·药材与资源·

    黄芩组织培养快速繁殖技术的优化

    高山林, 陈柏君X

    (中国药科大学 遗传育种教研室, 江苏 南京 210038)

    摘 要: 目的 建立和优化黄芩组织培养克隆化快速繁殖技术, 为保护黄芩的野生资源, 发展人工资源和探讨育种

    新途径奠定基础。方法 在组织培养条件下进行黄芩愈伤组织的诱导、分化, 试管苗复壮和生根等一系列技术优化

    试验。结果 黄芩试管苗的节、节间都很容易诱导出愈伤组织, 诱导率均达 100% , 而叶片的愈伤组织诱导率低,PP333对黄芩试管苗的生长有着显著的矮壮作用。结论 黄芩试管苗的节是诱导愈伤组织的理想外植体, 在培养基

    中适当添加PP333能显著改善试管苗的素质; PP333与激素的配合使用, 能十分有效地调控黄芩愈伤组织的分化、试

    管苗的生长与生根, 并能显著提高移栽成活率。

    关键词: 黄芩; 组织培养; 快速繁殖

    中图分类号: R282121 文献标识码:A 文章编号: 0253 2670 (2004) 03 0312 04

    Opt im iza t ion on clon ing rap id-propaga t ion technology

    by t issue culture in Scu tel la r ia ba ica lens is

    GAO Shan2lin, CHEN Bai2jun

    (Depar tment of Genet ics and B reeding, Ch ina Pharmaceut icalU niversity, N anjing 210038, Ch ina)

    Abstract : Object To estab lish and op t im ize the techno logy of clon ig rap id p ropagat ion by t issue cu l2

    tu re in S cu tel la ria ba ica lensis Geo rgi fo r the p ro tect ion and developm en t of natu re resou rce asw ell as seek2

    ing fo r new b reeding w ay of S 1 ba ica lensis by b io techno logy1Methods Research on the op t im ized tech2

    no logy of t issue cu ltu re including callu s inducing, differen t iat ion, p lan t let p ropagat ion, and roo t ing w ere

    designed1 Results Callu s cou ld be induced f rom nodes and in ternodes easilyw ith 100% inducing rate com2

    pared w ith that f rom leaves1 PP333 has sign if ican t stocky effect to the p lan t let s1 Conclus ion The nodes

    are good exp lan t sou rce in inducing callu s1 PP333 in cer tain concen t rat ion w h ich is added to cu ltu re m edia

    cou ld imp rove and regu late the differen t iat ion of callu s and grow th of p lan t let s as w ell as increase the su r2

    vival rate of cu lt ivated seeding1

    Key words: S cu tel la ria ba ica lensis Geo rgi ; t issue cu ltu re; rap id2 p ropagat ion

    黄芩为唇形科植物 S cu tel la ria ba ica lensis

    Geo rgi 的干燥根, 具有清热、燥湿、解毒、止血之功

    效; 用于治疗发热烦渴、肺热咳嗽、泻痢热淋、湿热黄

    疸、胎动不安、痈肿疮毒等症。黄芩的临床疗效确切,为常用中药之一。近年来, 临床上对黄芩药材的需求

    量大增, 黄芩野生资源破坏严重, 因此, 不少学者呼

    吁对黄芩的资源进行保护和培育的研究, 黄芩组织

    培养是解决黄芩资源短缺的有效途径之一。有关研

    究目前已有一些报道: 日本山本久之等[ 1 ]

    将黄芩茎

    切成5mm 长的节断接种于L S 培养基中, 得到了淡

    褐色的愈伤组织; 秦金山等[ 2 ]

    用黄芩种子发芽的子

    叶和下胚轴为外植体, 接种在M S 培养基上, 经培养

    可得到愈伤组织, 继续培养, 即可从愈伤组织直接分

    化出苗, 但分化率较低, 仅为12%。黄芩试管苗生根

    率最高为 4117% , 而且苗生根少而细弱, 或较短, 且

    生长缓慢。由此可见黄芩组织培养虽然能够成功, 但

    是要达到黄芩试管苗克隆化, 规模化生产, 在技术上

    有较大的难度。为此, 在承担国家中医药局重点科研

    项目——黄芩组织培养多倍体育种技术研究中, 把

    黄芩的组织培养技术的优化和大量快速繁殖作为重

    点需要解决的难点, 进行了一系列培养基试验, 获得

    了较好的结果。现报道有关的试验结果, 本研究对于

    保护黄芩的野生植物资源, 培育黄芩优良品种并进

    行克隆化快速繁育, 在尽量短的时间内繁育出优良

    · 213 · 中草药 Ch inese T radit ional and HerbalD rugs 第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月

    X 收稿日期: 2003210208

    基金项目: 国家中医药局重点科研项目(97A 302)

    作者简介: 高山林(1946—) , 男, 江苏省江阴市人, 硕士, 1967 年毕业于南京农业大学遗传育种专业, 现任中国药科大学教授, 长期从事 药用植物生物技术的研究。

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.品种种苗, 供生产上示范推广具有重要意义和应用

    价值。

    1 材料和方法

    111 材料: 黄芩种子由我国黄芩道地产区——河北省

    承德地区药材公司提供, 经中国药科大学生药学博士

    余伯阳教授鉴定为S cu tel la ria ba ica lensis Geo rgi。

    112 方法

    11211 黄芩无菌试管苗的获得: 取黄芩种子用自来

    水漂洗干净后放入 75%乙醇中消毒 1 m in, 转入

    011%氯化汞溶液中消毒 10 m in, 然后用无菌水冲

    洗5 次, 接种在M S 基本培养基上无菌萌发, 15 d 后

    获得无菌苗, 在附加 62 BA 012 m g? L 的M S 培养基

    上不断继代保存。

    11212 黄芩愈伤组织的诱导: 取黄芩试管苗 015

    cm 左右的节、节间和切成 015 cm 见方的叶片分别

    接种于M S+ 62 BA 210 m g? L + IAA 012 m g? L 及

    M S+ 62 BA 110m g? L + IAA 012m g? L 两种培养基

    中, 其中含蔗糖 3% , pH518, 培养条件为(25±1)

    ℃, 暗培养 ......