高效液相色谱法测定生姜中的62姜酚

    张雪红1

    ,李华昌X2

    (1. 桂林工学院材化系 ,桂林541004 ;2. 北京矿冶研究总院测试所 ,北京 100044)

    摘 要:用 C18色谱柱 ,以 V (甲醇)∶ V (水)∶ V (冰乙酸) = 35∶ 64∶ 1溶液作流动相 ,进样量5μ L ,在流速1. 0 mLP min 下 ,可不经分离直接测定生姜中的 62姜酚。方

    法 RSD小于1. 00 % ,回收率97 %～102 % ,相关系数0. 9999。

    关键词:高效液相色谱;测定;62姜酚

    中图分类号:O657. 7 文献标识码:A 文章编号:100020720 (2005) 0320008202

    作为生姜中的主要药物活性成分 ,已证实62姜

    酚具有多种药用价值[1～5 ]

    :健胃与抗胃溃疡作用 ,保肝利胆作用 ,强心作用 ,消炎作用 ,对中枢神经抑

    制作用 ,抗氧化作用 ,抗肿瘤作用。因此 62姜酚的

    准确测定 ,无论对于药效研究、加工工艺还是品种

    选育都具有重要的意义。目前文献报道的 HPLC

    测定姜酚的方法[6 ,7 ]

    有两方面的不足:一方面 ,测定

    的是姜酚总量 ,无法测定 62姜酚的单独含量;另一

    方面 ,在所提供的色谱条件下 ,姜酚的色谱峰与附

    近的杂质峰之间的分离度 R 小于1. 6 ,色谱峰部分

    重叠 ,导致测定结果准确度较低。在本文所提供的

    色谱条件下 ,62姜酚可获得很好的分离 ,较好地解

    决了这两方面的问题。

    1 实验部分

    1. 1 仪器与试剂

    高效液相色谱 Waters 510 系统;WatersTM 486

    可变波长紫外吸收检测器;Millennium 2000 数据处

    理系统(以上为美国沃特斯公司产品) ;Millipore 溶

    剂过滤系统(美国密理博公司) 。

    62姜酚纯品(进口分装 ,由长沙福科特生化公

    司提供) ;甲醇、乙腈、四氢呋喃和冰乙酸为分析纯;

    实验用水为去离子水。

    1. 2 色谱条件

    液相色谱柱:μ Bondpak C18 (3. 9 mm ×300 mm ,10μm , 美国沃特斯公司) ;流速:1. 0 mLP min ;流动

    相:V (甲醇)∶ V (水)∶ V (冰乙酸) = 35∶ 64∶ 1 ;检测波

    长:280 nm;进样量:5μ L。

    1. 3 实验方法

    将干生姜制成粉末 ,过孔径为01147 mm筛 ,准

    确称取 1. 0000 g ,置于 20 mL 比色管中 ,加甲醇 10

    mL ,静置浸泡12 h ,其间超声溶解 2～3 次 ,每次 10

    min ,12 h 后过滤 ,滤液转移至 50 mL 容量瓶中 ,残

    渣再浸泡两次 ,每次 1 h ,过滤 ,合并滤液至同一容

    量瓶中。用去离子水定容至刻度 ,摇匀 ,进样 ,按

    1. 2色谱条件进行 HPLC测定。

    2 结果与讨论

    2. 1 色谱条件选择

    2. 1. 1 检测波长的选择 取 62姜酚纯品适量 ,用

    流动相溶解 ,测定62姜酚在190～400 nm 区间的吸

    收光谱。经紫外光谱扫描得知 ,62姜酚在 230 和

    280 nm处有最大吸收。虽然230 nm处的吸收强于

    280 nm ,但一方面在 230 nm 处存在溶剂吸收峰的

    干扰 ,另一方面230 nm处检测器的稳定性较差 ,所

    以选用280 nm为检测波长。

    2. 1. 2 流动相组成的选择 分别以 V (乙腈)∶ V

    (水)∶ V (冰乙酸) = 41∶ 58∶ 1、 V (四氢呋喃)∶ V (水)∶

    V (冰乙酸) = 42∶ 57∶ 1、 V (甲醇) ∶ V (水) ∶ V (冰乙

    酸) = 55∶ 44∶ 1、 V (甲醇) : V (乙腈)∶ V (水)∶ V (冰乙

    酸) = 50∶ 5∶ 44∶ 1做流动相 ,在同样的色谱条件下进

    行 HPLC分析 ,结果发现 ,以甲醇2水2冰乙酸做流动

    相 ,62姜酚可获最好分离 ......