安徽农业大学学报, 2003, 30 (4) : 363～ 366

    Journal of A nhuiA gr iculturalU niversity

    大黄提取液防治黄瓜白粉病的初步研究①

    唐 蕊1

    , 张雪辉1

    , 胡同乐2

    , 曹克强2

    (11邢台学院生化系, 邢台 054001; 21河北农业大学植物保护学院)

    摘 要: 对中草药大黄提取液防治黄瓜白粉病的保护活性、稳定性、持效期及抑菌谱等作了初步研究。结

    果表明, 大黄提取液的100 倍液防效达90%以上, 优于粉锈宁 (15% W P) 1 000 倍液的防效 (73141% ) ; 其酸

    碱稳定性与热稳定性都非常强; 保护作用的持效期至少可达6 d; 抑菌谱测试结果表明, 它对供试的小麦根腐病

    菌Coch l iobolus sa tivus 等 20 种真菌都表现出一定的抑制作用。

    关键词: 黄瓜白粉病菌; 植物提取物; 抑菌活性

    中图分类号: S4361421112 文献标识码: A 文章编号: 100022197 (2003) 0420363204

    黄瓜白粉病是由S p haerotheca f u l ig inea (Sch lech t) Po ll1 引起的一种潜育期短、流行性强的叶部病

    害, 也是黄瓜生产上最重要的病害之一, 随着保护地栽培的发展, 此病的危害越来越重[ 1, 2 ]。自20 世纪70

    年代以来, 生产上主要采用化学农药防治此病, 如粉锈宁、速保利、腈菌唑等, 但由于长期大量使用, 使

    得抗药性、高残留、污染环境等不利影响日益突出。如果在防治上没有新的突破, 黄瓜将面临着被国内

    外市场拒之门外的危险。植物源农药以其自身无残留、低毒或无毒, 不易产生抗药性, 且易与其他药剂

    混配等特点受到人们的青睐, 近几年已成为国内外研究的热点之一[ 3 ]。德国巴斯夫公司已开发出药剂

    M ilsana 即R ey nou tria sacha l inensis 的水溶性提取物, 用于防治黄瓜白粉病, 令人遗憾的是, 其成本太

    高[ 4, 5 ]。为此, 作者对防治黄瓜白粉病有效的大黄提取液作了初步研究, 旨在为开发高效、安全、经济的

    新型无公害植物源农药奠定基础。

    1 材料和方法

    111 材料

    11111 供试植物材料 中草药大黄 (R heum p a lm a tum ) (购自安国)。

    11112 供试菌种 黄瓜白粉病菌 (采自河北省植物保护研究所)。

    11113 供试黄瓜品种 长春密刺 (购自长城种业公司)。

    11114 化学药剂 粉锈宁 (15%可湿性粉剂, 张家港市第二农药厂)。

    112 方法

    11211 大黄提取液的制备 粉碎→提取 (大黄∶80%乙醇= 1∶5 (w? v) ) →振荡 (2 d, 150 r? m in, 25℃)

    →离心 (3 500 r? m in, 20 m in) 取上清液→40℃旋转蒸发→用80%乙醇定容 (药液毫升数与中药克数相

    等) →4℃冰箱保存备用。

    11212 大黄提取液防治黄瓜白粉病的保护作用测试 待黄瓜苗长至子叶期时, 喷大黄提取液 (100 倍

    液) , 24 h 后喷雾接种, 接种孢子悬浮液浓度为10×10 倍镜下每视野20 个分生孢子, 设清水、80%乙醇

    和粉锈宁1 000 倍液作对照, 置于24～ 26℃下, 塑料布覆盖保湿, 待清水对照充分发病时, 调查各处理

    病情, 记录严重度, 计算病指和防效 (每个处理10 株, 3 次重复, 下同)。

    11213 大黄提取液的稳定性测试 酸碱稳定性的测试: 将大黄提取液装入 6 支试管, 每支装 5 mL , 分

    ① 收稿日期: 2002210231

    基金项目: 河北省科技攻关项目 (0122017317) 资助。

    作者简介: 唐蕊 (1976- ) , 女, 硕士。

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.别用HCl、N aOH 调pH 值至2、4、6、8、10、12, 静置24 h, 然后用 100 倍液测定其防治黄瓜白粉病

    的保护作用。

    热稳定性的测试: 将大黄提取液装入7 支试管, 每支装5mL , 分别放到- 20、0、20、40、60、80、100℃下处理1 h, 然后用 100 倍液测定其防治黄瓜白粉病的保护作用。

    11214 大黄提取液保护作用的持效期测试 在接种前1、2、3、4、5、6 d 分别用大黄提取液100 倍液处

    理 10 株黄瓜幼苗, 且在接种前1 d 设清水、80%乙醇、粉锈宁1 000 倍液作对照, 统一接种黄瓜白粉病

    菌, 待清水对照严重发病时, 调查各处理病情并记录结果。

    11215 大黄提取液抑菌谱的测试 将1mL 大黄提取液加入到100mL 融化的PDA 培养基中, 倒皿, 用

    直径016 cm 的打孔器打菌盘接种 (设清水、80%乙醇作对照, 每个处理4 个重复)。待对照菌落长到7 cm

    左右, 测量菌落直径, 并计算抑制率[ 6 ]。

    2 结果与分析

    211 大黄提取液防治黄瓜白粉病的保护作用

    大黄提取液防治黄瓜白粉病的保护作用测试结果见表1, 从中可知, 大黄提取液防治黄瓜白粉病具有

    很好的保护作用, 其100 倍液的防效达90114% , 优于粉锈宁的1 000 倍液 (防效为73141% ) , 且在同一

    显著水平上差异显著。其中用作提取液溶剂的80%乙醇出现了负防效 (- 2131% ) , 说明80%乙醇对该

    病无作用。

    表 1 大黄提取液防治黄瓜白粉病的保护作用

    Table 1 P revent ion effect of R 1p a lm atum ext racts on pow dery m ildew of cucumber

    处 理

    T reatment

    平均严重度? %

    A verage

    sever ity

    普遍率? %

    Incidence

    of disease

    病情指数? %

    Index of

    disease

    防效? %

    Effect of

    cont ro l

    5%显著水平

    Signif icance at 5%

    清水Clear w ater 87112 100 87112 0100 a

    80%乙醇 80% ethano l 89113 100 89113 - 2131 a

    粉锈宁T r iadimefon 22116 100 22116 73141 b

    大黄R heum p alm a tum 12127 70 8159 90114 c

    212 大黄提取液稳定性

    大黄提取液酸碱和热稳定性测试结果分别如表2、表3 所示。从表2 可以看出, 大黄提取液经不同酸

    碱值 (pH 2～ 12) 处理后, 其100 倍液的防效均在90%以上, 且处于同一显著水平, 表明其酸碱稳定性

    非常强。从表3 可以看出, 大黄提取液经不同温度处理后, 在- 20～ 80℃之间, 其100 倍液的防效均处

    于 94%左右, 处于同一显著水平, 虽然经100℃处理后其活性有所降低, 但防效仍达78107% , 表明其热

    稳定性亦很强 ......