数字化色谱指纹图谱用于连翘的质量控制

    曾 志3

    , 张艳萍 , 李 核 , 陶敬奇 , 杨 挺

    (华南师范大学化学系分析测试中心 ,广东 广州 510631)

    收稿日期: 20042 032 16

    基金项目:广东省科技计划项目重大专项 (No . A 301020101) ,广东省自然科学基金项目 (No . 011442) ,广东省教育厅高校自然科学研究项

    目 (No . 0124) ,广东省中医药局科研项目 (No . 403047, 401039)资助。

    作者简介:曾 志 (1962～) ,男,湖南岳阳人,教授、 博士,电话 0202 85214829,主要从事指纹图谱质控技术与中药现代化等领域的研究以及

    化工和制药行业的生产、 经营管理。

    关键词:连翘; 指纹图谱; 高效液相色谱; 质量控制

    摘要:目的:建立连翘液相色谱指纹图谱 ,为连翘在中药以及中药制剂的合理利用提供依据。方法:优选萃取条件 ,采用

    液相色谱法对不同产地的连翘进行指纹图谱研究。液相色谱条件: I nertsil ODS柱 , 5 ? 的乙腈水溶液与 2 的醋酸水溶

    液作梯度洗脱 ,检测波长为 270 nm。结果:实验方法的重现性、 样品的稳定性和仪器的精密度均获得良好的结果。结论:

    指纹图谱法简便 ,可靠、 准确 ,可用于区分不同产地的连翘。

    中图分类号: R284 . 1 文献标识码:A 文章编号: 10012 1528 (2005) 052 05012 04

    Appl i ca tion of chroma tograph2 d i g iti zed f i ngerpr i nt i n qua lity a ssessment of F or2

    syth ia Suspensa ( thunb . ) Vahl

    ZENG Zhi, ZHANG Yan2 p ing, L I He, T AO J ing2 qi, YANG Ting

    (Analysis and Testing Center , Depar m ent of Chem istr y, South China N or m al Univer sity, Guanzhou 510631, China)

    KEY WORDS: For sy thia Suspensa, digitized fingerp rint (DFPS) , HPLC, quality control

    ABSTRACT: A I M: To establish an effective finger p rint of For sythia S uspensa, t o be app lied t o identificati on .

    METHODS: A gradient separated method was app lied with inertsil ODS2 3 and with eluent water ( 5 acet oni2

    trile) 2 water (2 acetic acid) . Detecti on wavelength was set at 290 nm. RESULTS: In comparis on with finger2

    p rints of 13 samp les of Fructus Forsythiae, thismethod had high sensitivity, good rep r oducibility and good stability .

    CONCLUS I ON: Thismethod can be app lied in identificati on of Fructus Forsythiae that come fr om different areas

    and different s ources .

    连翘 ,为木犀科植物连翘 ( For sy thia Suspense ( Thunb . )

    Vahl)的干燥果实。它始载于《神农本草经 》 ,又名旱连

    子[ 1 ]。它性平味微苦 ,具有清热解毒 ,疏散风热 ,消痈散结和

    利尿之功效。现代药理研究表明其具有抗菌、 抗病毒等作

    用 ,常用于急性胃炎 ,呼吸道感染等病症。据报道 ,连翘的主

    要化学成分为桦木酸、 熊果酸、 连翘苷、 牛蒡苷、 罗汉松脂苷、松脂素以及具有抗菌活性的连翘醇苷等[ 2 ]。

    为了能够更全面的鉴别连翘药材 ,本文对连翘提取物的

    提取条件和液相色谱条件进行了优化 ,利用高效液相色谱指

    纹图谱技术对不同产地的连翘进行了分析。建立了连翘的

    液相色谱指纹图谱。这对于区别药材的产地具有一定的指

    导意义。

    1 实验部分

    1 . 1 仪器、 试剂与药材

    Waters 600高效液相色谱仪 ,Waters 2487双波长紫外检

    测器 , HS色谱数据工作站 (杭州英谱科技开发有限公司 ) ,流动相所用乙腈、 甲醇均为色谱纯 ,冰醋酸为分析纯 ,供试液

    制备所用甲醇、 正丁醇、 丙酮、 乙酸乙酯均为分析纯 ,二次重

    蒸馏水。连翘药材采收于 2002年 ,按《中华人民共和国药

    典 》 规定中药材取样法取样 13批 ,其批号为 1～13。其产地

    见表 1。

    1 . 2 液相色谱条件

    色谱柱: I nertsil ODS2 3 (5μm, 150 mm × 4 . 6 mm) ,流动

    相: 5 的乙腈水溶液 (A)与 2 醋酸水溶液 (B)梯度洗脱

    (表 2) ,流速 1 . 2 mL·min

    - 1

    ,检测波长 270 nm,柱温40 ° C,进样量 10μL。

    105

    2005年 5月

    第 27卷 第 5期

    中 成 药

    Chinese Traditi onal PatentMedicine

    May 2005

    Vol . 27 No . 5

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.表 1 药材来源

    Table 1 Source of F . suspensa samples

    编号 规格 产地

    1 青翘 河南焦作

    2 老翘 河南三门峡

    3 青翘 河南南阳

    4 青翘 安徽亳州

    5 青翘 陕西渭南

    6 青翘 广东广州

    7 青翘 河南三门峡

    8 老翘 河南焦作

    9 老翘 产地不祥

    10 老翘 河南嵩县

    11 老翘 河南焦作

    12 青翘 河南焦作

    13 老翘 山西临汾

    表 2 梯度洗脱程序

    Table 2 procedure of grad i en ts

    时间 (min) A (5 的乙腈水溶液) B (2 醋酸水溶液)

    0 0 100

    10 20 80

    25 60 40

    35 100 0

    50 0 100

    2 结果与讨论

    2 . 1 不同提取方法的比较

    方法 1 称取第 13批号连翘药材 30 g于 500 mL圆底烧瓶

    中 ,加 200 mL蒸馏水 ,油浴回流 5 h,过滤 ,用正丁醇萃取 3

    次 (20 mL, 15 mL, 15 mL ) ,合并萃取液 ,挥干溶剂 ,得残留

    物 ,并称量 ,用甲醇定容至 20 mL。再吸取 5 mL过 0 . 45μm

    滤膜 ,滤液即为色谱样品 ,进 HPLC分析 ......