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编号:10795600
肾癌基因治疗的研究现状
http://www.100md.com 《中华现代外科学杂志》 2005年第1期
1肾脏靶细胞的基因转移方法,2肾癌的基因治疗,3问题与展望,参考文献
     基因治疗是指通过在特定靶细胞中表达该细胞本来不表达的基因,或采用特定方式关闭、抑制异常表达基因,达到治疗疾病目的的治疗方法。近几年来泌尿外科领域里,某些肾脏疾病的基因治疗有了相当大的发展、在一些临床试验中获得确切的成功。在临床上进展最快应用最多是肾癌的基因治疗,目前还仅限于晚期癌。在肾脏基因表达仅限于肾脏本身,其合成的蛋白产物主要集中于肾脏局部,因此肾脏是理想的基因治疗的靶器官。

    1 肾脏靶细胞的基因转移方法

    肾脏是高度分化的器官,组成包括有肾小球、肾小管、脉管系统和间质组织,由基底膜和相关细胞所分隔。肾小球基底膜把尿液从血液中分离出来,肾小管基底膜把水分从原尿中重吸收来。基因载体较难通过这些解剖上的屏障,这使基因转染存在困难。目前有4种途径将基因转移给肾脏:动脉途经、静脉途径、输尿管途径、肾实质直接注射途径。

    1.1 病毒载体系统

    1.1.1 逆转录病毒载体 半数人类基因治疗的载体是复制缺陷型的逆转录病毒,属RNA病毒。其所含的gag、pol、和env3个基因已被目的基因所取代,不能在细胞内自主复制,但仍具有转染细胞的能力,随机地整合到宿主的基因组中,理论上讲其转染基因可以长期表达。但由于整合基因中DNA的甲基化,有时转染基因在体内的表达不过8~10周 [1] 。逆转录病毒只能在细胞处于分裂期的时侯才能稳定地整合到宿主基因组中,而肾脏细胞有丝分裂率低,这样逆转录病毒载体基因对肾细胞的转染率就比较低。Boschdeng尝试通过叶酸损伤肾小管细胞后的修复机制来促使细胞增殖 [2] 。虽然有一定效果,但基因转染率还是比较低,只能在注射的局部表达。

    1.1.2 腺病毒载体 腺病毒是一种双链DNA病毒,它能寄生的宿主广泛。在人类主要存在于上呼吸道,一般情况下不致病。其缺陷在于不能整合到染色体上,因而随着细胞的分裂可能丢失。另一主要缺陷是病毒编码蛋白可以激发机体的免疫反应,使病毒载体很快被清除,同时可引起严重的过敏反应。据报道有6种将目的基因腺病毒载体导入靶细胞的途径。Moullier等,首先报道了向肾动脉注射腺病毒载体,使近端小管细胞出现低度基因转染及通过逆行注射将腺病毒载体引向肾盂,后者选择性地使乳头、髓质区的集合系统细胞出现基因转移 [3] 。Takase等向肾动脉注射腺病毒载体后夹闭肾动脉,观察到皮质近端小管细胞表达B-半乳糖激酶 [4]。Ye等报道以肾小球内皮细胞为靶细胞,向肾动脉灌注高滴定度的腺病毒载体,其目的基因表达持续了3周 [5]。Ortiz PA等直接向外层皮质注射含有编码GFP(荧光绿蛋白)基因的腺病毒载体 ......

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