紫花苜蓿的愈伤组织诱导及组织培养.PDF
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2006年2月23日
第1页 |
参见附件(76KB,3页)。
收稿日期: 2003207219 ; 修订日期: 2004203220
基金项目: 北京市教委资助项目 (01KJ2087 , 2002KJ074) 、北京市农业应用新技术重点实验室资助项目 ( KF 2003203)
作者简介: 杨起简, 女, 1952 年出生, 教授, 研究方向为基因工程
紫花苜蓿的愈伤组织诱导及组织培养
杨起简1
, 周 禾2
, 孙 彦2
, 路 苹1
(
1
北京农学院生物技术系, 北京 1022062
中国农业大学草地所, 北京 100094 )
摘要: 紫花苜蓿以其品质优良、易于栽培的特点 , 在饲料牧草中占有重要地位。本实验对苜蓿子叶、下胚轴
的愈伤组织诱导进行了研究。结果表明 , MS + 2 , 42D (2 mg L) 、MS + 62BA (2 mg L) 、1 2MS + NAA
(015 mg L) 分别是紫花苜蓿的愈伤组织、芽、根的适宜诱导培养基。
关 键 词: 紫花苜蓿; 子叶 ; 下胚轴 ; 组织培养
中图分类号: S812 文献标识码: A 文章编号: 100223186 (2004) 0220028203
Study on Induction Callus of Alfalfa and Its Tissue Culture
YAN G Qi2jian1
, ZHOU He
2
, SUN Yan2
, LU Ping1
(
1
Beijing Agricultural College , Beijing 102206 ;
2
China Agricultural University , Beijing 100094 )
Abstract :Purple flower clover with it s good quality , easy to cultivation , occupies an important position in an2
imal feed herbage. This text studied induction of the seedling cotyledon and hypocotyls of alfalfa. The result
showed that MS + 2 ,42D(2mg L) 、 MS + 62BA(2mg L) 、 MS + NAA(0. 5mg L) were good inducible cul2
ture mediums for restoring the tissue , bud and root .
Key words :Alfalfa ; seedling cotyledon ; hypocotyls ; tissue culture
近年来随着分子生物学的发展而兴起的DNA重组技术和转基因研究 ,要求植物组织培养操作技术
达到更高的水平。豆科牧草是最具有经济价值和营养价值牧草之一。紫花苜蓿具有饲用价值好(每千克
干物质平均含 017 个饲料单位) 、蛋白质含量高(约占干物质的 20 %)及在生长期间不用大量施用 N 肥
(具有固 N 根瘤菌)等特点 ,在畜牧业生产中长期以来发挥着重要作用 ,被人们冠以“牧草之王”的美
誉[124 ]。但是苜蓿的遗传改良工作相对滞后。苜蓿属内有 60 多个种 ,具有丰富的遗传资源 ,且野生苜蓿
在抗逆性、适应性等方面均优于栽培种苜蓿 ,如将其优良性状转移到后者就能进一步扩大苜蓿的种植范
围 ,提高产草量为生产服务。苜蓿常规有性杂交往往得不到种子或杂种不育 ,存在着不亲和现象 ,生物技
术的发展促进了远缘间遗传物质的重组研究。另外将一些优良基因导入或通过物理、化学手段诱变培养
优质高产多抗新品种是现代育种科学的发展方向 ,基因片段的转入及诱变处理对象多是具有分化再生能
力的愈伤组织 ,通过细胞的分裂增殖、分化、发育最终长成完整植株。本实验通过苜蓿无菌苗的子叶和下
胚轴的愈伤组织培养探讨其成苗过程中的特点 ,为其进一步利用提供参考。
1 材料和方法
111 实验材料 实验材料选取准噶尔苜蓿品种 ,由中国农业大学草地所提供。
112 外植体来源 外植体采用由无菌苗得到的子叶和下胚轴切段。将苜蓿种子用自来水冲洗 2 min ,滤
第 19 卷 第 2 期
2004年 4 月
北 京 农 学 院 学 报
JOURNAL OF BEIJ IN G AGRICUL TURAL COLL EGE
Vol . 19 , No. 2
Apr. , 2004
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.纸吸干种子表面水分后用75 %酒精浸几秒钟再用013 %升汞溶液消毒 ,接种后经2 d培养种子可萌发 ,待
长出 2 片小子叶未长出真叶时即可取其不同部位作为外植体进行培养 ......
基金项目: 北京市教委资助项目 (01KJ2087 , 2002KJ074) 、北京市农业应用新技术重点实验室资助项目 ( KF 2003203)
作者简介: 杨起简, 女, 1952 年出生, 教授, 研究方向为基因工程
紫花苜蓿的愈伤组织诱导及组织培养
杨起简1
, 周 禾2
, 孙 彦2
, 路 苹1
(
1
北京农学院生物技术系, 北京 1022062
中国农业大学草地所, 北京 100094 )
摘要: 紫花苜蓿以其品质优良、易于栽培的特点 , 在饲料牧草中占有重要地位。本实验对苜蓿子叶、下胚轴
的愈伤组织诱导进行了研究。结果表明 , MS + 2 , 42D (2 mg L) 、MS + 62BA (2 mg L) 、1 2MS + NAA
(015 mg L) 分别是紫花苜蓿的愈伤组织、芽、根的适宜诱导培养基。
关 键 词: 紫花苜蓿; 子叶 ; 下胚轴 ; 组织培养
中图分类号: S812 文献标识码: A 文章编号: 100223186 (2004) 0220028203
Study on Induction Callus of Alfalfa and Its Tissue Culture
YAN G Qi2jian1
, ZHOU He
2
, SUN Yan2
, LU Ping1
(
1
Beijing Agricultural College , Beijing 102206 ;
2
China Agricultural University , Beijing 100094 )
Abstract :Purple flower clover with it s good quality , easy to cultivation , occupies an important position in an2
imal feed herbage. This text studied induction of the seedling cotyledon and hypocotyls of alfalfa. The result
showed that MS + 2 ,42D(2mg L) 、 MS + 62BA(2mg L) 、 MS + NAA(0. 5mg L) were good inducible cul2
ture mediums for restoring the tissue , bud and root .
Key words :Alfalfa ; seedling cotyledon ; hypocotyls ; tissue culture
近年来随着分子生物学的发展而兴起的DNA重组技术和转基因研究 ,要求植物组织培养操作技术
达到更高的水平。豆科牧草是最具有经济价值和营养价值牧草之一。紫花苜蓿具有饲用价值好(每千克
干物质平均含 017 个饲料单位) 、蛋白质含量高(约占干物质的 20 %)及在生长期间不用大量施用 N 肥
(具有固 N 根瘤菌)等特点 ,在畜牧业生产中长期以来发挥着重要作用 ,被人们冠以“牧草之王”的美
誉[124 ]。但是苜蓿的遗传改良工作相对滞后。苜蓿属内有 60 多个种 ,具有丰富的遗传资源 ,且野生苜蓿
在抗逆性、适应性等方面均优于栽培种苜蓿 ,如将其优良性状转移到后者就能进一步扩大苜蓿的种植范
围 ,提高产草量为生产服务。苜蓿常规有性杂交往往得不到种子或杂种不育 ,存在着不亲和现象 ,生物技
术的发展促进了远缘间遗传物质的重组研究。另外将一些优良基因导入或通过物理、化学手段诱变培养
优质高产多抗新品种是现代育种科学的发展方向 ,基因片段的转入及诱变处理对象多是具有分化再生能
力的愈伤组织 ,通过细胞的分裂增殖、分化、发育最终长成完整植株。本实验通过苜蓿无菌苗的子叶和下
胚轴的愈伤组织培养探讨其成苗过程中的特点 ,为其进一步利用提供参考。
1 材料和方法
111 实验材料 实验材料选取准噶尔苜蓿品种 ,由中国农业大学草地所提供。
112 外植体来源 外植体采用由无菌苗得到的子叶和下胚轴切段。将苜蓿种子用自来水冲洗 2 min ,滤
第 19 卷 第 2 期
2004年 4 月
北 京 农 学 院 学 报
JOURNAL OF BEIJ IN G AGRICUL TURAL COLL EGE
Vol . 19 , No. 2
Apr. , 2004
? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.纸吸干种子表面水分后用75 %酒精浸几秒钟再用013 %升汞溶液消毒 ,接种后经2 d培养种子可萌发 ,待
长出 2 片小子叶未长出真叶时即可取其不同部位作为外植体进行培养 ......
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