鸭MHC I 轻链 cDNA克隆及其蛋白的空间结构
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为了阐明鸭主要组织相容性复合体 I 结构并推进其功能研究，本文采用Full RACE法从其淋巴细胞cDNA文库中克隆了鸭MHC I 轻链 (Anpl-b2m) cDNA. 随后，在pMAL-p2X/E.coli表达系中可溶性表达了其成熟肽蛋白，并进行了纯化、蛋白酶切和Western Blot分析鉴定. 最后，测定了Anpl-b2m和MBP的圆二色谱(CD)值. Anpl-b2m cDNA全长792 bp，包含18 bp 5’端和414bp 3’端非翻译区. 其ORF为119个氨基酸 (aa)，包含20个aa信号肽和99 aa成熟肽. 在成熟肽序列的第25位和80位为半胱氨酸(C)；并且，在第80位半胱氨酸附近序列为“YTCRVDH”，与免疫球蛋白超基因家族的特征基序 “F/YCXV/AXH”相符. Anpl-β2m氨基酸序列与鸡、鱼、蛙、人和鼠β2m比较，其同源性为30.3%-65.9%. CD结果表明Anpl-b2m α螺旋、β折叠、转角、随机卷曲分别为0 aa、50 aa、23 aa 和26 aa，呈典型的β折叠. 同源模建揭示了Anpl-b2m三级结构(3D)是由7个β片层折叠而成，与人和小鼠b2m 3D结构相似.
为了阐明鸭主要组织相容性复合体 I 结构并推进其功能研究，本文采用Full RACE法从其淋巴细胞cDNA文库中克隆了鸭MHC I 轻链 (Anpl-b2m) cDNA. 随后，在pMAL-p2X/E.coli表达系中可溶性表达了其成熟肽蛋白，并进行了纯化、蛋白酶切和Western Blot分析鉴定. 最后，测定了Anpl-b2m和MBP的圆二色谱(CD)值. Anpl-b2m cDNA全长792 bp，包含18 bp 5’端和414bp 3’端非翻译区. 其ORF为119个氨基酸 (aa)，包含20个aa信号肽和99 aa成熟肽. 在成熟肽序列的第25位和80位为半胱氨酸(C)；并且，在第80位半胱氨酸附近序列为“YTCRVDH”，与免疫球蛋白超基因家族的特征基序 “F/YCXV/AXH”相符. Anpl-β2m氨基酸序列与鸡、鱼、蛙、人和鼠β2m比较，其同源性为30.3%-65.9%. CD结果表明Anpl-b2m α螺旋、β折叠、转角、随机卷曲分别为0 aa、50 aa、23 aa 和26 aa，呈典型的β折叠. 同源模建揭示了Anpl-b2m三级结构(3D)是由7个β片层折叠而成，与人和小鼠b2m 3D结构相似.
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