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    9 卷l 期

    经 济 林 研 究

    EC ONOMI C FOREST RESEARCHES l 9 9 1 年

    低 温 对 油 桐 种 子 萌 发 和 幼 苗 生 长 的 影 响

    何 方 吴建军

    (中南 林学 院 ' . 7

    【 摘要 J 抽褐种子和曲苗在低温下内部生理生记过程发生晴显变化. 随着温度时下降和胁迫 耐问 的延长， 其

    K 外渗 率 明显 增加 .细胞TTC还原率显 著 下降 .超 氧 物歧 化酶活性 和抗 坷 ： 血酸含 量下 降 .膜 脂过氧 化产 物 丙 ：一

    醛含量增加.过氧化氢酶，过氧化物酶祀抗环血馥氧化酶瑶性也发生 咀显变化 .低温下，油桐幼苗叶片 叶绿素 音

    量下 降 .光 台作用 明显 降 低 .冷害 韧 期 .幼 苗呼 吸盯有 增强 的表现 .特鼬 是 从低 温转 ^暖 温后呼 吸速 率 大 大 增

    加 .随着冷害的发展.呼吸又明显下降；冻害则使幼苗呼吸逐渐降低 .但从低温转入瞪温后仍出现呼吸高 峰.不

    同品种或不 同器官对低温的反应不同.外僳脱落酸和 抗坏血酸预处理能明显地提高油桶幼苗抗冷性。

    _ 、关 蕾 饵 ： 旦堡 里 坠 兰 ： 堑 力 . 竺 苎 圭 苎 = .南 聋 . ‘ J

    低温逆境是影响植物生命活动的主要外界环境因子之一，在低温条件下，植物的细胞结

    构和生理生化功能产生了一系列变化。I y on s 首先提出植物冷害的 膜伤害 假说，许多研

    究证明低温可以明显地造成植物细胞膜系统的破坏 但是，有关膜系统破坏的机制，还没有

    形成统一的意见。自Mc c o r d 和F r i d o v i c h 提出生物膜 自由基伤害学说以来.现已被广泛 地

    应 用于 研究生物细胞的毒 害 机理 。 。

    油桐 (Ve t n i c i a f O r d i i He m s l 。)是亚热带地区的主要经济林木之一.在北亚热格 地

    区的低温伤害常 I 起桐林减产和幼苗枯死。 目前.低温对油桐伤害的研究极少，本试验拟用

    油桐种子和幼苗为材料 .通过人工低温处理结台生化分析 .以探讨低温对油桐种子萌发和幼

    苗 生长的影响及影响机制。

    1 材料和方法

    1. t 试 验材科

    将贮藏过冬的泸溪葡萄稠、四』 l l 4 , 米桐，浙江五爪桐，河南股爪青种 子 进 行 水选 .去

    掉劣质种子和腐烂种子，用1%高锰酸钾消毒. 清水冲洗干净.。 在室温下用 自来水浸泡9 6 小

    时.然后播种于洁净的河沙中，放 入3 o ℃恒温培养箱中培养 ， 待苗术出齐后 ， 移栽到花盆中.

    置于阳台上任其 自然生长。

    1.2 试验 方法

    低温处理：定期采集材料置于冰箱中进行低温处理，温度控制在 ±l℃内。

    质膜透性的测定：参照胡荣海等的方法 用 火焰光度计测外渗液中K 浓度 .以K 的 外

    渗率表示质膜的相对透性。

    收稿 日期 .1 9 9 0 年1 O 月2 0丑

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    2 经 侪 林 研 究 9 卷

    ——— ——— ———— ————— ————— — ———— —— ————— ———一 —■ ————— ———— ——— ——— ———。 。 。 =

    呼吸强度的测定 ： 采用气流法用0 . 1 NNa OH收集油桐幼苗呼吸放出的C O ， 用WZ F一8 。

    型微机植物呼吸测定仪测定CO 浓度，以释放CO， 1 1 2 B · h _ ‘ · 1 0 0 g Fw 表示呼吸强度。

    叶绿素古量测定：采用分光光度法，以n l g · g FW“表示叶绿素含量。

    光台强度 捌 定：采用改 良半叶法，以吸收CO。 · n l d m一 · h 一表示光台强度。

    抗坏血酸含量测定：采用景国安等的方法 ，以mg · 1 0 0 g DW 表示抗坏血酸含量。

    种子活力的测定：参照王爱国和罗广华等方法 ，种子活力=第 天 [(胚 租 氏+胚 轴

    长 )c r l 1 )X第十天发芽率 。

    根系活力和细胞残存率的测定：采用TTC还原法，以还原 g TTC· h _ 。 · g FW一 。 曩 求。

    酶液制备：参照王爱国等方法 ，每克鲜重材料加入 5 mi 0 . 0 5 Mp H7 . 8 的磷酸缓冲液进行

    研磨，匀浆在1 3 0 0 0 r mp 冷冻离心1 O 分钟 ，取上清液贮于冰箱备用。

    超氧物歧化酶 (S OD)活性测定：参照王爱国等的方法稍加改进。3 I l l 1 反惠混 台 液 L f j

    含有：6 . 5 M核黄素，1 3 mM甲硫氨酸 ，6 3 z MNBT o . O 5 Mp H7 . 8 磷酸缓冲液，加 入 适量

    酶液后在4 0 0 0 I x荧光下光照3 0 分 钟 ， 并 在5 6 0 1 2 1 3 2 下测定光密度 ， 以缓冲掖代替酶液作空白. 酶

    活性单位采用抑制NBT光化还原5 0 %为一个酶活性单位 以u· g I w 一 表示酶活性

    过氧化氢酶 (CAT)活性测定：按余祥威的方法 以缚分钟分解0 . 1 t l l g H _ 0： 为一个晴

    _ 插性单位，以U· g Fw 表示酶活性。 ，过氧化物酶 (POX)活性测定：按余祥威的方法，以每分钟内O· D . 。 侮 增 J J l t O . 1 为一

    个爵活性单 位，以u· g FW 表示酶活性

    抗坏血酸氧化酶 (AOD)活性测定：按佘祥威的方法，以每分钟分解0 . i 抗朝： 血 酸

    为一个酶活性单位。以U· g Fw 表示酶活性。

    脂质过氧化产物丙二醛 ( MDA) 含量测定：按H e a t h 和壬爱国等的方法，以 g Dw一 ‘

    表示

    同功酶测定：按罗广华等方法_ 制作艇胶 S OD的活阻染色按罗广毕等的 赢 法 ，P0x和

    cAT的活性染色按黄庆榴的方法

    2 结果和分析

    2. ' 摄卫对油桐种子莆发和幼苗生长的影嫡殛其生理生化指标的变他

    2 . 1 . 1 细胞膜遗性的变化

    2 . 1 . 1 . 1 不同萌发阶段的种子细胞膜透性的变化

    处于不同萌发阶段的油桐种子在室温下 (2 5 c C)，随着曲发的进行 ! ‘ 外渗率 布 火

    的趋势。经l 2 小时低温处理的油桐种子细胞膜透性发生变化。随着温度下降 K 外 渗 簪逐

    渐增大 (表 1)。

    由表 l 看出.零上低温对油桐种子细胞膜

    遗性的影响较弱 .K 外渗率均不及 对 照的 2

    倍 ；而零下低温则有较显著的影响，K 外 渗

    率均在对照的 3倍以上，并且萌发时间不 同.

    其细胞膜透 性亦 有差 并

    2. 1 . 1 . 2 低温对 不 同器官细 胞膜 选 1 生的影u

    裘 l 低温对油桐 种予 细胞 膜透 性

    (K 外渗率 )的影响 单位：%

    处 理 畦 腔 前 I 曩 m 圭后 曲 劫

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    维普资讯 http:www.cqvip.com l 期 何 方等 ：低温对油桐种子荫发和幼苗生长的影响

    在室温下 (3 O ℃ 》 根j茎 叶等曝 官细胞麒透性差别不大 经过低温处理后刚发生明

    显变化 ......