嵌合抗菌肽的研究
嵌合,1.HMGN2的抗菌作用及其抗菌结构域,2.HMGN2跨膜螺旋结构域3.HMGN2跨膜螺旋结构域抗肿瘤免疫毒素的研究,4.人防御素2抗肿瘤嵌合核酸疫苗的研究,参考文献
嵌合蛋白(Chimeric protein)是20世纪90年代发展起来的一种基因工程技术，通过PCR拼接技术，将2个或以上生物活性蛋白或其功能结构域编码基因偶联起来，以产生新的生物活性蛋白。比如CD4免疫粘附素。CD4分子是一种辅助T淋巴细胞和巨噬细胞的跨膜蛋白，是爱滋病病毒(HIV)的受体，HIV通过CD4复合受体进入和感染T淋巴细胞和巨噬细胞，导致免疫功能受损。CD4跨膜蛋白的细胞外区段可从细胞膜上脱落下来，进入血循环，这个细胞外区段称为可溶性CD4分子，它可以与HIV外膜糖蛋白特异结合。CD4免疫粘附素就是将CD4分子的细胞外区段的编码基因与IgG的轻链和重链基因偶联产生的，它增强了可溶性CD4分子结合爱滋病病毒的效价，提高了可溶性CD4在血中的半衰期和穿透胎盘的能力。21世纪初叶国外有报道将人防御素2(hBD2)成熟肽编码基因与无免疫原性的小鼠骨髓瘤细胞特异抗原(Ig)基因偶联，获得一个新的DNA疫苗，免疫小鼠，产生极强的针对小鼠骨髓瘤细胞的特异抗体和CTL反应，并保护小鼠免遭小鼠骨髓瘤细胞毒株的致死性攻击。我们对嵌合抗菌肽的研究主要集中在增强我们自己新近鉴定出的人LAK细胞抗菌多肽HMGN2生物学功能上。1.HMGN2的抗菌作用及其抗菌结构域
我们应用微量电泳凝胶琼脂糖弥散抗菌检测法、制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶洗脱电泳和反向高效液相色谱技术，分别从人LAK细胞和子宫颈黏液中分离鉴定出一个抗菌多肽，经N端氨基酸序列测定、质谱分析、全长cDNA克隆和免疫印迹等实验证明为HMGN2。
HMGN2属于高迁移率非组蛋白(High mobility group chromosomal protein , HMG)家族成员，是脊椎动物和非脊椎动物细胞核中含量最丰富的非组蛋白家族，早期研究认为HMGN2与DNA复制和转录活性有关。我们首次发现HMGN2的抗菌活性，为了证明HMGN2在免疫反应中发挥作用，我们对其亚细胞定位特别是免疫反应时的定位分布进行了研究 ......
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