萃取分光光度法测定盐酸洛美沙星

    谭 峰 郎惠云3

    李 媛

    (西北大学化学系 ,西安 710069)

    摘 要 提出了测定盐酸洛美沙星(LMX)的萃取分光光度法 ,该法基于在弱酸性条件下 ,盐酸洛美沙星

    与溴甲酚绿(BMG)反应生成可被三氯甲烷萃取的离子对缔合物 ,其最大吸收波长为 415 nm。药物浓度

    在1～15 mg L( r = 0. 9997)范围内符合比耳定律。表观摩尔吸收系数ε= 2. 5 ×104

    L· mol

    - 1

    · cm- 1。最低

    检出限为0. 014 mg L。回收率为98. 9 %～101. 6 %。该法可成功的用于药物制剂中洛美沙星含量的测定。

    关键词 萃取分光光度法 ,盐酸洛美沙星 ,离子对缔合物

    2000206223收稿;2000212218接受

    1 引 言

    盐酸洛美沙星(LMX)是新一代喹诺酮类广谱抗菌素 ,对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌及部分厌氧

    菌、金黄色葡萄球菌、流感杆菌及大肠杆菌都有很强的杀灭作用。文献报道的测量方法有紫外光度

    (UV)法〔 1〕、液相色谱(HPLC)法〔 2〕、分光光度法〔 3〕、原子吸收法(ASS)

    〔 4〕。中国药典尚未收载其测定方

    法。HPLC法和AAS法由于所用仪器昂贵 ,一般实验室难以开展 ,且 HPLC法操作条件较严格 ,而 AAS

    法测定该药物的灵敏度不高。普通 UV 法的专属性不强 ,干扰较大。本文利用LMX结构中含有胺基 ,在适当酸度条件下与氢结合形成正离子 ,与溴甲酚绿(BMG)分子中磺酸基负离子结合形成离子对缔合

    物(BH+

    A-) ,该缔合物可溶于氯仿 ,在415 nm处有最大吸收 ,可用于定量测定。与上述文献方法比较 ,该法具有简便、快速、准确性和灵敏度高等优点。用于实际样品测定 ,获得了满意的结果。

    2 实验部分

    211 仪器与试剂

    TU21221型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司) ,pH2HJ90B数字酸度计(北京海

    淀航天计算机公司) 。盐酸洛美沙星标准溶液:准确称取LMX标准品(99150 %) (江苏第二制厂) 0. 0500

    g ,用0. 1 mol mL 醋酸配成0. 5 g L 的标准储备液 ,用时稀释成50 mg L 的标准使用液。溴甲酚绿溶液:

    准确称取011000 g BMG溶于10 mL 0. 1 mol L 的氢氧化钠中 ,用水定容至100 mL ;醋酸2醋酸钠缓冲溶液

    (pH 3. 6) ;三氯甲烷。以上试剂均为分析纯 ,水为二次去离子水。

    212 实验方法

    移取适量LMX使用液于分液漏斗中 ,加入BMG标准溶液2 mL ,醋酸2醋酸钠缓冲溶液2 mL ,加入氯

    仿7 mL ,振摇0. 5 min ,静置5 min ,分出 CHCl3 层 ,以试剂空白为参比 ,在415 nm处测其吸光度。

    3 结果与讨论

    311 最佳实验条件的选择

    31111 吸收光谱 以实验方法处理得到的 CHCl3 层 ,以试剂空白为参比 ,进行光谱扫描 ,结果见图 1。

    图1表明 ,离子对缔合物λmax = 415 nm。药物的λmax = 287. 5 nm。

    31112 酸度的影响 在中性及碱性条件下 ,缔合物难以生成。pH < 2. 4 ,生成的缔合物吸光度值很低 ,表明在强酸性条件下 ,也不利于缔合物的形成。在pH = 2. 8～4. 1 范围内 ,缔合物的吸光度值最大且稳

    定。这是由于在强酸性条件下 ,BMG分子的磺酸基电离受到抑制 ,而在中性及碱性条件下 ,LMX分子上

    的胺基又难以与 H+

    结合形成带正电的离子 ,因此 ,在这两种情况下 ,均不利于缔合物的生成。故本实

    第29卷

    2001年5月 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究简报

    Chinese Journal of Analytical Chemistry

    第5期

    561～564 图1 洛美沙星(1)和离子对缔合物(2)的吸收光谱

    Fig. 1 Absorption spectra of lomefloxocin (1) and its ionic

    associate (2)

    验用 HAc2NaOH作为缓冲溶液 ,控制溶液酸度为 pH

    3. 6。

    31113 反应温度及时间 将反应体系置于不同的温

    度下反应一定时间后 ,进行萃取测定 ,结果表明 ,不

    同温度下对应的吸光度无显著变化。反应时间实验

    表明 ,该离子缔合物的生成是瞬时完成的。本文是

    在室温条件下操作的。

    31114 萃取溶剂的选择 本实验选用了环己烷 ,苯 ,氯仿 ,1 ,22二氯乙烷 ,乙酸乙酯 ,MIBK等作为萃取溶

    剂 ,结果见表 1。表 1 表明 ,低介电常数( ε) 的环己

    烷 ,苯作溶剂时 ,不能将缔合物萃入有机相。 ε较大

    的乙酸乙酯和 MIBK也不能进行有效的萃取。氯仿

    和1 ,22二氯乙烷萃取能力相当 ,但在用 1 ,22二氯乙

    烷作溶剂时 ,两相分层较氯仿慢 ,所以本文选用氯仿作为溶剂。由于LMX分子与BMG分子均具有离子

    大 ,电荷小 ,疏水性强 ,容易极化的特点 ,理论上需要用弱极性的溶剂〔 5〕。但实验结果却发现用苯和环己

    烷时 ,萃取效率并不好 ,且有不溶于水相和有机相的物质生成。这可能是因为该离子缔合物分子中存在

    亲水性基团 - OH及 - COOH的缘故。乙酸乙酯及 MIBK等因为是含氧的溶剂 ,在酸性介质中 ,会与

    BMG反应 ,所以不能作为溶剂。

    表1 溶剂对测定结果的影响

    Table 1 Effect of solvents on the determination results

    环己烷 Cyclohexane

    苯 Benzene

    氯仿 Chloroform

    乙酸己酯 Acetic ether

    1 ,22二氯乙烷 1 ,22Dichloro ethane

    MIBK

    Methyliso2butyl

    ketone

    介电常数( ε )

    Dielectric constant

    2. 02 2. 28 4. 81 6. 02 10. 36 18. 3

    吸光度( A)

    Absorbance

    - 0. 066 0. 016 0. 483 0. 031 0. 48 0. 068

    表中ε值引自文献〔 6〕的附表5 :174 ( εare taken from appendix 5 in reference 6)

    31115 缓冲溶液的选择 实验选用了醋酸2醋酸钠 ,醋酸铵2HCl ,柠檬酸2NaOH ,KH2PO42HCl 等不同的缓

    冲溶液 ,发现以醋酸2醋酸钠作为缓冲溶液 ,缔合物的吸光度最大 ......