3简报 3

    陈皮提取液抗氧化及延缓衰老作用的研究

    苏 丹3

    秦德安

    (华东师范大学生物系 上海 200062)

    陈皮是由芸香科柑桔类果品的果皮加工而成的中药材 ,资源十分丰富。据中华药典记载 ,陈皮主要成

    分有橙皮苷、挥发油等。其药理作用能抑菌、兴奋心脏、扩张血管、抑制肠胃运动 ,历来被用作健脾理气、和

    中消滞。关于陈皮提取液( EM)抗氧化作用 ,除作者等[ 1 ]

    曾报道甜橙皮提取物具有清除 O· 2 作用(邻苯三酚

    自氧化法)及抑制由 O· 2 诱导的膜脂过氧化作用外 ,陈皮的延缓衰老作用至今未见报道。为此本文进一步

    研究了 EM对多种活性氧的清除作用及抗膜脂过氧化作用 ,并以果蝇为实验动物 ,观察了 EM 的抗衰老作

    用。

    1 材料与方法

    1. 1 材料与仪器

    果蝇:美国野生型黑腹果蝇(D. melanogaster)

    陈皮提取液:陈皮购自中药店 ,用乙醇提取。生药量与乙醇比例为 1∶ 50 (W∶ W) ,提取液经浓缩后为原

    液 ,原液中橙皮苷含量为 7. 36 %。

    试剂:四乙氧基丙烷为 Sigma产品;邻苯三酚为遵义第二化工厂产品;

    SOD标准品(400万 u g)为华东化工学院提供 ,其余试剂均为国产分析纯。

    仪器:日立 850型荧光分光光度计 ,SHG- 1型生物化学发光测定仪。

    1. 2 实验方法

    1. 2. 1 羟自由基的清除实验:参照番红花红褪色法[ 2 ]

    进行 ,氧化对照以 pH 7. 4 的磷酸缓冲液代替 EM。

    按下式计算清除率( E%) :

    E% =

    A样品 - A氧化对照

    A空白对照 - A氧化对照

    ×100

    1. 2. 2 超氧阴离子的清除实验:参照邻苯三酚自氧化化学发光法测定[ 3 ]。按下式计算清除率( E%) :

    E% =

    A对照 - A样品

    A对照

    ×100

    1. 2. 3 过氧化氢的清除实验:参照文献[ 4 ]

    进行 ,清除率计算同 1. 2. 2

    1. 2. 4 抗膜脂质过氧化实验:人红细胞膜制剂按Dodge法[ 5 ]

    制备 ,用 Fenton反应产生的· OH( Fe

    2 +

    终浓度

    为 0. 75mmol L)处理红细胞膜制剂 ,条件按文献[ 6 ]

    进行。膜 MDA含量按荧光法[ 7 ]

    测定 ,按下式计算抑制

    率:

    抑制率( %) =

    MDA氧化对照 - MDA样品

    MDA氧化对照 - MDA空白对照

    ×100

    1. 2. 5 果蝇寿命实验:果蝇培养条件和生存实验参照王氏方法[ 8 ]

    进行。以人参皂苷为阳性对照。

    2 结 果

    2. 1 EM对活性氧的清除作用:表 1 说明 ,EM对· OH有显著清除作用( P < 0. 01) 。且呈剂量依赖关系。

    3

    现在上海铁道大学医学院工作。

    本文于 1997年 10 月收到。

    第一作者:女 ,1973年生 ,助教。

    第 1期

    1999 年 3 月

    华东师范大学学报(自然科学版)

    Journal of East China Normal University (Natural Science)

    No. 1

    Mar. 1999

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.其中清除 50 %· OH约需 9. 6ul EM , 相当于 0. 5mg苯甲酸的清除效率。EM对 O· 2 有显著清除作用( P < 0.

    01) ,且有量效关系 ,清除 50 % O· 2 约需 44 μl EM ,相当于 4. 25u SOD的清除作用。不同剂量的 EM 可不同

    程度清除 H2O2 ,且清除效果明显( P < 0. 01) 。

    2. 2 EM对膜脂过氧化作用的影响:红细胞膜制剂经· OH处理后发生脂质过氧化作用 ,表现为脂质过氧化

    产物(MDA)含量升高 ,而在膜制剂中预先加入一定量的 EM ,再经· OH处理 ,其脂质过氧化作用被明显抑

    制( P < 0. 01) ,抑制率与 EM剂量有一定的量效关系(表 2) ......