过去SEC 都是

    采用软的亲水性凝胶为基质,如Bio2Gel P、Sephadex、Sepharose 等。这些凝胶不能承受较高的柱压。20

    世纪70 年代末出现的刚性交联聚苯乙烯微球是应用最为广泛的一种聚合物基质色谱固定相,但该微球

    表面呈现极强的疏水性。作为色谱固定相可直接用于反相色谱和以有机溶剂为流动相的SEC 中,若用

    于以盐水为流动相的SEC 分离,就必须对其表面进行涂覆1 。这类填料在连续使用中涂层易被洗脱,稳定性差。键合甘油的交联聚苯乙烯树脂虽化学稳定性好,但微球的表面仍存在较强的疏水性2 。文

    献3 报道了用甲基丙烯酸环氧丙酯为单体,亚乙基二甲基丙烯酸酯为交联剂,采用一步种子溶胀聚合

    法4 制备了孔径分布合适的单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂(PGMA/ EDMA) ......