RNAi(RNA interference)即RNA干扰，是最近几年发现和发展起来的一门新兴的在转录水平上的基因阻断技术。是一种双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)分子在mRNA水平上关闭相应序列基因的表达或使其沉默的过程，也就是序列特异性的转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing，PT-GS)。RNAi是存在于真核细胞内的一种自我保护现象，既能对抗如病毒基因或人工转入基因所表达的mRNA等外源基因的侵害，又能降解自身是常基因产生的mRNA。这种属于RNA水平上的基因抑制，可能是生物普遍存在的RNA水平上调节基因表达的方式，同时也提供了一种特异性失活功能基因的方法。由于可以作为代替基因敲除的遗传工具，RNAi技术正在改变着功能基因组学领域的研究步伐。《科学》杂志和美国科学促进会将RNAi技术评选为2002年十大重大科学成就之首。

     1 RNAi技术

    RNAi是一种在动植物中广泛存在的序列特异性转录后水平的基因沉默过程，由于被抑抑基因同源的dsRNA所启动，是生物基因组抵抗转座子或病毒之类的外来遗传元件入侵的一种保护性机制，具有以下四个重要特征 [1，2] :①RNAi属于转录后水平的基因沉默机制，迄今为止的研究认为RNAi对染色体DNA序列的复制和转录过程不产生任何影响;②具有高度的序列特异性，最近将人工合成的siRNAs(短小RNA，是RNAi过程中直接起作用的分子)转入宿主细胞的实 验表明，即使siRNAs中只有一个碱基与靶序列错配，也会使干涉效应大大减弱;③具有抑制基因表达的高效性，可以引起该基因缺失突变的表型;而且远远少于内源mRNA数量的dsRNA就可以实现完全的抑制效应，即其发生过程中存在着正反馈的信号放大效应;④RNAi的效应可以在不同细胞间长距离传递和维持，而且在某些生物中(比如线虫)具有遗传性。

     2 RNAi技术在基因干涉中的优势

    2.1 基因干涉 基因干涉主要有干涉靶基因DNA和干涉靶基因mRNA两种方法。目前干涉靶基因DNA的策略主要有三种:(1)基因敲除。细胞分裂时，靶载体与目的基因通过同源重组发生连锁互换，从而破坏目的基因。此项技术改进后，可以进行时空特定性基因敲除 [3，4] 。其缺点是费时、昂贵且有遗传性，需克服很多障碍才能应用于临床 [5，6] ;(2)用合成寡核苷酸与双链DNA杂交 ......