5 2 中 国 油 脂 2 0 0 5年第 3 0卷第 1 期

    文章编号 ： 1 0 0 3—7 9 6 9 { 2 0 0 5 } 0 1 —0 0 5 2—0 3 中图分类号 ： T Q 6 4 5 . 9 1 文献 标识码 ： A

    紫 外 分 光 光 度 法 测 定 大 豆 异 黄 酮 含 量

    王 哲 ， 白志明， 田娟娟 ， 宋宏哲

    ( 黑龙江双河松嫩大豆生物工程有限责任公司， 1 5 0 0 0 1 哈 尔滨市南岗区巴陵街 1 5 8号)

    摘要 ： 大豆异黄酮有 1 2种， 母核结构均是 3一苯基色原酮， 在 2 6 0 n m有最大吸收， 可用紫外分

    光光度 法测定异黄 酮含 量 。以大豆苷 元 ( D a i d z e i n ) 作 标 准品绘 制标 准 曲线 ， 建立 回 归方程 ， 相 关 系

    数r =0. 9 9 4 1 ， 方法回收率 1 0 0. 4 %， 变异 系数 0. 2 5 %， 证明方法可靠性好、 重现性高。

    关键 词 ： 大豆 ； 大豆异黄 酮； 紫外分 光光度法 ； 测定

    大豆异黄酮的生产， 由于提取 、 分离 、 精制工艺

    的不同， 大豆异黄酮组分是有差异的。当分析的样

    本数量较大时 ， 寻求操作简单 、 耗时少 、 分析迅速、 结

    果可靠的评价指标的方法具有重要的实际意义。大

    豆异黄酮在紫外光区有特征吸收 ， 大豆异黄酮 的各

    组分的最大吸收波长相差不大 ， 峰 的数 目较少。如

    染料木苷( G e n i s t e i n ) 在紫外区有很强的吸收带 ， 最大

    吸收波长为 2 6 0 n m， 大豆苷元( D a i d z e i n ) 最大吸收波

    长为 2 5 6 n m， 在 3 1 0 n m处有一个很小的肩峰 ， 这使

    紫外吸收作为评价指标成为可能。

    1 材料 与方法

    1. 1 仪 器

    紫外分光光度计( 日本岛津 u V一2 4 0 1 P C ) ， 分析

    天平( 万分之一) 。

    1 . 2 试 剂

    9 5 %乙醇 ， 分析纯 。

    大豆异黄酮样品粉 ， 本公司 自制。标准品大豆

    苷元( D a i d z e i n ) 纯度 9 8 %， 美国 S i g m a公司出品。

    1 . 3 标准 曲线 的绘 制

    1 . 3 . 1 标准 品溶液 的配 制 取 大豆苷元标 准品

    5 . 6 m g ， 用 5 0 %乙醇溶解并定容至 5 0 m L摇匀， 得浓

    度为 0 . 1 1 2 m g mL标准品溶液。

    1 . 3 . 2 标准 曲线的绘制 分别用移液管精密量取

    标准液 0. 5 、 1 . 0、 1 . 5 、 2 . 0、 2 . 5 、 3 . 0 mL ， 置 1 0 m L容

    量瓶中， 加 5 0 %乙醇稀释至刻度摇匀。用紫外分光

    光度计在 2 6 0 n m波长下测其吸光度 ， 以浓度为横坐

    标 ， 吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

    1. 4 加样 回收率的测 定

    取样品 2 . 0 m g ， 用 5 0 %乙醇溶解 ， 定容至 5 0 m L

    摇匀。取 1 . 0 m L该溶液移入 1 0 mL容量瓶中， 分别

    加标准液 1 . 0 、 2 . 0、 3. 0 m L混匀后 ， 在 2 6 0 n m下测定

    吸光度 ， 计算加样回收率。

    加样回收率( %)=( 测得浓度 一本底浓度) 加

    标 品量 ×1 0 0 。

    1 . 5 重复性 实验

    取样品 2 . 0 m g ， 用 5 0 %乙醇溶解， 定容至 5 0 m L

    摇匀 ， 在 2 6 0 n m下， 重复测定 6次 ， 计算变异系数。

    2 结果与讨论

    2. 1 标准 曲线 的绘 制

    按 1 . 3 . 2所述方法进行操作， 得测定数据见表

    1 ， 绘制的标准曲线见图 1 。

    表 1 标准曲线测定数据

    C

    收稿 日期 ： 2 0 0 4—0 4—2 2； 修回 日期 ： 2 0 0 4—1 0—2 5

    作者简介： 王 哲( 1 9 . 5 8一) ， 男 ， 高级工程师 ； 主要从事 图 I 标准曲线

    油脂工程技术和大豆深加工的研究工作 。 2. 2 加样 回收率的测 定

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    加样回收率测定数据见表 2 。

    表 2 加样 回收率测定数据

    由表 2可知 ， 平均回收率 1 0 0. 4 %， 证 明此方法

    可行。

    2 . 3 重复性 实验

    重复性实验测定数据见表 3 。

    表 3 重复性测定数据

    由表 3可知， 平均百分含量为 3 8 . 4 6 %， 变异系

    数是 0. 2 5 %。

    2. 4 样 品测定

    2. 4 . 1 样 品 的预处 理 取样 品 5 g ......