关键词: 骨形态发生蛋白;载体;基因治疗

    0 引言

    骨形态发生蛋白-4(BMP-4)具有诱导成骨潜能细胞向软骨细胞和成骨细胞方向分化并形成新骨的能力.随着基因转染技术的应用，将外源基因转入靶细胞内，通过靶细胞表达外源基因而发挥作用成为可能.本研究的目的是通过基因克隆和DNA重组技术构建可在真核细胞内表达的BMP-4表达载体，并观测外源基因在细胞内表达的情况，为探索将基因转移技术应用于骨折及骨不连等疾病的治疗奠定一定的实验基础.

    1 材料和方法

    1.1 试剂

    质粒pcDNA3和pSPT-18-mBMP-4均由吕振华博士馈赠，EcoR I和HindIII，T4DNA连接酶、溴化乙锭(EB)、RNAase购自华美公司，普通琼脂糖、脂质体(lipofec-tamin)、G418、DMEM购自Gibco公司，胎牛血清购自Hy-clone公司.

    1.2 仪器

    CO2 孵箱 ......