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编号:11155482
嗪草酮与脱氧核糖核酸相互作用的研究嗪草酮与脱氧核糖核酸相互作用的研究
http://www.100md.com 《分析化学》 2006年第8期
嗪草酮,脱氧核糖核酸,紫外可见光谱,荧光光谱,粘度法,,嗪草酮,脱氧核糖核酸,紫外可见光谱,荧光光谱,粘度法,嵌入作用,1引
     摘要 采用电化学方法,结合紫外可见分光光度法、荧光光度法、粘度法和与变性脱氧核糖核酸(DNA)的作用研究了嗪草酮(M)与DNA的作用机制,并通过研究嗪草酮对溴化乙锭天然DNA体系的影响,以及天然DNA和变性DNA与嗪草酮的作用的不同,得出嗪草酮与DNA分子发生类似溴化乙锭(EB)嵌插作用的结论, 形成DNAM 1∶1型的超分子化合物DNAM。求得结合常数β=1.8×105 L/mol。DNA加入量在1×10-5~15×10-4 mol/L范围内,DNA浓度与峰电流降低值之间存在线性关系。

    关键词 嗪草酮,脱氧核糖核酸,紫外可见光谱,荧光光谱,粘度法,嵌入作用

     1 引言

    嗪草酮(metribuzin)又名赛克(sencor)或立克除(lexone),是广泛应用于大豆、马铃薯、番茄等旱地作物防除杂草的一种三氮苯类除草剂,嗪草酮目前已被确认是一种内分泌干扰物质,它对高等动物具有异常的生理效应。当它残留进入生物体内而富集到一定程度时就会产生生物毒性[1]。利用污染物与其作用靶标而形成的生物标志物来评价环境化学物质的生物毒性的方法日益受到关注 [2],其中脱氧核糖核酸(DNA)加和物因为能够反映化学致癌物与DNA作用而可以用作生物标志物来评价环境化学物质的潜在致癌性,因为所有的靶标酶和受体蛋白质都是从DNA经转录、翻译等过程产生的,所以DNA应该是最基本的作用靶标[3]。实验证明,在体内与DNA发生作用的药物都能在一定程度上在体外与DNA发生作用[4]。本实验是在研究一定条件下DNA使嗪草酮在玻碳电极上的电化学活性明显降低的情况下,结合紫外分光光度法、荧光光谱法、粘度法等对嗪草酮与DNA的相互作用进行了探讨。

     2 实验部分

    2.1 仪器与试剂

    BAS100A电化学分析仪(美国BAS公司);UV8500紫外/可见分光光度计(上海天美公司);RF540荧光光度计(日本岛津公司); PHS3C型pH计(上海精密科学仪器有限公司);乌氏粘度计;玻碳电极为工作电极,AgAgCl电极为参比电极,铂电极为对电极;小牛胸腺DNA(calf thymus DNA)为Sigma公司产品,使用前未进一步纯化。嗪草酮标准品(江苏七州绿色化工股份有限公司);其余试剂均为分析纯;实验用水均为石英亚沸二次蒸馏水。

    2.2 实验方法

    2.2.1 DNA纯度的确定 称取0.1 g DNA不经分离直接定容于100 mL容量瓶 ......

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