莪术活血化瘀有效物质研究.PDF
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2006年2月23日
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参见附件(130KB，3页)。
莪术活血化瘀有效物质研究 李 林 陆兔林 卞慧敏 滕建东
南京中医药大学 (江苏 南京 210029)
摘要: 通过体外血小板聚集、大鼠血瘀模型血液流变性及凝血试验,观察莪术不同提取物的活血化瘀作用。采用血小
板聚集功能测定法、血液流变性测定法及小鼠抗凝法观察莪术不同组分活血化瘀作用。结果显示:莪术不同提取物均
具一定的抗血小板聚集、抗凝血及调节血液流变性作用。其中以乙酸乙酯、氯仿提取物活性最强。莪术中姜黄素类成
分为其活血化瘀主要活性成分。本实验为阐明莪术有效物质提供了科学依据。
关键词: 莪术;姜黄素;抗血小板聚集;血液流变性
中图分类号: R 285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1008 - 861X(2004) 03 - 0040 - 03
[基金项目]国家“十五”攻关课题(2001BA701A11) 。
[作者简介]李林(1978 - ) ,男 ,江苏淮安人 ,硕士研究生 ,主要
研究方向为中药炮制及复方。
莪术为姜科植物蓬莪术( Curcuma phaeocaulis)的根茎。其
性辛、苦、温,具有行气破血、消积止痛的功效。主治血气心痛,饮食积滞,脘腹胀痛,血滞经闭,痛经, 瘕痞块,跌打损伤等。
莪术化学成分主要有挥发油、姜黄素、胡萝卜甙等[1]。现代药理
研究显示,莪术具有抗炎、镇痛、抗肿瘤、抑制血小板聚集和抗血
栓形成等一系列药理作用[2]。本实验以体外血小板聚集率、血
液流变状态及抗凝血为指标,对莪术不同提取物进行相关实验
研究,为阐明莪术的有效物质基础提供科学的理论依据。
1 实验材料
药材:蓬莪术购自四川双流县。经我校鉴定教研室陈建伟
教授鉴定为姜科植物蓬莪术 Curcuma phaeocaulis Val .的根茎。
仪器:PPP自动平衡电脑血小板聚集仪(上海医科大学
仪器厂) ;血粘度测定仪。
动物:昆明种小白鼠 ,体重 18～22 g ;SD大鼠 ,雄性 ,180
～220 g ;新西兰大耳白兔 ,体重115～215 kg ,雄性 ,由南京中
医药大学实验动物中心提供。
试剂:戊巴比妥钠、 3. 8 %枸橼酸钠、磷酸缓冲液、 ADP
(中科院上海生化所产品) 、胶原(美国 Sigma 公司产品 ,使用
时加生理盐水研磨成匀浆再稀释) 。丹参片(批号:0207314 ,合肥神鹤双鹿药业有限责任公司) ;盐酸肾上腺素注射液(批
号:011001 ,武汉诺佳药业集团股份有限公司) 。
2 实验方法与结果
2. 1 药液制备
水煎剂制备:称取莪术饮片适量 ,加水煎煮 2 次 ,过滤 ,滤液合并 ,浓缩 1 ∶ 1备用。
莪术挥发油、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取物的制备:取
莪术饮片 ,粉碎成颗粒 ,加水采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油 ,药渣加水煎煮 1 h ,水煎液与上述提油后母液合并 ,离心后 ,浓缩至 100 ml。分别用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分次萃取。
各萃取液回收干溶剂 ,其中挥发油、氯仿、乙酸乙酯提取物用
麻油、吐温280、蒸馏水(1∶ 1∶ 8)配成乳化剂 ,备用;正丁醇提取
物加水调正体积备用。按下列相应图表所示剂量给药。
2. 2 统计方法
采用 t 检验 ,各组实验数据均以( ? x ±s)表示。
2. 3 莪术不同提取物体外抗血小板聚集作用研究
2. 3. 1 对 ADP诱导家兔体外血小板聚集率的影响[ 3 ]
取家兔用普鲁卡因局部麻醉 ,颈动脉插管放血 ,3. 8 %的
枸椽酸钠 1∶ 9 抗凝 ,以 800 r 离心 10min ,取富血小板血浆
(PRP) ,剩余部分以 3 000 r 离心 30 min ,取贫血小板血浆
(PPP) 。聚集诱导剂用 ADP (浓度 40 nmol L) ,用血小板聚
集仪测定莪术各组分血小板聚集率。结果详见表 1。
表 1 莪术不同提取物对ADP诱导的
家兔血小板聚集率(体外)影响
组别 终浓度(g生药 ml) 最大聚集率 IC50 (g生药 ml)
正常组 — 77. 1 ±2. 6
空白组 — 67. 5 ±2. 3
氯仿组1 0. 19 36. 3 ±2. 6 △△
氯仿组2 0. 095 52. 2 ±2. 5 △△ 0. 206
氯仿组3 0. 0475 61. 8 ±2. 9
乙酸乙酯组1 0. 19 34. 9 ±2. 4 △△
乙酸乙酯组2 0. 095 51. 7 ±1. 4 △△ 0. 198
乙酸乙酯组3 0. 0475 60. 6 ±3. 1 △
正丁醇组1 0. 19 51. 1 ±1. 0 △
正丁醇组2 0. 095 64. 1 ±1. 2 0. 408
水液组1 0. 19 68. 9 ±5. 0 3
水液组2 0. 095 72. 0 ±2. 8 0. 734
阿司匹林组 2 g ml 60. 7 ±1. 3 3 3
注: 氯仿组、乙酸乙酯组、正丁醇组与空白组比较, △P < 0105 ,△△P < 0101 ;水液组、阿司匹林组与正常组比较, 3 P < 0. 05 ,3 3 P < 0. 01 ; IC50表示药物对血小板聚集的抑制率为50 %时的剂量。
结果显示:莪术提取物中氯仿组及乙酸乙酯组抗血小板聚
集作用较为明显,两者的 IC50也比较接近,且明显低于其余两
组。氯仿组的量效关系为 Y= - 0. 1657X+ 67. 9 ,R = 019914 ;乙
第 18卷第 3期
2004年 9月
上 海 中 医 药 大 学 学 报
ACTA UNIVERSITATIS TRADITIONIS MEDICAL IS SINENSIS PHARMACOLOGIAEQUE SHANGHAI
VOL. 18 NO. 3
Sep. , 2004
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.酸乙酯组为 Y= - 0. 1712X+ 67. 59 ,R = 0. 996 ;正丁醇组为 Y=
- 0. 0875X+ 69. 47 ,R = 0. 8638 ;水液组为 Y= - 0. 0547X + 78.
63 ,R = 0. 9504 ,各组分量效之间有良好的相关性 ......
南京中医药大学 (江苏 南京 210029)
摘要: 通过体外血小板聚集、大鼠血瘀模型血液流变性及凝血试验,观察莪术不同提取物的活血化瘀作用。采用血小
板聚集功能测定法、血液流变性测定法及小鼠抗凝法观察莪术不同组分活血化瘀作用。结果显示:莪术不同提取物均
具一定的抗血小板聚集、抗凝血及调节血液流变性作用。其中以乙酸乙酯、氯仿提取物活性最强。莪术中姜黄素类成
分为其活血化瘀主要活性成分。本实验为阐明莪术有效物质提供了科学依据。
关键词: 莪术;姜黄素;抗血小板聚集;血液流变性
中图分类号: R 285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1008 - 861X(2004) 03 - 0040 - 03
[基金项目]国家“十五”攻关课题(2001BA701A11) 。
[作者简介]李林(1978 - ) ,男 ,江苏淮安人 ,硕士研究生 ,主要
研究方向为中药炮制及复方。
莪术为姜科植物蓬莪术( Curcuma phaeocaulis)的根茎。其
性辛、苦、温,具有行气破血、消积止痛的功效。主治血气心痛,饮食积滞,脘腹胀痛,血滞经闭,痛经, 瘕痞块,跌打损伤等。
莪术化学成分主要有挥发油、姜黄素、胡萝卜甙等[1]。现代药理
研究显示,莪术具有抗炎、镇痛、抗肿瘤、抑制血小板聚集和抗血
栓形成等一系列药理作用[2]。本实验以体外血小板聚集率、血
液流变状态及抗凝血为指标,对莪术不同提取物进行相关实验
研究,为阐明莪术的有效物质基础提供科学的理论依据。
1 实验材料
药材:蓬莪术购自四川双流县。经我校鉴定教研室陈建伟
教授鉴定为姜科植物蓬莪术 Curcuma phaeocaulis Val .的根茎。
仪器:PPP自动平衡电脑血小板聚集仪(上海医科大学
仪器厂) ;血粘度测定仪。
动物:昆明种小白鼠 ,体重 18～22 g ;SD大鼠 ,雄性 ,180
～220 g ;新西兰大耳白兔 ,体重115～215 kg ,雄性 ,由南京中
医药大学实验动物中心提供。
试剂:戊巴比妥钠、 3. 8 %枸橼酸钠、磷酸缓冲液、 ADP
(中科院上海生化所产品) 、胶原(美国 Sigma 公司产品 ,使用
时加生理盐水研磨成匀浆再稀释) 。丹参片(批号:0207314 ,合肥神鹤双鹿药业有限责任公司) ;盐酸肾上腺素注射液(批
号:011001 ,武汉诺佳药业集团股份有限公司) 。
2 实验方法与结果
2. 1 药液制备
水煎剂制备:称取莪术饮片适量 ,加水煎煮 2 次 ,过滤 ,滤液合并 ,浓缩 1 ∶ 1备用。
莪术挥发油、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取物的制备:取
莪术饮片 ,粉碎成颗粒 ,加水采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油 ,药渣加水煎煮 1 h ,水煎液与上述提油后母液合并 ,离心后 ,浓缩至 100 ml。分别用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分次萃取。
各萃取液回收干溶剂 ,其中挥发油、氯仿、乙酸乙酯提取物用
麻油、吐温280、蒸馏水(1∶ 1∶ 8)配成乳化剂 ,备用;正丁醇提取
物加水调正体积备用。按下列相应图表所示剂量给药。
2. 2 统计方法
采用 t 检验 ,各组实验数据均以( ? x ±s)表示。
2. 3 莪术不同提取物体外抗血小板聚集作用研究
2. 3. 1 对 ADP诱导家兔体外血小板聚集率的影响[ 3 ]
取家兔用普鲁卡因局部麻醉 ,颈动脉插管放血 ,3. 8 %的
枸椽酸钠 1∶ 9 抗凝 ,以 800 r 离心 10min ,取富血小板血浆
(PRP) ,剩余部分以 3 000 r 离心 30 min ,取贫血小板血浆
(PPP) 。聚集诱导剂用 ADP (浓度 40 nmol L) ,用血小板聚
集仪测定莪术各组分血小板聚集率。结果详见表 1。
表 1 莪术不同提取物对ADP诱导的
家兔血小板聚集率(体外)影响
组别 终浓度(g生药 ml) 最大聚集率 IC50 (g生药 ml)
正常组 — 77. 1 ±2. 6
空白组 — 67. 5 ±2. 3
氯仿组1 0. 19 36. 3 ±2. 6 △△
氯仿组2 0. 095 52. 2 ±2. 5 △△ 0. 206
氯仿组3 0. 0475 61. 8 ±2. 9
乙酸乙酯组1 0. 19 34. 9 ±2. 4 △△
乙酸乙酯组2 0. 095 51. 7 ±1. 4 △△ 0. 198
乙酸乙酯组3 0. 0475 60. 6 ±3. 1 △
正丁醇组1 0. 19 51. 1 ±1. 0 △
正丁醇组2 0. 095 64. 1 ±1. 2 0. 408
水液组1 0. 19 68. 9 ±5. 0 3
水液组2 0. 095 72. 0 ±2. 8 0. 734
阿司匹林组 2 g ml 60. 7 ±1. 3 3 3
注: 氯仿组、乙酸乙酯组、正丁醇组与空白组比较, △P < 0105 ,△△P < 0101 ;水液组、阿司匹林组与正常组比较, 3 P < 0. 05 ,3 3 P < 0. 01 ; IC50表示药物对血小板聚集的抑制率为50 %时的剂量。
结果显示:莪术提取物中氯仿组及乙酸乙酯组抗血小板聚
集作用较为明显,两者的 IC50也比较接近,且明显低于其余两
组。氯仿组的量效关系为 Y= - 0. 1657X+ 67. 9 ,R = 019914 ;乙
第 18卷第 3期
2004年 9月
上 海 中 医 药 大 学 学 报
ACTA UNIVERSITATIS TRADITIONIS MEDICAL IS SINENSIS PHARMACOLOGIAEQUE SHANGHAI
VOL. 18 NO. 3
Sep. , 2004
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.酸乙酯组为 Y= - 0. 1712X+ 67. 59 ,R = 0. 996 ;正丁醇组为 Y=
- 0. 0875X+ 69. 47 ,R = 0. 8638 ;水液组为 Y= - 0. 0547X + 78.
63 ,R = 0. 9504 ,各组分量效之间有良好的相关性 ......
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