电喷雾多级串联质谱技术区分人乳寡糖异构体
电喷雾多级串联质谱,寡糖异构体,人乳寡糖,,电喷雾多级串联质谱,寡糖异构体,人乳寡糖,摘要,关键词,1引言,2实验部分,3结果与讨论,Reference
摘要 利用四极杆飞行时间(QTOF)电喷雾多级串联质谱(ESIMS/MS)与诱导碰撞解离技术(CID)在负离子模式下选择合适碰撞能量对几组互为异构体的人乳寡糖进行了分析, 并对其碎裂机理进行了探讨。结果表明：在二级质谱中碰撞能量范围为15～30 eV时，寡糖异构体产生其特征碎片离子，据此可以快速灵敏地区分寡糖异构体。关键词 电喷雾多级串联质谱,寡糖异构体,人乳寡糖
1 引言
电喷雾质谱(ESIMASS)是一种较新的软电离质谱技术。近年来，ESIMS已在糖的结构分析中显示出强大的生命力。由于ESIMS能检测非衍生化的糖，而且灵敏度高，因而无需衍生化就能区分寡糖的连接方式(O或N)，确定寡糖的结构、聚合度及组成。ESI与诱导碰撞解离(CID)技术和串联质谱(MS/MS)技术联用进行分析，可获得不同的碎片离子，由此得到低于pmol量寡糖异构体的形成模式等信息，进行不同寡糖结构的确认[1]。Chai等[2]认为负离子模式有着化学背景噪声小和较少阳离子加合物产生的优点，因此更适合寡糖的分析。并且负离子在解析寡糖连接方式等信息方面尤为有用。
寡糖是由2～10个单糖分子组成，以糖苷键连接形成直链或者支链的低聚合糖类，它们广泛存在于自然界中，包括动物的乳汁中。人乳中所含有的寡糖称为人乳寡糖(HMO)。构成HMO的单体主要有D葡萄糖(Glc)、D半乳糖(Gal)、N乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)、L岩藻糖(Fuc)和N乙酰神经氨酸(NeuAc)(即唾液酸)等5种基本结构[3]。所有的HMO中都存在一个由还原端的半乳糖单元连接N乙酰葡萄糖胺单元的核心结构。L岩藻糖或N乙酰神经氨酸残基连接在核心结构上，由于连接的多样性，即使是小分子的HMO也会存在多种异构体[4]。目前已经在人乳中分离出100多种寡糖，它们在维护肠道生态平衡，抵御肠道感染、调节免疫系统、预防癌症、防止慢性复发性结肠炎及促进新生儿大脑发育等方面有着重要的生物学作用[5]。Pfenninger等[5]对人乳中常见的几种中性寡糖进行了结构分析，并提出了人乳寡糖的一些特征质谱碎裂规律。Finke等[6]对一系列从人乳中分离得到的寡糖进行MALDIMS分析得到了含有单唾液酸的寡糖，但未提出分离分析寡糖异构体混合物的有效方法。本实验采用电喷雾多级串联质谱(MS/MS)与诱导碰撞解离(CID)联用技术在负离子模式下，对几种重要的未衍生化的人乳寡糖直接进行分析，区分了其中互为异构体的几种寡糖，建立了一种快速灵敏的寡糖异构体分析新方法 ......
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