方药揽胜

    冬虫夏草对人类嗜中性白血球活化影响研究 Influence of Cordyceps on PMN Activation of Human Race

    林口长庚纪念医院中医分院中医内科一科 TCMBranch Hospital of Linkou Changgeng Memorial Hospital ,Taiwan

    (台湾 桃园)

    林胤谷 LIN Yin2gu

    陈俊良 CHEN Jun2liang

    吴宜鸿 WU Yi2hong

    上海中医药大学 Shanghai University of Traditional Chinese Medicine

    (上海 200032)

    陈以平 CHEN Yi2 ping

    林口长庚纪念医院中医分院一般内科 ,长庚大学中医系 Department of TCM,Changgeng University

    (台湾 桃园)

    杨贤鸿 YANG Xian2hong

    摘要: 为研究冬虫夏草对人类嗜中性白血球活化的影响 ,征取健康年轻自愿者男女共 60 人 ,以双盲随机法分为天然冬虫夏草组(实验组) 和安慰剂组(对照组) 。每次服用药物的剂量为

    500mg ,1日3次 ,服用1个月。服用前后检测嗜中性白血球的吞噬功能;并以酵素连结免疫吸收分

    析法(ELISA)测sICAM21、 PGE2和LTC4含量。结果显示冬虫夏草组的嗜中性白血球吞噬功能下降 ,sICAM- 1和 PGE2浓度也显著下降 ,LTC4 浓度不变 ,但此种情形并没有出现在安慰剂组。提示冬

    虫夏草似可透过 Cyclooxygenase pathway的代谢抑制作用 ,进而影响炎症反应的产生 ,对于人类周边

    白血球活化状态有明显抑制作用。

    关键词: 冬虫夏草(CS) ;嗜中性白血球(PMN) ;吞噬功能(Phagocytosis) ;可溶性细胞间粘附分

    子(sICAM- 1) ;前列腺素 E2 (PGE2) ;白三烯 C4 (LTC4)

    中图分类号: R 285. 6 文献标识码: A 文章编号: 1007 - 1334(2003) 03 - 0049 - 03

    [作者简介] 林胤谷(1965 - ) ,男 ,台湾宜兰人 ,主治医师 ,学

    士 ,主要从事中医皮肤病研究。

    冬虫夏草是虫草菌(Cordyceps sinensis) 寄生在

    虫草蝙蝠蛾(Hepialus armoricanus Obertlur)等幼虫体

    后的菌合虫的复合体。生长于四川、青海、云南等

    地。清代赵学敏《本草纲目拾遗》 [1 ]

    载“夏草冬虫味

    甘 ,性温” ;主要作用为“保肺气、实腠理” , “益肾 ,补

    精髓”。其治疗经验主要是“治诸虚百损 ,宜老人 ,与

    荤蔬作肴炖食或与鸭肉同煮则大补”。中医理论认

    为冬虫夏草有补虚损 ,益精气 ,保肺益肾 ,止血化痰 ,治劳嗽等作用。现代药理学证明 ,冬虫夏草含 10 余

    种胺基酸及微量元素[2 ]

    ,是一种具有多种药理作用

    的滋补强壮中药材[3 ]。目前有关冬虫夏草对人类嗜

    中性白血球(PMN)影响的研究很少 ,而 PMN的调控

    异常与慢性发炎反应过程中的许多媒介物质如细胞

    激素(Cytokines) 、白细胞介素(interleukins , IL) 、 PGE2、LTC4 等均有密切关系。本实验研究的目的就在于

    探索冬虫夏草对人类 PMN 对炎症反应的调控的影

    响。

    一、材料和方法

    1. 材料

    药材: 将天然冬虫夏草磨成粉末制做成胶囊 ,每颗净重为500mg ,每次服用1粒 ,1 天服用 3 次 ,服

    用时间 1 个月。以淀粉为安慰剂 ,其外观及服用方

    法与天然冬虫夏草组完全相同。

    实验对象: 征取健康年轻自愿者60人 ,男性30

    人 ,女性30 人 ,平均年龄 3215 岁。随机分为两组 ,每组30人 ,以双盲法给药 ,服用天然冬虫夏草的为

    第37卷第3期

    2003年3月

    上 海 中 医 药 杂 志

    SHANGHAI JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESEMEDICINE

    VOL. 37 NO. 3

    MAR. , 2003

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.实验组 ,另一组服用安慰剂作为对照组。冬虫夏草

    组 ,男性15人 ,女性15人 ,平均年龄为 33 岁。安慰

    剂组 ,男性15人 ,女性15 人 ,平均年龄为 32 岁。实

    验过程中如有服用其他药物或身体不适者则不列入

    观察对象。

    2. 方法

    服用前和服用后 1 个月 ,分别抽取健康年轻自

    愿者的静脉血液与抗凝剂 Heparin (10U ml)混合均

    匀。

    (1) 使用全血进行流式细胞仪分析 PMN 的吞

    噬功能

    使用 5ml 小试管取全血 50 μl 加入 RPMI - 1640

    50 μl 用以稀释全血中的细胞 ,再加入 50 μl 含有荧光

    的小乳胶粒 (polysciences Inc. ,CA 0766) ,混合均

    匀。将管口用封口胶封住 ,置于 37 ℃水浴摇动(150

    ～250rpm ,30min) 。离心(1500rpm ,5min) ,去上清液

    加入1ml PBS均匀混合 ,随后缓缓加入2ml FBS的小

    试管中 ,使之分层 ,离心 (1500rpm , 5min) 。去上层

    液 ,加入2ml 的红血球溶解液均匀混合 ,置于暗处20

    ～30min ,再离心 (1500rpm 5min) 。去上清液 ,加入

    2ml PBS冲洗细胞 ,再离心(1500 rpm ,5min) ;去上清

    液 ,加入015～110ml PBS ,即可使用流式细胞仪分析

    PMN的吞噬功能。

    (2) 分离 PMN 以酵素连结免疫吸收分析法测

    量 sICAM- 1、 PGE2 和LTC4

    取 10ml 的血液检体与等体积的 HBSS在 50ml

    的离心管中混合后 ,缓缓加入 Ficoll Hypaque (淋巴球

    分离液) 10ml ,然后用 2500rpm离心 20min ,离心后去

    掉上层液 ,留下最底层的血球沉淀物 ,加入红血球溶

    解缓冲液 ,10～15min 后离心 1500rpm 10mins ,去掉

    上清液 ,即可得沉淀于底层的 PMN ......