乳胶层析法与ELISA法检测乙型肝炎病毒标志物的比较
摘 要 目的 探讨乳胶层析法与酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎五项病毒标志物的阳性符合率、阴性符合部与总符合率。方法 分别用乳胶层析法和酶联免疫吸附法检测95例血清中乙肝病毒五项标志物,比较两种方法检测结果。结果 95例标本中,乳胶层析法检测结果表面抗体(HBsAb)出现4例假阴性、e抗体(HBeAb)出现2例假阴性、核心抗体(HBcAb)出现4例假阴性,表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)检测结果两法完全相符,各项指标检测P>0.05,两法结果无显著性差异。结论 乳胶层析法快速简便,适合大范围筛查乙型肝炎病毒感染。
关键词 乳胶层析法;酶联免疫吸附试验;乙型肝炎病毒标志物。
乙型病毒性肝炎是我国目前严重危害人类健康的传染病之一,感染率为10%左右[1],其防治的关键是早诊断、早治疗。目前实验室普遍使用的检测方法是ELISA法,该法具有高度的灵敏度与特异性[2],且与放射免疫分析(RIA)相比,试剂稳定,无放射性危害[3]。但其操作较繁琐、费时。为此,我们选用乳胶层析法与ELISA法进行对比,以探讨ACON乳胶层析法的临床应用价值,现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
随机抽取2004年入学新生95例,其中男47人,女48人,空腹静脉采血,室温凝固后离心分离。乳胶层析法试剂板由艾康生物技术(杭州)有限公司提供(在有效期内使用),ELISA试剂盒由潍坊三维生物工程集团有限公司提供(在有效期内使用)。
1.2 方法
乳胶层析法中HBsAb、HBeAg采用双抗体夹心法,HBsAb采用双抗原夹心法,HBeAb、HBcAb检测试纸条采用竞争抑制法。使用本法测试前要求将血清标本恢复至室温,然后从原包装铝箔袋中取出试剂板(1 h内尽快使用),用吸管吸取血清标本,逐滴(每孔2-3滴)加入试剂板的5个孔中,等待红色条带的出现,测试结果在15min以内读取结果,20min后判定结果无效。结果判定:HBsAg、HBsAb、HBeAg阳性为出现两条红色条带,一条位于测试区内,一条位于质控区内,阴性为仅质控区内出现一条红色条带,若测试区及质控区内均无红色条带出现则为试剂板失效;HBeAb、HBcAb阳性为仅在质控区内出现一条红色条带,阴性为出现两条红色条带,一条位于测试区内;一条位于质控区内,若测试区及质控区内均无红色条带出现则为试剂板失效。ELISA法按试剂说明书严格操作。
1.3 统计学方法 采用χ2检验
2 结 果
乳胶层析法检测乙型肝炎五项标志物结果,见表1。表1 乳胶层析法与ELISA法检测结果(略)
乳胶层析法检测乙型肝炎五项病毒标志物结果HBsAb出现4例假阴性,HBeAb出现2例假阴性,HBcAb出现4例假阴性,HBsAg、HBeAg与ELISA法完全相符。HBsAg、HBeAg阳性符合率为100%,阴性符合率为100%,总符合率为100%;HBsAb阳性符合率、阴性符合率及总符合率分别为92.7%、90.9%、95.8%;HBeAb阳性符合率、阴性符合率及总符合率分别为81.2%、97.7%、97.9%;HbcAb阳性符合率、阴性符合率及总符合率分别为87.9%、93.9%、95.8%。乳胶层析法各项指标检测结果与ELISA比较均为P>0.05(χ2检验),两法之间差异无显著性,见表1。
3 讨 论
病毒性乙型肝炎主要传染源是病人和携带者,主要传染途径是通过输血、注射、外科或牙科手术、针刺等,传染源携带者的危险性比病人更大[3],因此对乙型肝炎病毒标志物检测已成为人们日常体检、献血员体检以及医院急诊患者及手术患者的常规检测项目。目前检测乙型肝炎病毒标志物的方法有ELISA法、RIA[4],两法均有高度的灵敏度与特异性,但ELISA法操作较繁琐,并且洗板时易造成交叉污染,影响准确度;而RIA试剂不稳定,有放射性危害,检测仪器昂贵,成本过高。
目前对HBsAg快速检测已有较多报道,但对乳胶层析法快速检测乙型肝炎五项病毒标志物的报道不多。本文采用乳胶层析法检测95例标本中,在HBsAg、HbeAg两项指标上与ELISA法的符合率达100%,在检测HBsAb、HBeAb、HBcAb中亦有较高的阳性符合率、阴性符合率及总符合率,五项指标检测与ELISA比较无显著性差异。乳胶层析法操作简单、快速,一次加样即可检测五项指标,一人一板,无需温育、洗板,解决了ELISA法检测乙肝标志物操作繁琐、费时的缺陷,并且价格低廉,无需冷藏保存,适用于大面积体检筛查乙型肝炎病毒感染。
参考文献
[1]成军,张国祥,孙关忠,等.252例低滴度HBsAg感染乙肝标志物检测结果[J].中国实验诊断学,2000,4(6):266.
[2]王兰兰,柳永和.临床免疫学和免疫学检验[M].北京:人民卫生出版社,20032:85.
[3]陶义训.免疫学和免疫学检验[M].北京:人民卫生出版社,199710:155-155.
[4]巫向前.临床检验结果的评价[M].北京:人民卫生出版社,20004:434-434.
1.广东药学院 临床医学系;
2.广东药学院 医院门诊部 广东 广州 510240, 百拇医药(刘思敏 李东东 陈垦)
关键词 乳胶层析法;酶联免疫吸附试验;乙型肝炎病毒标志物。
乙型病毒性肝炎是我国目前严重危害人类健康的传染病之一,感染率为10%左右[1],其防治的关键是早诊断、早治疗。目前实验室普遍使用的检测方法是ELISA法,该法具有高度的灵敏度与特异性[2],且与放射免疫分析(RIA)相比,试剂稳定,无放射性危害[3]。但其操作较繁琐、费时。为此,我们选用乳胶层析法与ELISA法进行对比,以探讨ACON乳胶层析法的临床应用价值,现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
随机抽取2004年入学新生95例,其中男47人,女48人,空腹静脉采血,室温凝固后离心分离。乳胶层析法试剂板由艾康生物技术(杭州)有限公司提供(在有效期内使用),ELISA试剂盒由潍坊三维生物工程集团有限公司提供(在有效期内使用)。
1.2 方法
乳胶层析法中HBsAb、HBeAg采用双抗体夹心法,HBsAb采用双抗原夹心法,HBeAb、HBcAb检测试纸条采用竞争抑制法。使用本法测试前要求将血清标本恢复至室温,然后从原包装铝箔袋中取出试剂板(1 h内尽快使用),用吸管吸取血清标本,逐滴(每孔2-3滴)加入试剂板的5个孔中,等待红色条带的出现,测试结果在15min以内读取结果,20min后判定结果无效。结果判定:HBsAg、HBsAb、HBeAg阳性为出现两条红色条带,一条位于测试区内,一条位于质控区内,阴性为仅质控区内出现一条红色条带,若测试区及质控区内均无红色条带出现则为试剂板失效;HBeAb、HBcAb阳性为仅在质控区内出现一条红色条带,阴性为出现两条红色条带,一条位于测试区内;一条位于质控区内,若测试区及质控区内均无红色条带出现则为试剂板失效。ELISA法按试剂说明书严格操作。
1.3 统计学方法 采用χ2检验
2 结 果
乳胶层析法检测乙型肝炎五项标志物结果,见表1。表1 乳胶层析法与ELISA法检测结果(略)
乳胶层析法检测乙型肝炎五项病毒标志物结果HBsAb出现4例假阴性,HBeAb出现2例假阴性,HBcAb出现4例假阴性,HBsAg、HBeAg与ELISA法完全相符。HBsAg、HBeAg阳性符合率为100%,阴性符合率为100%,总符合率为100%;HBsAb阳性符合率、阴性符合率及总符合率分别为92.7%、90.9%、95.8%;HBeAb阳性符合率、阴性符合率及总符合率分别为81.2%、97.7%、97.9%;HbcAb阳性符合率、阴性符合率及总符合率分别为87.9%、93.9%、95.8%。乳胶层析法各项指标检测结果与ELISA比较均为P>0.05(χ2检验),两法之间差异无显著性,见表1。
3 讨 论
病毒性乙型肝炎主要传染源是病人和携带者,主要传染途径是通过输血、注射、外科或牙科手术、针刺等,传染源携带者的危险性比病人更大[3],因此对乙型肝炎病毒标志物检测已成为人们日常体检、献血员体检以及医院急诊患者及手术患者的常规检测项目。目前检测乙型肝炎病毒标志物的方法有ELISA法、RIA[4],两法均有高度的灵敏度与特异性,但ELISA法操作较繁琐,并且洗板时易造成交叉污染,影响准确度;而RIA试剂不稳定,有放射性危害,检测仪器昂贵,成本过高。
目前对HBsAg快速检测已有较多报道,但对乳胶层析法快速检测乙型肝炎五项病毒标志物的报道不多。本文采用乳胶层析法检测95例标本中,在HBsAg、HbeAg两项指标上与ELISA法的符合率达100%,在检测HBsAb、HBeAb、HBcAb中亦有较高的阳性符合率、阴性符合率及总符合率,五项指标检测与ELISA比较无显著性差异。乳胶层析法操作简单、快速,一次加样即可检测五项指标,一人一板,无需温育、洗板,解决了ELISA法检测乙肝标志物操作繁琐、费时的缺陷,并且价格低廉,无需冷藏保存,适用于大面积体检筛查乙型肝炎病毒感染。
参考文献
[1]成军,张国祥,孙关忠,等.252例低滴度HBsAg感染乙肝标志物检测结果[J].中国实验诊断学,2000,4(6):266.
[2]王兰兰,柳永和.临床免疫学和免疫学检验[M].北京:人民卫生出版社,20032:85.
[3]陶义训.免疫学和免疫学检验[M].北京:人民卫生出版社,199710:155-155.
[4]巫向前.临床检验结果的评价[M].北京:人民卫生出版社,20004:434-434.
1.广东药学院 临床医学系;
2.广东药学院 医院门诊部 广东 广州 510240, 百拇医药(刘思敏 李东东 陈垦)